細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)各種添加物的具體作用

細(xì)胞培養(yǎng)的秘密法寶——添加物

通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。而除了血清之外，部分細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中需要添加胰島素（Insulin，貨號(hào)：CSP001）和β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol ，貨號(hào)：CSP005）等成分來(lái)維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7（ZQ0071）和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素，而Thp-1（ZQ0086）和MC3T3-E1 subclone 14（ZQ0095）等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異，需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。

細(xì)胞生長(zhǎng)分裂的過(guò)程中會(huì)釋放氧自由基，而氧自由基累積到一定程度會(huì)破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜，從而殺死細(xì)胞。這使得細(xì)胞達(dá)很難達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需的融合度，從而影響實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)。β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol ，貨號(hào)：CSP005）作為一種強(qiáng)還原，中和細(xì)胞培養(yǎng)基中積累的氧自由基從而改善細(xì)胞周圍環(huán)境。β-巰基乙醇在溶液中不穩(wěn)定，因此需要定期添加。本公司產(chǎn)品β-巰基乙醇（貨號(hào)：CSP005）用DPBS稀釋，濃度為50mM。例如：Thp-1細(xì)胞β-巰基乙醇終濃度為0.05mM，因此使用時(shí)需根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)要求添加。

丙酮酸鈉（Sodium Pyruvate，貨號(hào)：CSP003）是最常見(jiàn)的丙酮酸鹽，是一類內(nèi)源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內(nèi)，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫(yī)學(xué)上、診斷試劑以及醫(yī)療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。在人體中行動(dòng)中大多數(shù)細(xì)胞只利用葡萄糖作為能量的物質(zhì)就夠了，而在細(xì)胞培養(yǎng)中丙酮酸鈉是必須的物質(zhì)。丙酮酸鈉在培養(yǎng)基中起到替代碳源的作用，參與細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)代謝。Hep G2，Caov-3及 NCI-H1395細(xì)胞培養(yǎng)基中就需要額外添加丙酮酸鈉，以維持細(xì)胞良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。

L-谷氨酰胺（L-Glutamine，貨號(hào)：CSP004）是細(xì)胞生長(zhǎng)的必須氨基酸，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源，參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定，它的降解速率隨保存時(shí)間，保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺（L-alanyl-L-glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用的L-谷氨酰胺的替代品，其在水溶液中穩(wěn)定性高，即可保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)供給，也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液（L-alanyl-L-glutamine slution，貨號(hào)：CSP009）可作為哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比，L-丙胺酰-谷氨酰胺不會(huì)自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性，作為添加物培養(yǎng)條件更加可控，可有效提高細(xì)胞活力。

保持細(xì)胞生長(zhǎng)良好狀態(tài)的法寶當(dāng)屬抗生素，適量濃度的的抗生素可有效防止微生物的污染。青霉素-鏈霉素混合溶液（100× 雙抗，貨號(hào)：CSP006）（Penicillin-Streptomycin Solution, 100×）是專門(mén)用于細(xì)胞培養(yǎng)的雙抗，抗菌譜：革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液（100× 三抗，貨號(hào)：CSP007）（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution, 100×）也是可用于細(xì)胞培，抗菌譜：細(xì)菌、真菌和酵母。細(xì)胞培養(yǎng)需要了解不同細(xì)胞生長(zhǎng)特性，還需要及時(shí)補(bǔ)充各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以保持細(xì)胞良好的狀態(tài)。