應(yīng)用鱟試驗法檢測藥物的內(nèi)毒素含量

藥物作為終產(chǎn)物進行內(nèi)毒素LT法檢測是極為適宜的。

美國FDA已將LT法作為法定的藥物內(nèi)毒素的檢測方法。檢測時，應(yīng)用的鱟試劑其敏感性不得低于0.2EU/mL。并應(yīng)考慮藥物中內(nèi)毒素的耐受限量（Tolerance limit，其值等于每mg或每ml產(chǎn)物中內(nèi)毒素的允許量)。

如果一種藥品未曾通過LT法（鱟試驗法，Limulus test），但卻通過了RT法（家兔熱原試驗，Rabbit pyrogen test），則這種藥物亦不能出廠，除非此種RT法由官方進行。有一些藥物，特別是已知有抑制或增強LT反應(yīng)的藥物必須作抑制/增強試驗。

應(yīng)用LT法檢測抗生素中內(nèi)毒素的含量是很適宜的。大多數(shù)常用的抗生素如林可霉素、氯霉素、慶大霉素、雙氫鏈霉素、乳酸鹽紅霉素等并不抑制LT反應(yīng)，故可直接進行測定。但亦有一些抗生素溶液能抑制LT反應(yīng)，故必須進行抑制試驗�？捎米懔康臒o熱原水進行稀釋，直至用該抗生素不能抑制LT凝膠作用的最高濃度進行試驗，所以采用的鱟試劑的敏感度必須等于或超過藥典規(guī)定的熱原試驗的敏感度。
 

這些能抑制LT反應(yīng)的藥物中最典型的是青霉素類藥物，其抑制機理目前尚不清楚。有人認為青霉素的抑制作用是因其對細菌細胞壁所含的酶起作用之故；另有人認為青霉素對LT凝膠形成的抑制作用與它們的血清蛋白結(jié)合率有顯著的相關(guān)、（p<0.01）。如BRL1071青霉素的血清蛋白結(jié)合率最高，它對LT反應(yīng)的抑制作用亦最強，1.5mmol即能起抑制作用。鹽酸四環(huán)素對LT反應(yīng)亦有抑制作用，其抑制機理是由于抗生素溶液pH過低（≈4)的緣故。

用LT法測定抗生素中內(nèi)毒素含量比RT法敏感10～100倍。

腫瘤化學(xué)療劑的副反應(yīng)較多，有些與應(yīng)用內(nèi)毒素后相似。因此其不良反應(yīng)可能是由于內(nèi)毒素的污染所致。左旋門冬酰胺酶是由大腸桿菌或歐氏（Erwinia)植病桿菌制備的，由大腸桿菌制備的門冬酰胺酶每1000單位含內(nèi)毒素超過1ng，由歐氏桿菌制備的酶中亦發(fā)現(xiàn)有微量的內(nèi)毒素。另外，博萊霉素，柔紅霉素、長春新堿等藥品，亦有少量的內(nèi)毒素存在，--般為0.1～5ng/ m1。因此，必須對抗腫瘤半成品、成品及加工過程進行內(nèi)毒素的檢測，使藥物中的內(nèi)毒素含量控制在安全水平以下，以減少不良反應(yīng)。

有些抗腫瘤藥有細胞毒性，不宜采用RT法，因此LT法用于抗腫瘤藥物中內(nèi)毒素的檢測是可行和適宜的。試管法仍為最實用的方法。