細(xì)胞核、線粒體、細(xì)胞骨架的成像的熒光探針介紹

   

細(xì)胞核 (nucleus) 是真核細(xì)胞內(nèi)最大、最重要的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，作為細(xì)胞遺傳與代謝的調(diào)控中心，是真核細(xì)胞區(qū)別于原核細(xì)胞最顯著的標(biāo)志之一。MCE 提供的細(xì)胞核熒光探針可對(duì)細(xì)胞或組織直接染色，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞核的定位，確定細(xì)胞在組織中的分布，并追蹤細(xì)胞從有絲分裂到凋亡整個(gè)過(guò)程中細(xì)胞核的變化。

 

表 1. 用于細(xì)胞核熒光試劑

 

圖 1. HA-nsp4 載體轉(zhuǎn)染 PK-15^CD163 細(xì)胞^[1]

轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后進(jìn)行細(xì)胞固定，用膽固醇染料 Filipin (藍(lán)色) 確定膽固醇含量。細(xì)胞核用碘化丙啶 (紅色) 復(fù)染。

   

鬼筆環(huán)肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環(huán)狀七肽毒素，以極高的親和力和特異性結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲 F-actins。通常將鬼筆環(huán)肽與熒光染料偶聯(lián)來(lái)研究細(xì)胞中 F-actins 的分布。

熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽極少會(huì)非特異性染色，染色和未染色區(qū)域之間的對(duì)比度非常大，可使 F-actins 高效染色。

 

表 2. MCE 細(xì)胞骨架熒光試劑

 

圖 2. MDA-MB-231 細(xì)胞、CTCF-in 細(xì)胞的細(xì)胞骨架^[2]

共聚焦顯微鏡捕獲細(xì)胞。藍(lán)色通道，細(xì)胞核 Hoechst 染色；紅色通道，F(xiàn)-actins 被 Rhodamine Phalloidin 染色；以上通道的組合；白色循環(huán)和箭頭，擴(kuò)散的細(xì)胞周肌動(dòng)蛋白纖維。
 

 

ΔΨm 即線粒體膜電位 (mitochondrial membrane potential, MMP)，它的變化是反映線粒體活力的重要參數(shù)。線粒體膜電位越高，線粒體產(chǎn)生的能量越多，越能促進(jìn)細(xì)胞能量轉(zhuǎn)換。線粒體膜電位下降是細(xì)胞凋亡早期的標(biāo)志性事件。

 

MCE 線粒體膜電位熒光試劑，可以快速檢測(cè)線粒體膜電位下降，作為細(xì)胞凋亡早期的檢測(cè)指標(biāo)。JC-1 線粒體膜電位試劑盒 (HY-K0601) 同時(shí)提供 CCCP 作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽(yáng)性對(duì)照，可用于細(xì)胞、組織或純化的線粒體等樣本的線粒體膜電位檢測(cè)。

 

表 3. 線粒體膜電位熒光試劑

 

 

細(xì)胞膜主要是由磷脂構(gòu)成的富有彈性的半透性膜，為細(xì)胞結(jié)構(gòu)中分隔細(xì)胞內(nèi)、外不同介質(zhì)和組成成分的界面。Di 系列熒光試劑可側(cè)向擴(kuò)散染色整個(gè)細(xì)胞，是便捷的細(xì)胞輪廓標(biāo)記物，DiO、DiI、DiD 被激發(fā)后分別發(fā)出綠色、橙紅色、紅色熒光。

 

 

 

細(xì)胞質(zhì)是細(xì)胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。在細(xì)胞增殖與活性相關(guān)研究中，細(xì)胞質(zhì)染料可用于分析細(xì)胞活性、監(jiān)測(cè)細(xì)胞的形態(tài)和位置等。

 

 

圖 6. CFSE 染色

PC-3 細(xì)胞用載體或 MTX 處理 20 小時(shí)，收集細(xì)胞并用 CFSE 標(biāo)記。與 CellTracker Deep Red 標(biāo)記的 MoDCs 細(xì)胞共孵育 2 小時(shí)，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞吞噬作用。

 

關(guān)于細(xì)胞染色，小 M 今天就介紹到這里了，小伙伴們有沒(méi)有 Get 到新技能呢？
 

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