液體活檢在CTCs檢測的應(yīng)用

2015年，液體活檢被《麻省理工大學(xué)科技評論》評選為年度十大突破技術(shù)，據(jù)Piper Jaffray預(yù)測，2026年廣義液體活檢全球市場總?cè)萘考s326億美元，包括癌癥領(lǐng)域286億美元、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷（NIPT）20億美元、器官移植20億美元。在眾多應(yīng)用場景中，液體活檢在癌癥領(lǐng)域的應(yīng)用占據(jù)超過85%的市場份額，大約為150億美元。
作為體外診斷的一個分支，液體活檢一般是指通過檢測血液中的CTC(循環(huán)腫瘤細(xì)胞，Circulating Tumor Cell)和ctDNA(循環(huán)腫瘤DNA，Circulating Tumor DNA)獲取患者腫瘤病變信息，用以幫助診斷和治療。與傳統(tǒng)的組織活檢相比其優(yōu)勢在于能通過非侵入性取樣降低活檢的危害，而且有效延長患者生存期。目前液體活檢的主要檢測物包括檢測血液中游離的循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs），循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）碎片，循環(huán)RNA（Circulating RNA）和外泌體（攜帶有細(xì)胞來源相關(guān)的多種蛋白質(zhì)，脂類，DNA，RNA等）。 循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating Tumor Cell，CTC）來源于原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移腫瘤，獲得脫離基底膜的能力并通過組織基質(zhì)進(jìn)入血管的腫瘤細(xì)胞。目前，CTCs是指存在于外周血中的各種腫瘤細(xì)胞的統(tǒng)稱。
循環(huán)游離DNA(Cell-free DNA，cfDNA)，或者叫血漿游離DNA，是血漿中游離存在的DNA，有的來自于正常細(xì)胞，有的來自于異常細(xì)胞（如腫瘤細(xì)胞）還有部分來自于外部（如病毒DNA）。循環(huán)腫瘤DNA(Cell-free Circulating Tumor，ctDNA)，是指人體血液循環(huán)系統(tǒng)中不斷流動的攜帶一定特征（包括突變、缺失、插入、重排、拷貝數(shù)變異、甲基化等）來自腫瘤基因的DNA片段。被認(rèn)為是極具臨床應(yīng)用前景的腫瘤標(biāo)記物。CtDNA的主要來源包括：1.來自壞死的腫瘤細(xì)胞2.來自凋亡的腫瘤細(xì)胞3.循環(huán)腫瘤細(xì)胞4.來自腫瘤細(xì)胞分泌的外泌體。
對CTCs檢測包含細(xì)胞富集和細(xì)胞檢測兩部分，可以進(jìn)行不同的組合，形成不同的技術(shù)。最常見的富集方法是抗體介導(dǎo)或物理方法富集。
對ctDNA檢測主要有ARMS技術(shù)（包括Super-ARMS）、第二代測序（NGS）和數(shù)字PCR。
液體活檢技術(shù)使得癌癥早篩成為可能，無論是在腫瘤診斷，治療還是監(jiān)控領(lǐng)域，液體活檢的優(yōu)勢都使其成為最具發(fā)展?jié)摿Φ哪[瘤無創(chuàng)診斷手段，具有極高的臨床應(yīng)用價值和市場前景。
法國Stilla Technologies的Naica^TM微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)，利用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片——Sapphire芯片作為數(shù)字PCR過程的唯一耗材。樣品通過毛細(xì)通道網(wǎng)格以30,000個微滴的形式進(jìn)入2D芯片中。并且還是首款3色熒光檢測儀器，整個流程只需要兩個半小時。結(jié)合強大的圖像分析技術(shù)和直觀可視的檢測功能，從而達(dá)到了數(shù)字PCR定量卓越的置信水平，獲得的數(shù)據(jù)真實可信。