文獻解讀：骨髓來源的MSC直接規(guī)模生產策論

文獻：Cell Transplantation
 

MSC介紹

間充質干細胞（也稱間充質基質細胞，Mesenchymal Stem/Stromal cell，MSCs）被廣泛用于命名各種組織來源的貼壁生長的成纖維細胞群，具有多向分化潛能、免疫調控及促進組織再生功能。臨床應用的涉及面較廣，體外具有分化為成肺細胞、骨細胞、軟骨細胞、心肌細胞、神經元樣細胞、肝細胞潛能。在免疫調節(jié)中MSC通過主動和特異性抑制異常免疫反應和建立再生微環(huán)境的獨特能力。并且MSC可從多種人體組織中輕松獲得，已成為細胞治療領域有吸引力的候選細胞。

目前來看，間充質干細胞已成為全球開展臨床研究項目數最多的細胞，全球也有近十款間充質干細胞藥物上市。目前，間充質干細胞臨床試驗已經超過900項，用于治療各種難治性疾病。從國家分類來看，中國開展的間充質干細胞臨床研究最多（這里包括醫(yī)院注冊和/或企業(yè)發(fā)起的臨床試驗，醫(yī)院占多數），主要占22%；美國緊隨其后，大約占19%，接著是韓國、西班牙和伊朗等國，歐洲國家加起來大概占比17%。
 

 

在人骨髓 (BM) 中，MSCs 的頻率估計約為總有核細胞的 0.001-0.01%，并且據報道隨著年齡的增長而下降。最常見的是，一個應用的治療細胞劑量約為 1-5*106 MSCs/kg 。因此需要一個可靠、快速和安全的離體擴增系統(tǒng)。此外，由于它們的臨床療效可能取決于給予的多次劑量，因此需要進行廣泛的離體擴增步驟以積累足夠的細胞數量。
 

烏爾姆大學開發(fā)易于大規(guī)模放大實驗

位于德國巴登-符騰堡州烏爾姆市的烏爾姆大學（Universität Ulm）大學，使用全自動封閉式中空纖維反應器，從 BM 中進行了有效的臨床規(guī)模 MSC 分離和擴增。人血小板裂解物 (PL) 已被證明是一種安全可行的替代動物來源血清的替代品。細胞培養(yǎng)使用新鮮的完全培養(yǎng)基 ：最低限度的a -MEM培養(yǎng)基（90%） ( Lonza, Basel, Switzerland)，補充有 10% PL 和 2 IU/ml 肝素 (B. Braun, Melsungen,德國）或 10% FCS（Gibco/Life Technologies, Freiburg, Germany）。添加到生物反應器的 IC 端，并根據每天兩次從反應器采樣口采樣的葡萄糖消耗和乳酸生成速率的調整 IC 培養(yǎng)基的入口速率。上樣：直接從六個單獨的 BM 供體中分離出單個核細胞。
 

結果

對于第 0 代：每個 Quantum 播種 238*106 ±45*106 個 MNC。在 13.0±0.0 天的培養(yǎng)期間進行 10.4±0.5 次群體倍增后，每個Quantum可直接收集39.5*106 ±5.8*106 個 MSC。
 

Quantum系統(tǒng)

Quantum自動化細胞擴增系統(tǒng)是一款結合中空纖維反應器、細胞培養(yǎng)箱與潔凈室為一體化的自動化擴增設備，該設備具有功能性封閉、全自動可規(guī)�；�、微環(huán)境穩(wěn)定及擴增效率極佳、可靈活擴增多種貼壁及懸浮細胞等特點。Quantum的核心部件是由11,500根中空纖維所組成的生物反應器，培養(yǎng)表面積達到了2.1平方米，相當于120只T175瓶或33層細胞工廠。目前已有多家臨床機構和研發(fā)單位使用該設備建立了不同的擴增方案，實現了細胞的高度自動化擴增，獲取了穩(wěn)定、安全、高質量的細胞，也節(jié)約了生產成本。
 

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