AVT無菌醫(yī)用海藻糖在細(xì)胞保存、器官保存和胚胎保存中的應(yīng)用

      現(xiàn)如今隨著低溫保存技術(shù)的不斷完善，已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了諸多生物材料的低溫保存，例如血細(xì)胞、干細(xì)胞、精子、卵細(xì)胞、胚胎、角膜、皮膚、胰島等。血細(xì)胞的長(zhǎng)期保存解決了臨床上血液供需不平衡的問題；干細(xì)胞的保存在治療再生障礙性貧血、白血病中能減少抗宿主病的發(fā)生率；生殖細(xì)胞的保存對(duì)再生醫(yī)學(xué)和輔助生殖有著重大的意義；動(dòng)物胚胎保存為挽救瀕危動(dòng)植物帶來了極大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益；胰島的保存為器官移植帶來了極大的便利。

       海藻糖是低溫保存常用的非滲透性保護(hù)劑，這類保護(hù)劑分子不能進(jìn)入細(xì)胞，但可以提高胞外溶液的溶質(zhì)濃度，不僅能在細(xì)胞外形成高滲，減少胞內(nèi)冰的形成，還具有較高的玻璃化溫度，易形成玻璃態(tài)，一方面避免了低溫對(duì)細(xì)胞膜蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的損傷，另一方面將細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子支撐包裹起來，使之不易變形，抑制細(xì)胞膜融合，降低細(xì)胞膜的通透性。

①器官保存：國(guó)外市場(chǎng)上，含海藻糖最有代表性的是日本京都大學(xué)研制的肺臟器官保存液，ET-Kyoto及New ET-Kyoto液，在國(guó)內(nèi)已申請(qǐng)專利，原申請(qǐng)人為日本京都大學(xué)，后轉(zhuǎn)至日本大冢制藥，在中國(guó)申請(qǐng)的發(fā)明專利于2012年授權(quán)。

②細(xì)胞保存：目前研究中，應(yīng)用含不同濃度海藻糖的保護(hù)液，對(duì)低溫保存肝癌細(xì)胞、犬氣管困、卵巢癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞及小鼠受精卵，均取得了良好的保存效果。胎牛血清( FBS)也有助于細(xì)胞的冷凍保存，且在腸道腫瘤組織原代細(xì)胞、牛成纖維細(xì)胞等低溫保存中效果顯著

Zheng等用麥管和石英毛細(xì)管作為冷凍載體，使用兩種滲透性保護(hù)劑EG和DMSO(體積分?jǐn)?shù)為8%、15%)及一種非滲透性保護(hù)劑海藻糖(0.5 M)玻璃化保存了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞( HUVECs)。結(jié)果表明，用1.4 M EG加1.1 M DMSO，并用石英毛細(xì)管玻璃化可以得到90%的存活率。

③胚胎保存：海藻糖單獨(dú)使用或與其它保護(hù)劑混合使用，均能對(duì)胚胎的保存起到良好的保護(hù)效果，Isachenko等使用含有海藻糖的玻璃化溶液保存山羊胚胎，發(fā)現(xiàn)保存后的胚胎不論在體內(nèi)還是體外均能達(dá)到較高的生存。

④皮膚保存：賈曉明等的研究表明，海藻糖作為一種新型的冷凍保護(hù)劑，對(duì)于皮膚組織的低溫保存具有良好的保護(hù)作用。其保護(hù)作用不僅體現(xiàn)在細(xì)胞骨架，還體現(xiàn)在對(duì)皮膚組織a-輔肌動(dòng)蛋白和p-整合素等的保護(hù)。

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