動物腦電極使用及手術(shù)指導(dǎo)

電極的阻抗值是一個范圍,不同廠家選用的電極絲直徑、材質(zhì)、加工工藝都會導(dǎo)致做出的阻抗值不盡相同,因此應(yīng)以最后能夠采集到信噪比較高的信號為準(zhǔn)
 
1.4存放電極
 
急性實驗電極可以多次使用,從動物體內(nèi)取出后的電極放在酒精液中浸泡一段時間(硅膠材質(zhì)的電極不能使用酒精長時間浸泡),用注射器抽取生理鹽水對電極絲的部位輕輕沖洗,將電極上殘留的組織清洗干凈。對于急性單電極(多通道陣列電極不適用),若尖端處沾有難以清洗的組織,可使蘸有酒精的棉球從電極尾部向尖端小心輕輕擦拭,此過程中切勿對電極絲受力或反向擦拭。最后用原包裝盒內(nèi)的海綿固定封裝存放(勿將電極絲觸碰到海綿),勿將電極存放于粉塵顆粒物較多的的環(huán)境中。
 

本手術(shù)操作以大鼠(體重250-300g)為例。

 

止血鉗、鑷子、手術(shù)剪刀(大剪刀及小剪刀)、縫合針線、手術(shù)刀柄和刀片、顱骨鉆及鉆頭(0.8mm)、螺絲刀、電動剃、注射器等,所有的手術(shù)器械在使用前均需經(jīng)過嚴格消毒處理。

2.3主要材料及藥品試劑

無菌生理鹽水、75%醫(yī)用酒精、碘伏、酒精棉及棉簽、脫毛膏、不銹鋼微型螺絲釘(M1*2、M1*3,使用前應(yīng)使用75%酒精充分浸泡清洗),牙科水泥粉、戊巴比妥鈉溶液(1%,現(xiàn)配)、紅霉素眼膏、利多卡因膏、三聯(lián)抗生素、阿托品(1mg/mL)、地塞米松、卡洛芬等。

2.4手術(shù)操作步驟
 
2.4.1稱重
 將大小約20*20*20cm的盒子置于電子秤上,去皮,把大鼠放置在盒子內(nèi)(抓大鼠時需帶上防咬手套),讀數(shù)。

2.4.2麻醉
 麻醉對整個手術(shù)至關(guān)重要,其麻醉的穩(wěn)定性直接影響到手術(shù)結(jié)果的好壞。若要獲得更好的麻醉效果,建議使用異氟烷呼吸麻醉,但由于呼吸麻醉成本較高且麻煩,多數(shù)實驗室還是使用注射麻醉,因此這里以注射麻醉為例。麻醉劑采用1%戊巴比妥鈉溶液(戊巴比妥鈉比水合氯醛麻醉更穩(wěn)定,但容易產(chǎn)痰,需要備吸管幫助吸出痰),劑量為0.5m/100g(50mg/Kg)。腹腔注射前先對大鼠用異氟烷短暫麻醉,具體操作:將大鼠放進透明盒子中,此時將蘸有異氟烷的棉球丟入盒子內(nèi),密封,待大鼠安靜不動,呼吸均勻(1次/秒)時取出。腹腔注射:將大鼠仰面朝向,提起一側(cè)后肢,在大腿根與腹中線的中間位置刺入皮下,在皮下平行于腹中線推進針頭3-5mm,再以45°角向腹腔內(nèi)刺入,針尖通過腹肌后,無阻力,回抽無回流物,緩慢注入麻藥。注射麻藥后,對大鼠進行疼痛反射(掐尾端或后腳掌)和眼角膜反射來判斷麻醉效果。在15min之后還未能完全麻醉的大鼠可適當(dāng)補加0.2-0.5m的1%戊巴比妥鈉溶液。若手術(shù)時間較長,應(yīng)每隔1h檢查大鼠麻醉狀態(tài),當(dāng)出現(xiàn)疼痛反應(yīng)時,應(yīng)補加05m的1%戊巴比妥鈉溶液。手術(shù)中,應(yīng)將大鼠舌頭從口的一側(cè)拉出,為防止大鼠在麻醉過程中呼吸道出現(xiàn)過多分泌物導(dǎo)致窒息,可在麻醉過程中注射0.5m阿托品(1mg/m)。
 
2.4.3去毛
用左手將麻醉后的大鼠托住,右手手持電動剃逆著大鼠毛發(fā)的方向(從后往前)將頭頂?shù)拿�發(fā)剃除,一般剃毛范圍是兩耳之間,前至兩眼間,后至頸部始端。若要達到更好的干凈度,可涂抹少量脫毛膏,使用后需要使用生理鹽水清洗掉殘余物。

2.4.4固定
大鼠固定的好壞會直接影響到手術(shù)中信號采集的穩(wěn)定性,甚至?xí)�影響到慢性植入后的效果。首先將一�?cè)耳桿固定,找到大鼠耳道稍向前上方的骨性凹陷處(可以用手觸摸到),將其中一側(cè)的凹陷處貼在固定的耳桿上(提前涂抹少量利多卡因藥膏可以避免耳桿對大鼠刺激),此時將另一側(cè)耳桿也插入對應(yīng)的位置,調(diào)節(jié)兩側(cè)耳桿長度,使之對稱,固定緊耳桿。左右及上下輕輕移動大鼠的頭部,避免出現(xiàn)松動及偏斜。在固定好大鼠耳桿后,還需將大鼠的上門齒固定。具體操作:將大鼠上門齒卡進門齒桿的槽內(nèi),下頜處于門齒桿的下方,然后下調(diào)兩側(cè)的眼眶固定桿,壓緊并固定。適當(dāng)調(diào)整各固定點,使得大鼠的整個顱骨面保持水平,從各個方向用力均不能移動大鼠的頭部。最后在大鼠的眼部涂抹上紅霉素眼膏或甘油,以防止手術(shù)燈的長時間照射造成眼部損傷以及保持眼睛的濕潤。另外,要用圓頭鑷子將大鼠的舌頭從口中一側(cè)拉出,防止手術(shù)中出現(xiàn)窒息。