動態(tài)濁度法定量檢測乳糖一水合物中細菌內(nèi)毒素的含量
動態(tài)濁度法定量檢測乳糖一水合物中細菌內(nèi)毒素的含量
劉晉 1，王芳芳 2，馮宇 3*，楊喆 3，秦煥甲 3，殷鑫 3
(1. 聊城市食品藥品檢驗檢測中心，聊城 252000；2. 聊城市食品藥品檢驗檢測中心，聊城 252000；
3. 科德角國際生物醫(yī)學(xué)科技（北京）有限公司，北京 100068）
摘要 目的：應(yīng)用美洲鱟試劑（Limulus Amebocyte Lysate，LAL）的動態(tài)濁度法，定量檢測乳糖一水合物中細菌內(nèi)毒素。方法：依據(jù) 2015 年版《中華人民共和國藥典》<1143 細菌內(nèi)毒素檢查法 > 的要求，應(yīng)用Pyros Kinetix® Flex（PKF）細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)，使用葡聚糖抑制緩沖液稀釋溶解LAL，建立細菌內(nèi)毒素的標準曲線并確定稀釋倍數(shù)，通過測定供試品溶液中外加內(nèi)毒素的回收率進行干擾試驗，并定量測定樣品中的細菌內(nèi)毒素含量。Pyros® EQS 軟件自動繪制并出具標準曲線，計算溶液中內(nèi)毒素的絕對含量。
結(jié)果：內(nèi)毒素檢測標準曲線濃度線性范圍為 0.001~0.032 EU·mL-1（r=-0.9854），標準曲線回歸方程為 logT=-0.200logC+2.943；供試品在稀釋 100、300、500 倍時均對試驗無干擾作用，細菌內(nèi)毒素回收率在50%~200%之間；4 批樣品的內(nèi)毒素定量測定結(jié)果符合規(guī)定。
結(jié)論：在PyrosKinetix®Flex（PKF）細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)平臺，使用 LAL 建立的動態(tài)濁度法，可用于乳糖一水合物的細菌內(nèi)毒素定量檢測。LAL 有更高的靈敏度，葡聚糖抑制緩沖液可有效阻止由(1 → 3)-β-D- 葡聚糖引起的干擾，提高試驗的成功率，符合數(shù)據(jù)完整性的要求。
結(jié)果：內(nèi)毒素檢測標準曲線濃度線性范圍為 0.001~0.032 EU·mL-1（r=-0.9854），標準曲線回歸方程為 logT=-0.200logC+2.943；供試品在稀釋 100、300、500 倍時均對試驗無干擾作用，細菌內(nèi)毒素回收率在50%~200%之間；4 批樣品的內(nèi)毒素定量測定結(jié)果符合規(guī)定。
結(jié)論：在PyrosKinetix®Flex（PKF）細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)平臺，使用 LAL 建立的動態(tài)濁度法，可用于乳糖一水合物的細菌內(nèi)毒素定量檢測。LAL 有更高的靈敏度，葡聚糖抑制緩沖液可有效阻止由(1 → 3)-β-D- 葡聚糖引起的干擾，提高試驗的成功率，符合數(shù)據(jù)完整性的要求。
關(guān)鍵詞：葡聚糖抑制緩沖液；乳糖一水合物；動態(tài)濁度法；細菌內(nèi)毒素；干擾試驗；美洲鱟試劑；最大有效稀釋倍數(shù)；最高靈敏度
Content determination of bacterial endotoxin in lactose
monohydrate by kinetic turbidimetric method
LIU Jin1，WAHG Fang-fang2，F(xiàn)ENG Yu2，YANG Zhe3，QIN Huan-jia3，YIN Xin3
(1. Liaocheng Food and Drug Testing and Testing Center，Liaocheng 252000，China;2.Liaocheng Food and Drug Testing and Testing Center，Liaocheng 252000，China；3.Coastal-Times International BioMedical Technologies（Beijing）Co.，Ltd.，Beijing 100068，China）
Abstract Objective：To develope a kinetic turbidimetric method with Limulus Amebocyte Lysate（LAL) to quantify bacterial endotoxin in lactose monohydrate. Methods：According to the requirements in Chapter 1143 Bacterial Endotoxin Test in Chinese Pharmacopoeia 2015 edition，by using Pyros Kinetix® Flex（PKF）bacterial endotoxin quantitative detection system and LAL dissolved in glucan inhibitory buffer，a standard curve for bacterial endotoxin was established and the dilution factor was determined.The interference test was performed by measuring recovery rate of endotoxin added in the test solution，and bacterial endotoxin in the sample was quantitatively determined.Pyros® EQS software automatically produced a calibration curve to calculate the absolute content of endotoxin in each solution. Results：Concentration linear ranges of endotoxin detection calibration curve was
0.001-0.032 EU·mL-1（r=-0.985 4）with recovery rate of 50%-200%，and no interference was observed for test samples diluted 100-500 times.Results of quantitative determination of endotoxin in four batches of samples met the requirements.Conclusion：On the platform of PKF bacterial endotoxin quantitative detection system，the kinetic turbidimetric endotoxin method using LAL can be used for bacterial endotoxin detection of lactose monohydrate.
0.001-0.032 EU·mL-1（r=-0.985 4）with recovery rate of 50%-200%，and no interference was observed for test samples diluted 100-500 times.Results of quantitative determination of endotoxin in four batches of samples met the requirements.Conclusion：On the platform of PKF bacterial endotoxin quantitative detection system，the kinetic turbidimetric endotoxin method using LAL can be used for bacterial endotoxin detection of lactose monohydrate.
Glucan inhibitory buffer effectively prevented the interference caused by（1 → 3）-β-D-glucan，improved the test success rate，sensitivity and accuracy of detection.the experiment met data integrity requirements.
Keywords：glucashield beta glucan inhibiting buffer；lactose monohydrate；kinetic turbidimetric method；bacterial
endotoxin；interference test；Limulus Amebocyte Lysate（LAL）；maximum valid dilution；highest sensitivity
注射用福沙匹坦二甲葡胺是用于抑制腫瘤化療所致嘔吐反應(yīng)的藥物，以靜脈注射的方式給藥。由于鉑類、阿霉素等多種抗腫瘤藥物在使用過程中會產(chǎn)生嚴重的嘔吐反應(yīng)，而急性劇烈的惡心、嘔吐可能導(dǎo)致患者脫水、電解質(zhì)紊亂、營養(yǎng)不良，嚴重者可能因消化道黏膜損傷而出血、感染甚至死亡，嚴重影響化療效果，因而止吐藥是抗腫瘤治療重要的輔助治療藥物。福沙匹坦二甲葡胺注射劑與其他止吐藥聯(lián)用，可用于防治中等催吐及大劑量催吐的腫瘤化療（包括大劑量順鉑）初始和反復(fù)用藥引起的急性和遲后的惡心和嘔吐［3］。
乳糖一水合物是一種白色或類白色的晶體狀粉末，緩慢溶于水，幾乎不溶于乙醇（96%），是注射用福沙匹坦二甲葡胺注射液的一類重要輔料。對乳糖一水合物進行細菌內(nèi)毒素檢測，是對藥物生產(chǎn)源頭的質(zhì)量把關(guān)與控制，可使藥物的質(zhì)量更有保證，故在福沙匹坦二甲葡胺注射劑生產(chǎn)的質(zhì)量控制中具有重要意義［2］。目前國內(nèi)多采用凝膠法對乳糖一水合物進行細菌內(nèi)毒素檢測，質(zhì)量標準規(guī)定其限值應(yīng)小于0.005 EU·mg-1。本研究參照 2015 年版《中華人民共和國藥典》<1143 細菌內(nèi)毒素檢查法 >［1］中的動態(tài)濁度法，對乳糖一水合物中的細菌內(nèi)毒素定量檢測方法進行開發(fā)，試圖找到一種干擾影響小、靈敏度高、更為準確的定量檢測方法。
乳糖一水合物是一種白色或類白色的晶體狀粉末，緩慢溶于水，幾乎不溶于乙醇（96%），是注射用福沙匹坦二甲葡胺注射液的一類重要輔料。對乳糖一水合物進行細菌內(nèi)毒素檢測，是對藥物生產(chǎn)源頭的質(zhì)量把關(guān)與控制，可使藥物的質(zhì)量更有保證，故在福沙匹坦二甲葡胺注射劑生產(chǎn)的質(zhì)量控制中具有重要意義［2］。目前國內(nèi)多采用凝膠法對乳糖一水合物進行細菌內(nèi)毒素檢測，質(zhì)量標準規(guī)定其限值應(yīng)小于0.005 EU·mg-1。本研究參照 2015 年版《中華人民共和國藥典》<1143 細菌內(nèi)毒素檢查法 >［1］中的動態(tài)濁度法，對乳糖一水合物中的細菌內(nèi)毒素定量檢測方法進行開發(fā)，試圖找到一種干擾影響小、靈敏度高、更為準確的定量檢測方法。
1 儀器與試藥
Pyros Kinetix® Flex 96（PKF 96）細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)（Associates of Cape Cod 公司)。Pyros® EQS 軟件（搭配 PFK 細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)的專用軟件，Associates of Cape Cod.Inc.）
乳糖 一 水 合 物（DMV Fonterra Excipients GmbH &Co.KG 公 司，Lactohale® 200 Milled lactose monohydrate，批號：Lactose-1031D73、Lactose-1031D74、Lactose-1031D75、Lactose-1031D76）。
動 態(tài) 濁 度 法 美 洲 鱟 試 劑（LAL，批 號 518-11-903-T，靈敏度λ=0.001 EU·mL-1，規(guī)格 5 mL·瓶 -1）；細菌內(nèi)毒素工作標準品（control standard endotoxin，CSE；批號 162）；無熱原水（LAL reagent water，LRW批 號 AD17657282，規(guī) 格 50 mL· 瓶 -1）；葡 聚 糖 抑制緩沖液（批號 1207063）；硼硅酸鹽玻璃反應(yīng)試管（8 mm×75 mm）；硼硅酸鹽玻璃稀釋試管（12 mm×
動 態(tài) 濁 度 法 美 洲 鱟 試 劑（LAL，批 號 518-11-903-T，靈敏度λ=0.001 EU·mL-1，規(guī)格 5 mL·瓶 -1）；細菌內(nèi)毒素工作標準品（control standard endotoxin，CSE；批號 162）；無熱原水（LAL reagent water，LRW批 號 AD17657282，規(guī) 格 50 mL· 瓶 -1）；葡 聚 糖 抑制緩沖液（批號 1207063）；硼硅酸鹽玻璃反應(yīng)試管（8 mm×75 mm）；硼硅酸鹽玻璃稀釋試管（12 mm×
75 mm）。以上所有試劑與耗材均來自 Associates of Cape Cod 公司。
2 方法與結(jié)果
2.1 細菌內(nèi)毒素標準曲線的建立和可靠性分析
用葡聚糖抑制緩沖液復(fù)溶 LAL，用無熱原水稀釋 CSE，使 其 最 終 濃 度 分 別 為 0.032、0.016、0.008、0.004、0.002、0.001 EU·mL-1。各取0.1 mL，分 別 加到預(yù)先加有 0.1 mL 鱟試劑的反應(yīng)試管內(nèi)，混合均勻，將反應(yīng)試管插入設(shè)置好的 PKF 細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)中，每一濃度重復(fù) 3 管，同時做 2 管陰性對照。當陰性對照的吸收度或透光率小于標準曲線最低點的檢測值，反應(yīng)時間大于標準曲線最低點的反應(yīng)時間時，將全部數(shù)據(jù)進行線性回歸分析。Pyros® EQS 軟件自動出具標準曲線回歸報告，以到達反應(yīng)終點所需時間的對數(shù)值對細菌內(nèi)毒素濃度的對數(shù)值繪制標準曲線：logT=-0.200logC+2.943 r=0.985 4
標準曲線中 CSE 的最低濃度為 0.001 EU·mL-1，此濃度點的反應(yīng)時間小于陰性對照的反應(yīng)時間［1］，故標準曲線成立。細菌內(nèi)毒素標準曲線及可靠性分析結(jié)果見表 1。
1細菌內(nèi)毒素標準曲線及可靠性分析
2.2 最大有效稀釋倍數(shù)（MVD）的確定
標準曲線中 CSE 的最低濃度為 0.001 EU·mL-1，此濃度點的反應(yīng)時間小于陰性對照的反應(yīng)時間［1］，故標準曲線成立。細菌內(nèi)毒素標準曲線及可靠性分析結(jié)果見表 1。
1細菌內(nèi)毒素標準曲線及可靠性分析
Tab. 1 Standard curves of bacterial endotoxinand reliability analysis
| 標準曲線中細菌內(nèi)毒素濃度（standard curves concentration）/（EU·mL-1） |
CV/% | |||
| 配置值（preparation value） | 實測值（measured value） | |||
| 0.032 | 0.02740 | 2.537 | ||
| 0.016 | 0.01603 | 2.666 | ||
| 0.008 | 0.008968 | 1.259 | ||
| 0.004 | 0.005138 | 7.383 | ||
| 0.002 | 0.002325 | 15.951 | ||
| 0.001 | 0.00073 | 27.251 | ||
2.2 最大有效稀釋倍數(shù)（MVD）的確定
取乳糖一水合物樣品粉末 0.5 g，用 5 mL 無熱原水溶解并稀釋，制得終濃度（C）為 100 mg·mL-1 的
溶液。，按細菌內(nèi)毒素限值（L）0.005 EU·mg-1，標準曲線最低濃度（λ）0.001 EU·mL-1，計算乳糖一水合物樣品的 MVD：MVD=100 mg·mL-1×0.005 EU·mg -1/0.000 1EU·mL-1=500 倍
2.3 干擾試驗
根據(jù)標準曲線內(nèi)毒素濃度的設(shè)置，選擇標準曲線中點 0.004 EU·mL-1 作為加標內(nèi)毒素濃度（λm）。取
批號 Lactose-1031D73、Lactose-1031D74、Lactose-1031D75、Lactose-1031D76 的乳糖一水合物粉末 0.5 g，分別溶于 5 mL 無熱原水中，靜置，待樣品完全溶解后再分別稀釋至 100、300、500 倍，作為供試品溶液，將0.1 mL 0.004 EU·mL-1（λm）濃度的 CSE 溶液分別加入到 0.9 mL 100、300、500 倍的供試品溶液中，制備供試品陽性對照溶液。分別取陰性對照、供試品溶液、供試品陽性對照溶液各 0.1 mL，加到預(yù)先加有 0.1mL LAL 的反應(yīng)管內(nèi)，混合均勻，將反應(yīng)試管插入設(shè)置好的 PKF 細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)中進行測定，各反應(yīng)均做 2 個平行復(fù)孔。測定結(jié)束后，Pyros® EQS 軟件自動出具試驗數(shù)據(jù)及報告，結(jié)果見表 2。
2干擾試驗及供試品細菌內(nèi)毒素含量測定結(jié)果
Tab. 2 Interference test and content determination of bacterial endotoxin in samples
| 批號 （lot No.） |
稀釋倍數(shù) （dilution factor） |
細菌內(nèi)毒素濃度（concentration）/（EU·mL-1） | 回收率 （recovery）/% |
限值 （limit） |
||
| 加標值 （spiked） |
平均值 （mean） |
陽性對照 （positive control） |
||||
| Lactose-1031D73 | 1∶100 | 0.004 | <0.001 | 0.002 671 | 94.0 | 0.5 |
| 1∶300 | 0.004 | <0.001 | 0.003 344 | 104.0 | 0.5 | |
| 1∶500 | 0.004 | <0.001 | 0.002 787 | 102.0 | 0.5 | |
| Lactose-1031D74 | 1∶100 | 0.004 | <0.001 | 0.003 422 | 89.0 | 0.5 |
| 1∶300 | 0.004 | <0.001 | 0.002 727 | 93.0 | 0.5 | |
| 1∶500 | 0.004 | <0.001 | 0.003 052 | 91 | 0.5 | |
| Lactose-1031D75 | 1∶100 | 0.004 | <0.001 | 0.003 241 | 107.0 | 0.5 |
| 1∶300 | 0.004 | <0.001 | 0.004 064 | 99.0 | 0.5 | |
| 1∶500 | 0.004 | <0.001 | 0.004 683 | 101.0 | 0.5 | |
| Lactose-1031D76 | 1∶100 | 0.004 | <0.001 | 0.002 413 | 116.0 | 0.5 |
| 1∶300 | 0.004 | <0.001 | 0.004 273 | 105.0 | 0.5 | |
| 1∶500 | 0.004 | <0.001 | 0.003 484 | 110.0 | 0.5 | |
根據(jù)標準曲線計算不同稀釋倍數(shù)下供試品溶液中細菌內(nèi)毒素的含量及回收率，Pyros® EQS 軟件的數(shù)
據(jù)與報告系統(tǒng)中會自動出具報告和細菌內(nèi)毒素檢測結(jié)果。干擾試驗中各批次的供試品，經(jīng) 100、300、500倍稀釋后，其回收率在 50%~200% 范圍內(nèi)，符合要求［1］，可以認為供試品溶液中成分不存在干擾作用。
2.4 供試品定量檢查
2.4 供試品定量檢查
供試品檢查同“2.3”項下方法，實驗結(jié)果參見表2，結(jié)果 4 批樣品細菌內(nèi)毒素含量均符合規(guī)定。
3 討論
3.1 方法開發(fā)的意義
本試驗用動態(tài)濁度法檢測福沙匹坦二甲葡胺注射液的輔料——乳糖一水合物中的細菌內(nèi)毒素含量。動態(tài)濁度法是常用的細菌內(nèi)毒素定量檢測方法，通過檢測反應(yīng)混合物的濁度到達某一預(yù)先設(shè)定的吸收度所需要的反應(yīng)時間，或是檢測濁度增加速度來定量測定樣品中內(nèi)毒素的含量。該方法操作簡單、快速、靈敏度高、檢測范圍寬。動態(tài)濁度法的干擾試驗中，以樣品中外加內(nèi)毒素的回收率進行判斷，若回收率在50%~200% 之間，可認為樣品溶液對試驗無干擾［5-9］。該方案相對于傳統(tǒng)的凝膠法，具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡便、節(jié)約時間等優(yōu)點［6，12］，能夠更好地滿足藥品質(zhì)量控制的要求。該試驗的另外一個重要意義，是選擇對輔料進行檢測。對輔料乳糖一水合物進行細菌內(nèi)毒素定量檢測是對福沙匹坦二甲葡胺注射液藥品的源頭進行精準的質(zhì)量把控，是更高級別的質(zhì)量控制要求［2］。
3.2 葡聚糖抑制緩沖液可以解決葡聚糖干擾問題
本試驗使用葡聚糖抑制緩沖液來復(fù)溶 LAL，該緩沖液在內(nèi)毒素試驗中可以阻斷（1 → 3）-β-D-葡聚糖的干擾。當供試品溶液中同時存在細菌內(nèi)毒素與（1 → 3）-β-D- 葡 聚 糖 時，會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)，另外，和不存在（1 → 3）-β-D- 葡聚糖相比，凝膠反應(yīng)會更迅速、更劇烈［13］。假陽性反應(yīng)與
（1 → 3）-β-D- 葡聚糖的存在有關(guān)，原因是 LAL 中葡聚糖敏感因子（G 因子）被激活，使得供試品中細菌內(nèi)毒素含量雖然并未超過規(guī)定限值，但檢查呈現(xiàn)陽性，被誤判為不合格［6，13］。如不確定某樣品是否受到（1 → 3）-β-D- 葡聚糖干擾，在針對同一樣品的測試中，將非葡聚糖抑制緩沖液復(fù)溶的 LAL 檢測的細菌內(nèi)毒素水平與葡聚糖抑制緩沖液復(fù)溶 LAL 檢測的細菌內(nèi)毒素水平進行比較，如果使用葡聚糖抑制緩沖液復(fù)溶的報告中細菌內(nèi)毒素含量明顯較低，則說明樣品可能有（1 → 3）-β-D- 葡聚糖干擾。葡聚糖抑制緩沖液可有效阻止由高達 100 ng·mL-1 的葡聚糖濃度引起的干擾，使鱟試劑對于供試品的抗干擾能力大大增強。
3.3 高靈敏度鱟試劑可拓寬最大有效稀釋倍數(shù)
3.4 符合法規(guī)與數(shù)據(jù)完整性要求
參考文獻
3.3 高靈敏度鱟試劑可拓寬最大有效稀釋倍數(shù)
用 凝 膠 法 測 試 該 樣 品 時，采 用 靈 敏 度 為 0.03EU·mL-1 的凝膠法鱟試劑進行試驗，乳糖一水合物樣 品 的 最 大 有 效 稀 釋 倍 數(shù)：MVD=CL/λ=100 mg·mL-1×0.005 EU·mg-1/0.03 EU·mL-1=16 倍，供試品對試驗干擾明顯，由于試劑靈敏度的限制，樣品無法稀釋更大的倍數(shù)來消除干擾。LAL 的最高靈敏度能達到 0.001 EU·mL-1，使得供試品的最大有效稀釋倍數(shù)擴增至 500 倍，動態(tài)濁度法的干擾試驗，以樣品中外加內(nèi)毒素的回收率進行判斷，在稀釋倍數(shù) 為 100、300 和 500 倍 時 均 有 極 佳 的 回 收率，回收率 在 50%~200% 之 間，可認為樣品溶液對試驗無干擾。LAL的高靈敏度，可以增大樣品的 最大有效稀釋倍數(shù)，降低樣品對內(nèi)毒素反應(yīng)帶來的干擾［5，13］。
3.4 符合法規(guī)與數(shù)據(jù)完整性要求
PKF 細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)與 Pyros® EQS 軟件嚴格遵循聯(lián)邦法典 21 CFR Part 11 標準，同時符合
《中國人民共和國藥典》、USP、JP、EP 等多國法規(guī)的規(guī)定與要求，軟件具備三級管理權(quán)限、審計追蹤及電子簽名功能，滿足試驗的數(shù)據(jù)完整性要求。本文采用動態(tài)濁度法對福沙匹坦二甲葡胺注射液中的輔料乳糖一水合物進行細菌內(nèi)毒素定量檢測，試驗結(jié)果表明，樣品進行 100 倍、300 倍、500 倍稀釋時均對試驗無干擾，多批樣品檢查結(jié)果符合規(guī)定。因此，在 PKF 細菌內(nèi)毒素定量檢測系統(tǒng)上開發(fā)動態(tài)濁度法來定量檢測福沙匹坦二甲葡胺注射液的輔料乳糖一水合物中細菌內(nèi)毒素含量的方法是可行的。
參考文獻
[1] 中華人民共和國藥典 2015 年版 . 四部［S］.2015：154ChP 2015.Vol Ⅳ［S］．2015：154
[2] 李薇，劉肅，何華紅，等 . 三磷酸腺苷二鈉原料藥的細菌內(nèi)毒素檢查法可行性研究［J］. 中國藥房，2010，21（17）：1592 LI W，LIU S，HE HH，et al．Study on the practicability of bacterial
endotoxins test for adenosine disodium triphosphate raw material［J］．China Pharm，2010，21（17）：1592
[3] 章亞兵，許雷鳴 . 注射用福沙匹坦二甲葡胺中細菌內(nèi)毒素檢查法的建立［J］. 安徽醫(yī)藥，2013，17（8）：1298 ZHANG YB，XU LM．Determination of bacterial endotoxin of fosaprepitant dimeglumine for injection［J］．Anhui Med Pharm J，2013，17（8）：1298
[4] 張廣琴，沈劍，黃幸芳，等 . 動態(tài)濁度法定量檢測復(fù)方氯化鈉注射液中細菌內(nèi)毒素［J］. 中國藥業(yè)，2006，15（16）：25 ZHANG GQ，SHEN J，HUANG XF，et al．Quantitative detection
of bacterial endotoxin in compound sodium chloride injection by dynamic turbidity method［J］．China Pharm，2006，15（16）：25
[5] 祝清芬，魏霞 . 動態(tài)濁度法測定多西他賽注射液中細菌內(nèi)毒素的含量［J］. 中國藥房，2011，22（1）：54 ZHU QF，WEI X．Content determination of bacterial endotoxin in docetaxel injection by kinetic turbidimetric method［J］．China Pharm，2011，22（1）：54
[6] 肖鯤，李建華，吳文靜，等 . 動態(tài)濁度法檢測細菌內(nèi)毒素試驗假陽性結(jié)果原因分析［J］. 中國輸血雜志，2012，25（3）：274 XIAO K，LI JH，WU WJ，et al．Analysis of the causes of false
positive results of bacterial endotoxin test by dynamic turbidimetry［J］．Chin J Blood Transfus，2012，25（3）：274
[7] 肖貴南 . 順鉑注射液細菌內(nèi)毒素的動態(tài)濁度法定量研究［J］. 中國藥理學(xué)通報，2003，19（4）：435 XIAO GN．Quantitative study of bacterial endotoxin in cisplatin injection by dynamic turbidimetry［J］．Chin Pharmacol Bull，2003，19（4）：435
[8] 苑慶華，芮菁，華曉東，等 . 動態(tài)濁度法定量檢測替硝唑注射液中內(nèi)毒素研究［J］. 中國藥學(xué)雜志，2003，38（12）：952 YUAN QH，RUI J，HUA XD，et al．Measurement of endotoxin in
tinidazole injection using the kinetic-turbidimetric technique［J］．Chin Pharm J，2003，38（12）：952
[9] 李榮，吳玲 . 動態(tài)濁度法檢測乳酸左氧氟沙星氯化鈉注射液中的細菌內(nèi)毒素［J］. 中國藥房，2012，23（9）：837 LI R，WU L．Determination of bacterial endotoxin for levofloxacin lactate/sodium chloride injection by kinetic turbidimetric limulus test［J］．China Pharm，2012，23（9）：837
[10] 張秀萍，趙海山，苑慶華，等 . 動態(tài)濁度法定量檢測血塞通注射液中細菌內(nèi)毒素［J］. 藥物分析雜志，2000，20（4）：272 ZHANG XP，ZHAO HS，YUAN QH，et al．Quantitative detection
of bacterial endotoxin in Xuesaitong injection by dynamic turbidity
method［J］．Chin J Pharm Anal，2000，20（4）：272
[11] 祝清芬，國明，魏霞，等 . 米力農(nóng)注射液動態(tài)濁度法細菌內(nèi)毒素檢查方法研究［J］. 中國新藥雜志，2013，22（3）：355 ZHU QF，GUO M，WEI X，et al．Detection of bacterial endotoxin
in milrinone injection by the method of kinetic turbidimetric limulus test［J］．Chin J New Drugs，2013，22（3）：355
[12] 李樹馀 . 注射用順苯磺酸阿曲庫銨細菌內(nèi)毒素檢測動態(tài)濁度法的研究［J］. 藥物分析雜志，2014，34（2）：340 LI SY．Study on bacterial endotoxin test of cisatracurium besilate
for injection using the dynamic turbidity method［J］．Chin J Pharm Anal，2014，34（2）：340
[13] 何進，高軍，陳金旺 . 凝膠法細菌內(nèi)毒素檢查的干擾因素及消除［J］. 中國藥師，2010，13（2）：284 HE J，GAO J，CHEN JW．Interference factors and elimination of bacterial endotoxin test by gel method［J］．China Pharm，2010，13（2）：284
Copyright(C) 1998-2024 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com