奧斯陸案例：過繼性細(xì)胞治療的臨床前開發(fā)

CAR -T細(xì)胞免疫療法
 
在血液系統(tǒng)腫瘤治療中取得了卓越的療效，然而如何將CAR-T細(xì)胞治療應(yīng)用到實(shí)體瘤治療領(lǐng)域仍有待進(jìn)一步開發(fā)。
 
與血液瘤相比，實(shí)體瘤細(xì)胞治療遇到的一個(gè)主要挑戰(zhàn)是腫瘤微環(huán)境，包括：
 

• 某些趨化因子（如CCL2）硝化，抑制T細(xì)胞向腫瘤組織募集，從而被阻隔在腫瘤基質(zhì)中。
• 腫瘤血管系統(tǒng)優(yōu)先招募其他類型的免疫細(xì)胞，而非殺傷腫瘤的T細(xì)胞或NK細(xì)胞。
• 腫瘤低氧環(huán)境或某些細(xì)胞因子（如IFNβ）的產(chǎn)生導(dǎo)致免疫檢查點(diǎn)分子或配體的表達(dá)上調(diào)。
• 腫瘤微環(huán)境中的一些代謝產(chǎn)物異常，影響T細(xì)胞或Treg細(xì)胞功能。
• 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）抑制T細(xì)胞功能。
• 腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAF）通過ECM阻隔T細(xì)胞，使之無法進(jìn)入腫瘤內(nèi)。

    腫瘤微環(huán)境導(dǎo)致的免疫抑制機(jī)制
 (Science. 2015 Apr 3;348(6230):74-80.)

在細(xì)胞治療的臨床前開發(fā)中，利用高通量活細(xì)胞成像技術(shù)，借助于體外3D腫瘤球模型有助于幫助我們?cè)趧?dòng)物模型體內(nèi)評(píng)估前，了解這些基因修飾的免疫細(xì)胞（包括CAR-T、TCR-T或NK細(xì)胞）的體外殺傷能力和安全性等，動(dòng)態(tài)而直觀地監(jiān)測(cè)整個(gè)殺傷過程，這對(duì)很多研究人員非常重要。

   
來自挪威奧斯陸大學(xué)國(guó)家醫(yī)院（Oslo University Hospital）轉(zhuǎn)化研究中心細(xì)胞治療部門的Else Marit Inderberg博士（免疫監(jiān)測(cè)組負(fù)責(zé)人）和Pierre Dillard博士（研究科學(xué)家），在線分享她/他們?nèi)绾卫�用高通量活�?xì)胞成像的方法來進(jìn)行細(xì)胞治療的臨床前開發(fā)，尤其是在實(shí)體瘤領(lǐng)域，以加快細(xì)胞治療的開發(fā)進(jìn)程。
   
奧斯陸大學(xué)國(guó)家醫(yī)院的細(xì)胞治療部門是歐洲最大、最現(xiàn)代化的學(xué)術(shù)性GMP設(shè)施之一，目前正在開展約10項(xiàng)臨床試驗(yàn)。該轉(zhuǎn)化研究中心主要從事CAR-T和TCR-T細(xì)胞治療開發(fā)及其相關(guān)臨床試驗(yàn)的免疫監(jiān)測(cè)，以開發(fā)出高效的實(shí)體瘤細(xì)胞療法，如骨肉瘤和卵巢癌。
   
在此次在線分享中，Pierre Dillard博士將具體介紹如何利用Incucyte實(shí)時(shí)活細(xì)胞分析系統(tǒng)，基于96孔板，對(duì)不同類型的效應(yīng)細(xì)胞殺傷能力進(jìn)行高通量動(dòng)態(tài)檢測(cè)，包括：

• 以3D腫瘤球模型為基礎(chǔ)，評(píng)估TCR-T、TCR-NK和CAR-T細(xì)胞的殺傷能力
• 以更為復(fù)雜的可調(diào)3D cysts結(jié)構(gòu)為靶標(biāo)，評(píng)估CAR-T細(xì)胞的浸潤(rùn)和殺傷作用
• 檢測(cè)抗腫瘤化合物不同劑量組合對(duì)3D腫瘤球的殺傷作用，以獲得最佳的劑量搭配
• 在單細(xì)胞水平上，觀察效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞的動(dòng)態(tài)相互作用，以獲得高分辨率的時(shí)間或空間維度信息

 
-相關(guān)文獻(xiàn)-
·      Dillard P, Kksal H, Maggadottir S M, et al. Targeting Telomerase with an HLA Class II-Restricted TCR for Cancer Immunotherapy[J]. Molecular Therapy, 2020.
·      Dillard P, Lie M, Baken E, et al. Colorectal cysts as a validating tool for CAR therapy [J]. BMC Biotechnology, 2020, 20.
·      Mensali N, Dillard P, Hebeisen M, Lorez S, Theodossiou T, Myhre MR, Fäne A, Gaudernack G, Kvalheim G, Myklebust JH, Inderberg EM, and Wälchli S. NK cells specifically TCR-dressed to kill cancer cells. [J]. Ebiomedicine, 2019.
·      Dillard, P., Köksal, H., Inderberg, E. M., Wälchli, S. A Spheroid Killing Assay by CAR T Cells. J. Vis. Exp. (142), e58785 (2018).