用于細(xì)胞體外培育的二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法以及使用注意事項(xiàng)
瀏覽次數(shù):1241 發(fā)布日期:2022-11-23
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二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模仿構(gòu)成一個(gè)相似細(xì)胞/安排在生物體內(nèi)的成長環(huán)境,培養(yǎng)箱需求安穩(wěn)的溫度(37°C)、安穩(wěn)的CO2水平(5%)、安穩(wěn)的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細(xì)胞/安排進(jìn)行體外培育的一種設(shè)備。
二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模仿構(gòu)成一個(gè)相似細(xì)胞/安排在生物體內(nèi)的成長環(huán)境,如安穩(wěn)的溫度(37°C)、安穩(wěn)的CO2水平(5%)、安穩(wěn)的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細(xì)胞/安排進(jìn)行體外培育的一種設(shè)備。
二氧化碳培養(yǎng)箱運(yùn)用規(guī)模
其廣泛運(yùn)用于細(xì)胞、安排培育和某些格外微生物的培育,常見于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研討、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的搜集、各種物理、化學(xué)要素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研討和出產(chǎn)、培育雜交瘤細(xì)胞出產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、安排工程、藥物挑選等研討范疇。
用戶的需求
用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條zui基本的需求:
一是需求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟、二氧化碳濃度和濕度供給zui安穩(wěn)的操控,以便于其研討作業(yè)的發(fā)展;
二是需求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進(jìn)行有用的防備,并且能夠守時(shí)消除污染,以維護(hù)研討成果,避免樣品丟失。
二氧化碳培養(yǎng)箱微處置操控體系
微處置操控體系是堅(jiān)持培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度和CO2 濃度穩(wěn)態(tài)的操作體系。微處置操控體系和其它各種功用附件(如高低溫主動(dòng)調(diào)理和警報(bào)設(shè)備、CO2警報(bào)設(shè)備、密碼維護(hù)設(shè)置等)的運(yùn)用,使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和操控都十分的簡潔。
如:LEEC 的PID 微處置器觸摸屏操控體系,它能嚴(yán)格操控氣體的濃度并將其損耗降低水平,以確保培育環(huán)境安穩(wěn)不變,且能確保長期培育進(jìn)程中箱內(nèi)溫度,并有液晶顯現(xiàn),圖形化進(jìn)程監(jiān)控、干涉事情記載等。此外報(bào)警體系也是不行少,它能讓你及時(shí)曉得培養(yǎng)箱呈現(xiàn)的情況,并做出反響,然后zui大極限地降低了丟失,確保實(shí)驗(yàn)的接連性。有些培養(yǎng)箱有聲/光報(bào)警設(shè)備,溫度改動(dòng)達(dá)±0.5℃,或CO2 濃度改動(dòng)達(dá)±5%時(shí),即會(huì)主動(dòng)報(bào)警;有些具有CO2 濃度反常報(bào)警顯現(xiàn)功用;有些具有低壓、斷電報(bào)警功用。這些設(shè)備都是為了便利運(yùn)用者,以削減繁瑣單調(diào)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程而規(guī)劃的。
二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法
氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱體系都是和牢靠的,一起它們都有著各自的長處和缺陷。
水套式加熱是經(jīng)過一個(gè)獨(dú)立的水套層圍住內(nèi)部的箱體來堅(jiān)持溫度安穩(wěn)的,其長處:水是一種*的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時(shí)分,水套式體系就能夠?qū)Ρ乳L期的堅(jiān)持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度性和安穩(wěn)性,有利于實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太安穩(wěn)(如有用電約束或常常停電)的用戶選用。
氣套式加熱是經(jīng)過遍及箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進(jìn)行加熱的,又名六面直接加熱。
氣套式與水套式對比,具有加熱快,溫度的康復(fù)比水套式培養(yǎng)箱敏捷的特色,格外有利于短期培育以及需求箱門頻頻開關(guān)取放樣的培育。此外,關(guān)于運(yùn)用者來說氣套式規(guī)劃比水套式更簡略化(水套式需求對水箱進(jìn)行加水、清空和清潔,并要常常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況,還有潛在的污染危險(xiǎn))。
二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度操控
二氧化碳濃度能夠經(jīng)過紅外傳感器(IR)或熱導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行丈量。兩種傳感器各有優(yōu)缺陷。
熱導(dǎo)傳感器
熱導(dǎo)傳感器監(jiān)控CO2濃度的作業(yè)原理是根據(jù)對內(nèi)腔空氣熱導(dǎo)率的接連丈量,輸入CO2氣體的低熱導(dǎo)率會(huì)使腔內(nèi)空氣的熱導(dǎo)率發(fā)作改動(dòng),這樣就會(huì)發(fā)作一個(gè)與CO2濃度直接成正比的電信號(hào)。
TC操控體系的一個(gè)缺陷即是箱內(nèi)溫度和相對濕度的改動(dòng)會(huì)影響傳感器的度。當(dāng)箱門被頻頻翻開時(shí),不只CO2濃度,溫度和相對濕度也會(huì)發(fā)作很大的動(dòng)搖,因而影響了TC傳感器的精度。當(dāng)需求的培育條件和頻頻敞開培養(yǎng)箱門時(shí),此操控體系就顯得不太適用了。
紅外傳感器
紅外傳感器(IR)它是經(jīng)過一個(gè)光學(xué)傳感器來檢測CO2水平的。IR體系包含一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)傳感器,當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的有些紅外線之后,傳感器就能夠檢測出紅外線的削減量,而被吸收紅外線的量正巧對應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,然后能夠得出箱體內(nèi)CO2的濃度。由于IR體系是經(jīng)過紅外線削減來斷定箱內(nèi)CO2濃度,而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或有些吸收紅外線,使得IR體系對箱體內(nèi)顆粒物的多少對比靈敏,IR傳感器運(yùn)用在進(jìn)氣口具有HEPA空氣過濾器的培養(yǎng)箱較適宜。
二氧化碳培養(yǎng)箱相對濕度
箱內(nèi)濕度關(guān)于培育作業(yè)來說是一項(xiàng)十分重要但是又常常被疏忽的要素。堅(jiān)持滿意的濕度水平并且要有滿意快的濕度康復(fù)速度(如在開關(guān)門后)才干確保不會(huì)由于過度枯燥而致使培育失利。
當(dāng)前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過增濕盤的蒸騰作用發(fā)作濕氣的(其發(fā)作的相對濕度水平可達(dá)95%左右,但開門后濕度康復(fù)速度很慢)。盡量挑選濕度蒸騰面積大的培養(yǎng)箱,由于濕度蒸騰面積越大,越簡略抵達(dá)zui大相對飽和濕度并且開關(guān)門后的濕度康復(fù)的時(shí)刻越短。
二氧化碳培養(yǎng)箱污染物的操控
污染是致使細(xì)胞培育失利的一個(gè)首要要素,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們規(guī)劃了多種不一樣的設(shè)備去削減和避免污染的發(fā)作,其首要路徑都是盡量削減微生物能夠成長的區(qū)域和外表,并主動(dòng)掃除污染設(shè)備來有用避免污染的發(fā)作。
例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在運(yùn)用進(jìn)程中有時(shí)會(huì)伴有霉菌成長,為確保培養(yǎng)箱免受污染且確保儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,有些公司開發(fā)規(guī)劃了帶有紫外消毒功用的CO2培養(yǎng)箱;還有公司規(guī)劃HEPA濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除掉99.97%的0.3um以上的顆粒;此外,主動(dòng)高溫?zé)峥諝鉁缇O(shè)備能使箱內(nèi)溫度抵達(dá)高溫(如200℃)然后殺死一切污染微生物,乃至芽孢等耐高溫微生物,這些設(shè)備關(guān)于細(xì)胞培育來說是更有安全確保的。
二氧化碳培養(yǎng)箱運(yùn)用注意事項(xiàng)
1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能翻開電源開關(guān),否則會(huì)損壞加熱元件。
2、培養(yǎng)箱運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)月后,水箱內(nèi)的水因蒸騰能夠削減,當(dāng)?shù)退恢甘緹?WLow12)亮?xí)r應(yīng)彌補(bǔ)加水。先翻開溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔彌補(bǔ)加水使低水位指示燈平息,再計(jì)量彌補(bǔ)加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后阻塞溢水孔。
3、二氧化碳培養(yǎng)箱能夠做高精度恒溫培養(yǎng)箱運(yùn)用,這時(shí)須封閉CO2操控體系。
4、由于CO2傳感器是在飽和濕度下校對的,因而加濕盤有必要時(shí)刻裝有滅菌水。
5、當(dāng)顯現(xiàn)溫度超越置定溫度1℃時(shí),超溫報(bào)警指示燈(OverTemp7)亮,并發(fā)出尖利報(bào)警聲,這時(shí)應(yīng)封閉電源30分鐘;若再翻開電源(溫控)開關(guān)(Power20)依然超溫,則應(yīng)封閉電源并報(bào)修理人員。
6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時(shí)應(yīng)替換鋼瓶。
7、盡量削減翻開玻璃門的時(shí)刻。
8、假如二氧化碳培養(yǎng)箱長期不必,封閉前有必要鏟除作業(yè)室內(nèi)水分,翻開玻璃門通風(fēng)24小時(shí)后再封閉。
9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱作業(yè)室時(shí),不要磕碰傳感器和拌和電機(jī)風(fēng)輪等部件。
10、拆裝作業(yè)室內(nèi)支架護(hù)罩,有必要運(yùn)用隨機(jī)扳手,不得過度用力。
11、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)箱前有必要掃除箱體內(nèi)的水。排水時(shí),將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,悄悄吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
12、轉(zhuǎn)移二氧化碳培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出作業(yè)室內(nèi)的擱板和加濕盤,避免磕碰損壞玻璃門。
13、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)箱時(shí)不能倒置,一起必定不要抬箱門,避免門變形。