生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),用來保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。
今天我們將從使用原理、類別、功能等多個(gè)角度聊一聊生物安全柜的那些事兒。
作用
防止操作者和環(huán)境暴露于實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠的負(fù)壓過濾排風(fēng)柜,是防止實(shí)驗(yàn)室獲得性感染的主要設(shè)備。
工作原理
將柜內(nèi)空氣向外抽吸,使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài),通過垂直氣流來保護(hù)工作人員;外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi),以避免樣品被污染;柜內(nèi)的空氣也經(jīng)過過濾器的過濾后再排到大氣中,以保護(hù)環(huán)境。
生物安全柜的分類
1一級(jí)生物安全柜
可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品,其氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥基本相同,不同之處在于排氣口安裝有HEPA 過濾器,將外排氣流過濾進(jìn)而防止微生物氣溶膠擴(kuò)散造成污染。一級(jí)生物安全柜本身無風(fēng)機(jī),依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流,由于不能保護(hù)柜內(nèi)產(chǎn)品,目前已較少使用。
2二級(jí)生物安全柜
目前應(yīng)用最為廣泛的柜型,按照《中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》中的規(guī)定,二級(jí)生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)級(jí)別:
A1型,A2型,B1型和B2型,所有的二級(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護(hù),A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。無內(nèi)部循環(huán)氣流,100%的氣體通過排氣口過濾排出。
A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排出。
二級(jí)B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜:連接安全柜排氣導(dǎo)管的風(fēng)機(jī)連接緊急供應(yīng)電源,目的在斷電下仍可保持安全柜負(fù)壓,以免危險(xiǎn)氣體泄漏如實(shí)驗(yàn)室。其前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s(100fpm)。
B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除,30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。
B2型為100%全排型安全柜,無內(nèi)部循環(huán)氣流,可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制,可以操作揮發(fā)性化學(xué)品和揮發(fā)性核放射物作為添加劑的微生物實(shí)驗(yàn)。3三級(jí)生物安全柜
為生物安全防護(hù)等級(jí)為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì)的,柜體完全氣密,工作人員通過連接在柜體的手套進(jìn)行操作,俗稱手套箱(Golve box),試驗(yàn)品通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染,適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn),如,進(jìn)行SARS、埃博拉病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)等;
根據(jù)生物安全柜的強(qiáng)制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,只有獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的三類醫(yī)療器械注冊(cè)證的產(chǎn)品才能真正保護(hù)操作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和操作樣本;生物安全柜提供對(duì)人/樣品及環(huán)境的三重保護(hù)。
生物安全柜的使用
1.安裝:確保安全柜與外部排風(fēng)系統(tǒng)壓力平衡,保證安全柜處于正常工作狀態(tài)
2.維護(hù):定期維護(hù)和檢測(cè),確保安全性
3、制定計(jì)劃:工作前認(rèn)真理解操作步驟和所需設(shè),盡量減少擾動(dòng),準(zhǔn)備好消毒劑
4、開始:關(guān)紫外燈,前窗開至適當(dāng)高度,打開安全柜的燈和風(fēng)扇;檢查出風(fēng)口是否有障礙物,等待5min;用消毒液徹底洗凈手和手臂;穿長袖工作服和手套;帶防護(hù)眼鏡
5、清潔:用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┎潦霉ぷ鲄^(qū)域內(nèi)壁
6、上樣:只放入所需物品,不能超載;出風(fēng)口不要有障礙物,大物體間要保持一定距離;前窗降至適當(dāng)高度,2-3min以吹掃污染物
7、最后的吹掃:工作結(jié)束,繼續(xù)開機(jī)10-15min
8、下樣:與污染物接觸的物品,取出之前必須經(jīng)表面去污處理,所有托盤或容器取出前必須加蓋
9、清潔:用消毒劑清潔內(nèi)壁,待其干燥;定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域。
10、技巧:
•所有物品離前窗至少2英寸,所有污染性的操作盡量遠(yuǎn)離工作區(qū)域的后部
•干凈的與污染的物品分開放置;污染物品盡量放置在工作區(qū)域后部
•操作時(shí)物品和手臂不要穿過前窗
•避免使用明火,用適當(dāng)?shù)臏缇胧?bull;避免使用干擾安全柜內(nèi)層流的實(shí)驗(yàn)手段
•安全柜處于操作狀態(tài)時(shí),徹底消毒內(nèi)壁
生物安全柜的操作注意事項(xiàng)
操作者:生物安全柜如果使用不當(dāng),其防護(hù)作用就可能大大受到影響。
紫外燈:生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話,應(yīng)該每周進(jìn)行清潔,以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
明火:在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中,應(yīng)避免使用明火。
溢出:實(shí)驗(yàn)室中要張貼如何處理溢出物的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)則,每一位使用實(shí)驗(yàn)室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)程。
清潔和消毒:由于剩余的培養(yǎng)基可能會(huì)使微生物生長繁殖,因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),包括儀器設(shè)備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清除表面污染,并移出安全柜。
除污染:生物安全柜在移動(dòng)以及更換過濾器之前,必須清除污染。