實驗室微生物樣品“精確”稀釋的重要性
瀏覽次數(shù):3049 發(fā)布日期:2022-6-10
來源:杭州大微
重量稀釋通常是微生物檢測的第一步,重量稀釋后得到樣品的初級混懸液,混勻均質(zhì)讓樣品中的微生物盡可能均勻分布,然后進行后續(xù)的梯度稀釋、分離培養(yǎng)等步驟?梢哉f重量稀釋是整個檢測環(huán)節(jié)中的基礎(chǔ)。
在國家標準里,重量稀釋的環(huán)節(jié)通常由無菌吸管或微量移液器及吸頭完成,樣品通過稱取一定重量后或量取一定體積后,加入9倍重量或體積的特定稀釋液,經(jīng)過外力作用充分均質(zhì)混勻后,得到懸濁液、溶液或者乳濁液。
《GB 4789.3-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸菌群計數(shù)》
《GB 4789.13-2012 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗》
在重量稀釋過程中,對樣品及稀釋液的定量控制為人工操作完成,以移液器等工具作為輔助。但在操作過程中因液體掛壁、稱重不精準等原因容易產(chǎn)生誤差,這類細微誤差難以在當下被迅速糾正,但其結(jié)果往往會在最終得以展現(xiàn)。
接下來我們就舉個例子說明在重量稀釋過程中「精確」的必要性。
我們首先用天平稱量25 g樣品,然后量取225ml稀釋液,但實際上準確量取225ml比較困難,常見的情況是多量取或少量取1、2ml稀釋液,而在實際操作過程中,這些誤差都會被忽略。
比如我們實際量取了226ml稀釋液,然后照常進行操作,在菌落計數(shù)時得出結(jié)果為200 CFU,因此計算樣品中的菌落總數(shù)為2*107CFU/mL,但實際的結(jié)果應(yīng)該是2.01*107 CFU/mL,此時誤差值為1*105 CFU/mL。
這是只考慮到了量取稀釋液時的誤差情況,但在稱量樣品時也容易產(chǎn)生細微誤差。比如我們實際稱量了24.8g樣品,在量取稀釋液時也出現(xiàn)了誤差,實際量取了226ml,在菌落計數(shù)時得出結(jié)果為200 CFU,計算后得到結(jié)果為為2 *107 CFU/mL,但若是我們將誤差考慮進去,實際結(jié)果應(yīng)是 2.02*107 CFU/mL(226 ml),此時的誤差值為2*105 CFU/mL。
對重量稀釋來說,只有在樣品稱量、稀釋液量取等環(huán)節(jié)都做到準確,才能為后續(xù)的梯度稀釋、分離培養(yǎng)打好基礎(chǔ),確保最終結(jié)果的可信度。從這個角度來說,重量稀釋環(huán)節(jié)是「失之毫厘,謬以千里」的體現(xiàn)。
為了避免傳統(tǒng)人工操作中容易出現(xiàn)的誤差問題,杭州大微推出DW-JURAY系列微生物樣品自動重量稀釋儀。當樣品袋內(nèi)樣品重量不確定時,儀器可根據(jù)稀釋比例自動加入稀釋液,無需人為計算。同時儀器有雙泵進樣模式可選,雙管同時注液,縮短稀釋時間,提高效率。
儀器符合《GB 4789-2016食品安全國家標準食品微生物學》、國際標準 ISO 9001、ISO 6887-1、ISO 7218、COFRAC標準,儀器廣泛用于食品、藥品、化妝品等含微生物樣品的前處理自動稀釋。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
智能計算:無需人工計算,可根據(jù)稀釋比例自動加入稀釋液,提高效率;
靈活運用:儀器僅重6.5kg,支持在實驗室隨時搬運;可通過觸摸面板指令進行編程設(shè)置,定制稀釋程序,簡化儀器操作;
可追溯性:實驗數(shù)據(jù)存于內(nèi)置微處理器,可導(dǎo)出包括日期、時間、樣本重量、稀釋因子、稀釋液編號等在內(nèi)的信息記錄;
無菌保證:稀釋液只經(jīng)過可滅菌分液管路,避免稀釋液污染和樣品污染。具備可拆卸托盤,方便清洗。