自身免疫疾病藥物評價動物模型的應(yīng)用

今天為大家?guī)�來了百奧賽圖自主開發(fā)的一系列細胞因子/細胞因子受體人源化小鼠。以這些人源化小鼠為基礎(chǔ)建立的多種自身免疫疾病模型（銀屑病、AD、哮喘等），助力人源細胞因子抗體藥物藥效學評價，加速自身免疫疾病藥物的研發(fā)。

 

基于 B-hIL17A 小鼠的銀屑病模型

 

IMQ乳膏（QD×8）涂抹在B-hIL17A小鼠背部，構(gòu)建銀屑病模型。

銀屑病模型臨床評分檢測

 

IMQ誘導的B-hIL17A小鼠銀屑病樣皮膚炎癥。(A) IMQ處理7天后小鼠背部皮膚的表型。(B-D)根據(jù)0-4評分表每日對背部紅斑和鱗屑評分，記錄累積評分（紅斑加鱗屑）。結(jié)果表明 IMQ誘導可見皮膚炎癥的結(jié)構(gòu)特征，嚴重程度增加至第 6 天后降低。用對照乳膏處理的小鼠未顯示任何炎癥體征。

銀屑病模型的H&E染色及皮膚厚度檢測

IMQ 誘導 B-hIL17A 小鼠角質(zhì)形成細胞增殖和炎性細胞浸潤。終點時采集背部皮膚，并用蘇木精和伊紅 (H&E) 染色。(A) 背部皮膚 H&E 染色。(B) 與對照乳膏處理的小鼠相比，IMQ 乳膏處理的小鼠表皮厚度顯著增加。(C) 組織學變化評分范圍為 0-11 分。結(jié)果表明 IMQ 乳膏可誘導 B-hIL17A 小鼠出現(xiàn)銀屑病樣皮損。該模型可用于評價治療銀屑病藥物的療效。
 

基于 B-hIL17A/hTNFA 小鼠的銀屑病模型

IMQ乳膏（QD×8）涂抹在B-hIL17A/hTNFA小鼠背部，構(gòu)建銀屑病模型。

銀屑病模型臨床評分檢測

IMQ 誘導的 B-hTNFA/hIL17A 小鼠銀屑病樣皮膚炎癥表型。(A) IMQ處理6 天后小鼠背部皮膚的表型。(B) 小鼠體重。(C-E)根據(jù)0-4評分表每日對背部紅斑和鱗屑評分，記錄了累積評分（紅斑加鱗屑）。結(jié)果表明 IMQ 誘導可見皮膚炎癥的結(jié)構(gòu)特征，嚴重程度增加至第6天后降低。對照乳膏處理的小鼠未顯示任何炎癥體征。
 

銀屑病模型的H&E染色及皮膚厚度檢測

 

IMQ 誘導 B-hTNFA/hIL17A 小鼠角質(zhì)形成細胞增殖和炎性細胞浸潤。終點時采集背部皮膚，并用蘇木精和伊紅 (H&E) 染色。(A) 背部皮膚 H&E 染色。(B) 與對照乳膏處理的小鼠相比，IMQ 乳膏處理的小鼠表皮厚度顯著增加。(C) 組織學變化評分范圍為 0-11 分。結(jié)果表明，IMQ 乳膏可誘導 B-hTNFA/hIL17A 小鼠出現(xiàn)銀屑病樣皮損。該模型可用于評價治療銀屑病藥物的療效。

 

基于 B-hIL4/hIL4RA 小鼠的AD模型

第0天，OXZ作用于小鼠背側(cè)和耳側(cè)皮膚，第7-26天，對同一部位皮膚進行10次刺激�？谷薎L4RA抗體(in house)于第6-23天進行腹腔注射，每周2次。(n=5)

抗人IL4RA抗體的體內(nèi)療效

 

抗人 IL4RA 抗體在 B-hIL4/hIL4RA 小鼠中的有效性評價。各組小鼠接受不同劑量 dupilumab （in house）給藥。劑量見圖例。(A) 給藥期間的體重變化。(B) 各組耳厚度統(tǒng)計分析。耳表皮從第 18 天開始脫屑。因此從第 18 天開始，耳厚度降低，如圖所示。(C) 血清中總 IgE 水平。第 26 天 ELISA 法檢測總 IgE 水平。耳厚度和血清總 IgE 濃度與抗體劑量呈負相關(guān) (n=5)。

 B-hIL4/IL4RA小鼠特應(yīng)性皮炎模型的背部皮膚H&E染色

 

 

抗人 IL4RA 抗體對 AD 小鼠模型背部皮膚炎癥細胞浸潤的影響。(A) 蘇木精和伊紅 (H&E) 染色。(B) 耳部表皮皮膚嗜酸性粒細胞浸潤評分 (n=5)。背部皮膚嗜酸性粒細胞浸潤評分與抗體劑量呈負相關(guān)。嗜酸性粒細胞浸潤評分：1=輕度；2=輕度；3=中度；4=重度。AD：特應(yīng)性皮炎；ND：未檢出。

 B-hIL4/IL4RA小鼠特應(yīng)性皮炎模型耳朵皮膚H&E染色

 

抗人 IL4RA 抗體對 AD 小鼠模型耳部皮膚淋巴細胞浸潤的影響。(A) 蘇木精和伊紅 (H&E) 染色。(B) 耳部表皮皮膚嗜酸性粒細胞浸潤評分 (n=5)。耳部皮膚中嗜酸性粒細胞的浸潤評分與抗體劑量呈負相關(guān)，證明 B-hIL4/hIL4RA 小鼠為抗人 IL4RA 抗體體內(nèi)藥效評價提供了有力的臨床前模型。嗜酸性粒細胞浸潤評分：1=輕度；2=輕度；3=中度；4=重度。AD：特應(yīng)性皮炎；ND：未檢出。

 

基于 B-hIL6/hIL6RA 小鼠的CIA模型

11-12周齡的小鼠在第0天和第21天分別接受了市售的CII和CFA以誘導關(guān)節(jié)炎
 

抗人IL6抗體體內(nèi)藥效評價

 

抗人IL6抗體在膠原誘導性關(guān)節(jié)炎 (CIA) B-hIL6/hIL6R小鼠模型中的有效性評價。各組小鼠給予olokizumab 或 sirukumab（in house）。每周兩次給藥期間評價體重 (A) 和總臨床評分 (B)。體重無明顯變化，除 PBS 組外第 21-28 天，各組臨床總評分增加。表明關(guān)節(jié)炎小鼠模型構(gòu)建成功�？谷薶IL6 抗體治療的兩組臨床總評分下降。結(jié)果表明，B-hIL6/hIL6R小鼠為實驗條件下抗人 IL6 抗體的體內(nèi)藥效評價提供了有力的臨床前模型。

 B-hIL6/IL6R小鼠CIA模型踝關(guān)節(jié)H&E染色

 

通過組織學分析檢測抗人 IL6 抗體的影響。(A) 蘇木精和伊紅 (H&E) 染色。(B) 組織學評分 (n=5)。實驗終點時，對四肢關(guān)節(jié)進行組織病理學檢查。G1 在關(guān)節(jié)鏡下無明顯變化。G2-G4 顯示四肢關(guān)節(jié)全部或部分出現(xiàn)炎性細胞浸潤、滑膜炎和（或）血管翳形成、關(guān)節(jié)軟骨及骨組織破壞等關(guān)節(jié)炎病變，提示造模成功。G4 評分下降表明 sirukumab（in house）可以緩解炎癥。但 olokizumab （in house）給藥組的組織學評分無明顯降低�？赡苄枰獌�(yōu)化藥物劑量。結(jié)果表明，B-hIL6/hIL6R 小鼠可作為體內(nèi)評價抗人 IL6 抗體的臨床前小鼠模型。

ND：未檢測到；(a) 骨結(jié)構(gòu)損傷；(b) 軟骨損傷；(c) 滑膜增生；(d) 軟骨中炎性細胞浸潤；(e) 骨溶解和淺表軟骨侵蝕。

 

百奧賽圖細胞因子及受體人源化小鼠列表

Note：

★ The in vivo efficacy was validated by using the reference antibodies (in Clinical Trail Stage).

√  The in vivo efficacy was validated by using partners antibodies (in Preclinical Stage).

〇  Phenotypic analysis data available