細胞工廠實戰(zhàn)操作常見問題答疑

細胞工廠

實戰(zhàn)操作答疑篇

通過前四期，我們對細胞工廠的應用、操作流程、相關(guān)配件、串聯(lián)使用等方面有了詳細的了解。

但究竟如何選擇合適的細胞工廠？

新舊版細胞工廠有何不同？

不同的選擇有哪些優(yōu)勢？

 

我的細胞要轉(zhuǎn)移到細胞工廠中，應該選擇幾層的呢？

 

可根據(jù)單個批次需要獲得的細胞數(shù)量，可以大致計算出培養(yǎng)細胞所需要用到的培養(yǎng)面積，進一步確定所需的細胞工廠層數(shù)。

第一步:計算每層細胞工廠可能獲得的最大細胞數(shù)量

（單位面積最大細胞數(shù)量）x（632平方厘米）=每層細胞工廠可獲得的最大細胞數(shù)量

注:單位面積最大細胞數(shù)量和細胞系的種類、環(huán)境等因素有關(guān)，每個實驗室得出的數(shù)據(jù)可能會有所差異，用戶可根據(jù)自己的實際情況獲得此數(shù)據(jù)。

例如：10^4x632平方厘米=6.3x10^6

第二步:計算每批次操作中所需的細胞層數(shù)

（每批次操作中所需的細胞）/（每層細胞工廠可獲得的最大細胞量）=所需要的細胞層數(shù)

例如：（6x10^8）/（6.3x10^6）=9.5 層，所以可以選用10層細胞工廠。
 

耐思現(xiàn)有單層，2層，5層，10層和40層的細胞工廠。

耐思從批量化、標準化制造，逐步走向定制化、個性化制造，可額外定制層數(shù)，定制出品到完成送貨周期約為1周，滿足客戶個性化層數(shù)需求。
 

細胞工廠有大小口，雙大口和雙小口，都有什么特點和區(qū)別呢？

大口設計，便于直接傾倒培養(yǎng)基；小口設計，便于連接管路進行無菌操作�？筛鶕�(jù)實際操作的需求來選擇口徑大小。
 

之前用別家的總覺得不太平整，你家的有這問題嗎？

產(chǎn)品升級前后都進行了焊接測試、中間層測第8層平面度，測試結(jié)果如下：

升級前平面度最大值1.3900，升級后最大值1.1894，且平面度較穩(wěn)定，滿足技術(shù)要求。

細胞工廠可以用來培養(yǎng)哪些細胞？
 

耐思細胞工廠可用于如疫苗、單克隆抗體或生物制藥等工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，適合于貼壁細胞培養(yǎng)，線性放大不會改變細胞生長的動力學條件。如VERO、MRC-5、2BS、293T、L-929等。

我在小試時使用手動操作，現(xiàn)在馬上要進行中試放大，有沒有什么方案可以提高效率？

可以使用密閉管路連接的方式用細胞工廠配件將多個細胞工廠串聯(lián)起來。由于生產(chǎn)工藝的區(qū)別，在使用細胞工廠進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)時可能會采用不同的串聯(lián)方式，不同的生物工藝配件。


耐思生命能夠根據(jù)您的需求進行管路的專屬定制，從批量化、標準化制造，逐步走向定制化、個性化制造，全方位寬領(lǐng)域滿足客戶所需。
 

細胞工廠細胞培養(yǎng)的時候該如何觀察細胞的狀態(tài)？如何操作？
 

對于1、2、4、10層的細胞工廠一般使用倒置顯微鏡對細胞工廠中細胞的存活率和生長狀況進行監(jiān)測。細胞工廠中各層之間或同一層之間的培養(yǎng)環(huán)境基本相同，因此可以通過觀察底部一兩層或同一層之間的邊緣細胞狀態(tài)，來判斷整體細胞工廠中細胞的狀態(tài)。
 

如果倒置顯微鏡比較小，無法放置10層細胞工廠及40層細胞工廠，可以在培養(yǎng)中過程中將培養(yǎng)的細胞接種到另一個1層細胞工廠進行對照，根據(jù)1層的生長狀況對10、40層細胞工廠進行一個估計。

細胞工廠培養(yǎng)細胞的性能如何？

我們將準備好的對數(shù)期VERO 細胞制成細胞懸液，以5X10/mL 的濃度接種至一個二層細胞工廠中，接種體積為400mL。


（40x 培養(yǎng)24h后觀察）


（40x 培養(yǎng)48h后觀察）


（40x 培養(yǎng)72h后觀察）
 

通過觀察可見細胞均貼壁生長，形態(tài)正常，分布均勻，生長狀態(tài)良好。

我們與市面上其他品牌的二層細胞工廠通過三天細胞培養(yǎng)后細胞消化計數(shù)。

在細胞總數(shù)上耐思細胞工廠略勝一籌。

你們細胞工廠有那些驗證文件？我們的工業(yè)生產(chǎn)需要資料審批。

耐思細胞工廠驗證文件重點集中于產(chǎn)品的安全性能驗證和適用性能驗證，包含原材料信息、產(chǎn)品理化測試（如熾灼殘渣、金屬元素、溶出物檢測等）、產(chǎn)品生物學測試（如體外細胞毒性試驗、皮膚致敏試驗、皮膚刺激試驗、皮內(nèi)反應試驗、急性全身毒性測試、溶血試驗等）、產(chǎn)品溶出物測試、產(chǎn)品細胞生長測試（如細胞生長均一性試驗、不同品牌細胞培養(yǎng)對比等）、無菌保障及工藝信息。