Octet在多肽類藥物開發(fā)中的應(yīng)用

Octet 
 
當(dāng)前，小分子藥物研發(fā)日趨困難，新興的抗體等大分子藥物越來越同質(zhì)化，介于小分子與大分子之間的“多肽”類藥物，可以說是很好的補(bǔ)充。多肽類藥物一般由幾個(gè)到幾十個(gè)氨基酸組成，分子量在500-10,000 Da之間。與化合物類的藥物相比，其特異性與生物活性更好；而與大分子藥物相比，其穩(wěn)定性和通透性更好，免疫原性更低。
 
截至2020年1月，全球共有76個(gè)多肽類藥物被批準(zhǔn)上市。全球多肽藥物市場(chǎng)已超過200億美元，占據(jù)約3%的全球醫(yī)藥市場(chǎng)份額，且保持高速增長(zhǎng)速度。其中不乏10億美元以上的大品種，比如糖尿病的首選藥物利拉魯肽，以及耳熟能詳?shù)囊葝u素等【1】。多肽類藥物已經(jīng)廣泛應(yīng)用于內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、肌肉骨骼系統(tǒng)等多個(gè)治療領(lǐng)域。
   
多肽類藥物生物活性檢測(cè)
多肽類藥物的結(jié)構(gòu)是其生物活性的基礎(chǔ)。如果結(jié)構(gòu)上存在差異，則可能導(dǎo)致活性降低甚至沒有活性。多肽類藥物與大分子蛋白類藥物一樣，具有二級(jí)和三級(jí)高級(jí)結(jié)構(gòu)。然而高級(jí)結(jié)構(gòu)是否正確可能存在不確定性，所以生物活性的檢測(cè)可以間接證明多肽高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確性，因此越來越多的多肽類藥物需要增加生物活性的研究和檢測(cè)。近期發(fā)表在《中國(guó)新藥雜志》的由國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心（CDE）撰寫的名為《多肽類仿制藥研發(fā)和一致性評(píng)價(jià)的考慮》一文中，詳細(xì)描述了多肽類藥物的表征方法【2】。
   
生物活性檢測(cè)有體外（in vitro）及體內(nèi)（in vivo）兩種路徑。in vitro 評(píng)價(jià)方法包括但不限于酶動(dòng)力學(xué)、結(jié)合力測(cè)定; 而生物層干涉技術(shù)（BLI）在這篇文章中被提出是結(jié)合力測(cè)定的方法之一，特別是靶點(diǎn)明確的多肽藥物，比如利拉魯肽（與GLP-1受體）和特立帕肽（與PTH受體）。Octet分子互作儀（原ForteBio）是基于生物層干涉技術(shù)（BLI）的實(shí)時(shí)非標(biāo)記互作檢測(cè)設(shè)備，具有高通量、高靈敏度、使用簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，已成為多肽藥物研發(fā)過程中不可或缺的設(shè)備之一。
   
Octet助力特立帕肽類似藥上市
特立帕肽（Teriparatide）是一種治療骨質(zhì)疏松的激素多肽，Livogiva是Theramex（Teva子公司）公司研發(fā)的特立帕肽的類似藥。在其歐盟藥品管理局的評(píng)估資料中（assessment report）中【4】，生物活性部分的類似性研究（與PTH受體親和力），應(yīng)用BLI技術(shù)測(cè)試的結(jié)果顯示，Livogiva與Teriparatide無明顯差異。
   
CDE發(fā)表的文章中把BLI列為基于受體結(jié)合的生物活性檢測(cè)方法之一，再加上Livogiva申報(bào)資料中應(yīng)用Octet獲得的結(jié)合活性類似性比較數(shù)據(jù)，充分說明Octet的結(jié)合活性數(shù)據(jù)可以有效地表征多肽類藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，推動(dòng)多肽類藥物獲取相關(guān)藥審部門的認(rèn)可。
 
Octet加速藥物的申報(bào)進(jìn)程
Octet憑借其豐富的應(yīng)用功能（可以實(shí)現(xiàn)濃度測(cè)定，表位配對(duì)，親和力測(cè)定，特異性檢測(cè)等），在生物制藥企業(yè)中被廣泛使用。國(guó)內(nèi)外很多在研或者已上市的藥物，特別是抗體藥物，有相當(dāng)比例的藥理學(xué)申報(bào)數(shù)據(jù)中可以看到BLI數(shù)據(jù)的身影。這些數(shù)據(jù)包括但不限于以下幾個(gè)方面：

• 藥物或與靶點(diǎn)親和力表征數(shù)據(jù)
• FcγRs、FcRn、C1q結(jié)合活性
• 分子水平抑制率實(shí)驗(yàn)（阻斷抗體）
• 表位鑒定實(shí)驗(yàn)