如何確定數(shù)字PCR的LOB?

數(shù)字PCR技術(shù)是一項新的核酸檢測和定量技術(shù)�？瞻讬z測限LOB （Limit of Blank）是判斷數(shù)字PCR技術(shù)檢測能力的重要參數(shù)。
LOB（the limit of blank）是一項統(tǒng)計學(xué)實驗參數(shù)。在可信度大于95%的概率下，對于不含有分析物的樣品（空白樣品），LOB是可能觀察到的最高檢測結(jié)果。換句話說就是最大的假陽性數(shù)。 在數(shù)字PCR (dPCR)中，多種因素可以引起假陽性。定量核酸時確定假陽性的cutoff對dPCR檢測的穩(wěn)定性至關(guān)重要。為了定義這個cutoff，檢測閾值通常設(shè)置在LOB值之上，而在檢測校準(zhǔn)期間必須首先為每個目標(biāo)確定空白LOB值。此外，實驗LOB值對于判斷反應(yīng)是正還是負(fù)以及計算LOD值都是必要的。
95%置信度LOB如下表所示： μ和α：分別為假陽性個數(shù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)方差
μ_corr：校正平均值
當(dāng)μ=0（即假陽性永遠不會出現(xiàn)），則LOB（95%）=0
當(dāng)LOB為非零時，可以用概率分布加權(quán)的“減去假陽性”的方法來校正實驗樣品中目標(biāo)核酸的量。 更多LOB值介紹可登陸Gene-π數(shù)字PCR學(xué)堂（www.cycloudbio.com數(shù)字PCR學(xué)堂快速入口）統(tǒng)計工具查看，您也可以選擇其他感興趣的應(yīng)用教程，其中包含從實驗設(shè)計到數(shù)據(jù)分析的詳細(xì)工作流程。 您還可以通過搜索導(dǎo)航工具直接搜索特定的項目（"dPCR的DNA準(zhǔn)備"，"熒光溢出"等），或點擊我們的"HOW TO" 選擇您需要的部分（設(shè)計、分析、報告）。