測(cè)定香芍軟膠囊中砷汞鉛鎘銅含量的應(yīng)用方案

引言
有害重金屬元素進(jìn)入人體并與酶蛋白牢固結(jié)合，可導(dǎo)致組織細(xì)胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能上的損害，甚至引起腫瘤，因此世界各國(guó)對(duì)這些有害元素在藥品、食品中的含量制定了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)�！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2005年版引進(jìn)ICP-MS法作為檢測(cè)中藥砷、汞、鉛、鎘、銅5種元素的測(cè)量方法;并對(duì)所載甘草、白芍、阿膠、金銀花等17種生藥或提取物提出了限量要求。本文香芍軟膠囊(XSSC)由香附、赤芍等5昧中藥組成,具有疏肝理氣、活血化瘀、止痛之功,用于氣滯血瘀型慢性膽囊炎的治療。因本病患者服用療程長(zhǎng),有毒重金屬易體內(nèi)蓄積,影響人體健康,對(duì)有害元素的嚴(yán)格控制顯得尤為重要。本文采用微波消解、ICP- -MS法對(duì)XSSC囊心物中砷、汞、鉛、鎘、銅含量進(jìn)行同時(shí)測(cè)-定,為藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高提供科學(xué)依據(jù)。
方法原理樣品經(jīng)微波消解,以lle為內(nèi)標(biāo)，以茶葉、田白菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為質(zhì)控,采用ICP-MS測(cè)定上述5種元素。結(jié)果:對(duì)于所測(cè)5種元素,標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r>0.9996,回收率為95.8-101.6% ，RSD<5.8%。結(jié)論:本測(cè)定方法快捷、準(zhǔn)確、靈敏度高，適用于XSSC囊心物中，上述5種元素的同時(shí)測(cè)定。

儀器與試劑
ICP-MS6880電感耦合等離子體質(zhì)譜儀
微波消解
濃硝酸(優(yōu)級(jí)純）
30%過(guò)氧化氫
內(nèi)標(biāo)溶液ρ(Re)=25ug/L-1(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心);標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)
為茶葉(GBVVl0016)、圓白菜(GBWI0014)(中國(guó)地球物理地球化學(xué)勘查研究所)。

方法與結(jié)果
ICP-MS測(cè)定條件
RF功率1300W;冷氣流速m-1;砷、汞、鉛、鎘、銅標(biāo)準(zhǔn)溶13.0L/min-1;助燃?xì)饬魉?.80L/min-1霧化氣流速0.87L/min-1 ;采集深度lletepe ;采樣錐孔徑(Ni)1.0mm ;截取錐(Ni)孔徑0.7mm ;樣品提升速率0.8mL/min-1 ;霧室溫度3°C。
微波消解條件實(shí)驗(yàn)對(duì)影響藥品消解效果的消解溫度、消解酸體系、樣品量等因素進(jìn)行系統(tǒng)考察,其優(yōu)化消解條件為:取樣品0.5000g，以硝酸為消解體系, 控制溫度100°C消解5min ;控制溫度150~C消解5min ;控制溫度180°C消解15min。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和內(nèi)標(biāo)溶液的制備
精密吸取各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,用10%硝酸稀釋配成含As、Hg、Pb、cd、Cu的混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。
As:0、2、10、30、50、100ng/mL-1;
Cd:0、2、10、30、50、100ng/mL-1 ;
cu:0、2、10、30、50、100ng/mL-1;
Pb:0、2、10、30、50、100mL-1
Hg:0、2、10、30、50ng/mL-1。
另精密吸取Re溶液適量，用水稀釋成25p，g/L-1，即得到內(nèi)標(biāo)溶液。按照實(shí)驗(yàn)測(cè)試條件操作，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

供試品溶液的制備
取XSSC囊心物0.5000g，置耐壓耐高溫微波消解罐中,加硝酸5mL,蓋好聚四氟乙烯罐蓋，預(yù)消解過(guò)夜,加過(guò)氧化氫2mL,并擰緊保護(hù)蓋,同時(shí)密閉消解罐，并將消解罐放入消解儀的轉(zhuǎn)盤(pán)中, 按設(shè)定的微波消解參數(shù)進(jìn)行消解反應(yīng)。待消解完成后,將消解后的溶液定容至25mL量瓶中，混勻,即為待測(cè)樣品溶液。同法制作茶葉、圓白菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液。平行做10份全過(guò)程試劑空白。25線性關(guān)系考察5種元素測(cè)定后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果見(jiàn)表1。

重復(fù)性試驗(yàn)
取XSSC囊心物0.50008 ,按照2.4項(xiàng)下方法操作，平行試驗(yàn)6份，計(jì)算RSD結(jié)果均小于4.8%。

2 10 樣品測(cè)定在上述試驗(yàn)條件下,對(duì)3批膠囊囊心物中5種元素進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表3。
 
方法檢出限
根據(jù)10份平行試劑空白測(cè)定所得標(biāo)準(zhǔn)偏差3倍對(duì)應(yīng)的濃度計(jì)算As、Hg、Pb、cd、cu各元素檢出限依次為0.45、0.032、0.0025、0.043、0.004ng/mL-1。

結(jié)論
電感耦合等離子體質(zhì)譜技術(shù)從1980年發(fā)表第一篇里程碑文章至今已有近30年歷史，其具有在大氣壓下進(jìn)樣。便于同其他技術(shù)聯(lián)用;譜圖簡(jiǎn)單, 檢出限低，分析速度快，動(dòng)態(tài)譜線寬;可用于同位素、單、多元素分析,以及金屬元素形態(tài)分析;便于簡(jiǎn)單質(zhì)量分析器的應(yīng)用;理論上能電離所有金屬元素等優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)得到迅速發(fā)展。儀器使用已不局限于當(dāng)初的地質(zhì)領(lǐng)域,開(kāi)始應(yīng)用于環(huán)境、生物、醫(yī)藥、食品等范疇BarnesI曾預(yù)言21世紀(jì)將是ICP-MS儀器激增的年代。
2005年版《中華人民共和國(guó)藥典》將ICP. -MS法作為法定的元素測(cè)定方法載入藥典;對(duì)部分藥品砷、汞、鉛、鎘、銅含量進(jìn)行限定,但大部分中藥的重金屬標(biāo)準(zhǔn)尚未制定,新藥的質(zhì)量控制也需要一個(gè)完善過(guò)程，一些中藥有毒重金屬超標(biāo),影響中藥走向世界,從而包括采用ICP-MS法在內(nèi)全面提高中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，已顯得異常重要。本文采用微波消解方法, 避免砷、汞損失,采用ICP-MS測(cè)定砷、汞、鉛、鎘、銅含量，可避免重金屬元素傳統(tǒng)測(cè)定方法操作繁雜,不能同時(shí)測(cè)定等缺點(diǎn),保證含量測(cè)定的準(zhǔn)確、便捷,提高XSSC的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,砷、汞、鉛、鎘4種元素的含量范圍分別為0.22-0.24、0.0043-0.0045、0.08 ~ 0.28、0.0181 ~ 0.0193jmg/kg-1，均低于《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》限量指標(biāo):砷s2.0mg/kg-1、 鎘≤0.3mg/kg-1、鉛≤5.0mg/kg-1、汞≤0.2mg. kg-1 ,其中的汞、鉛、鎘含量低于美國(guó)FDA規(guī)定標(biāo)準(zhǔn):鉛≤lμg/g-1，鎘≤0.3μg/g-1、汞≤0.026μg/g-1，從而保證本制劑長(zhǎng)期用藥重金屬的安全，也為制劑的質(zhì)量控制和提高提供科學(xué)依據(jù)。