石蠟制片與冷凍制片的實(shí)驗(yàn)步驟及高效得到高質(zhì)量冰凍切片的方法介紹

組織學(xué)設(shè)備是免疫組化實(shí)驗(yàn)的必備設(shè)備，而免疫組化的常用切片主要包括石蠟切片和冰凍切片兩種。

石蠟制片的步驟：
取材→脫水（固定、脫水、透明、浸蠟）→石蠟包埋→切片→染色、封片→鏡下觀察。

這里涉及到的常用基礎(chǔ)組織學(xué)設(shè)備有：脫水機(jī)、包埋劑、石蠟切片機(jī)、染色機(jī)、封片機(jī)、顯微鏡等。

冷凍制片的步驟：
取材→冷凍包埋→切片→染色（手動也行）→鏡下觀察。

必須用到的基礎(chǔ)組織學(xué)設(shè)備有：速凍儀、冷凍切片機(jī)、顯微鏡。

免疫組化有哪些痛點(diǎn)？免疫組化實(shí)驗(yàn)根據(jù)樣本類型、抗體類型、切片要求等條件的不同，對應(yīng)免疫組化要求也不同。同時(shí)石蠟切片在免疫組化實(shí)驗(yàn)中制片步驟繁瑣，組織前處理要求高，可能破壞抗原，需要做抗原修復(fù)；而冰凍切片能夠較好地保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。想要避開抗原修復(fù)這一步驟，免疫組化切片時(shí)可以選擇冰凍切片。冰凍切片雖然無需抗原修復(fù)，但在免疫組化時(shí)常常會遇到：

• 細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)；
• 切片厚度也較石蠟的厚，會直接影響切片質(zhì)量；
• 如果冷凍切片機(jī)箱體制冷不足，就需要使用速凍儀輔助冷凍包埋組織。

瑞沃德冷凍切片機(jī)用于免疫組化實(shí)驗(yàn)冷凍切片時(shí)，可解決以上所有難題 ：

1、緩解片子偏厚問題
 

▲圖：瑞沃德冰凍切片機(jī)切片實(shí)拍圖
 

• 壓縮機(jī)冷量輸出大可做二次溫控補(bǔ)償；PID控溫，使得箱體溫度在一定范圍內(nèi)波動且可以自動恢復(fù)；
• 頂/級十字交叉導(dǎo)軌搭配五相高分辨率步進(jìn)電機(jī)、精密絲桿和水平進(jìn)樣滑塊，組成高精準(zhǔn)進(jìn)樣系統(tǒng)；
• 以上兩點(diǎn)保證切片無需設(shè)置過厚就能切出滿足需求的片子。

2、緩解冰晶產(chǎn)生的壓力

▲瑞沃德冰凍切片機(jī)可開啟快冷功能