選擇和使用同型對(duì)照isotype進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的重要性和方法

一、 什么是同種型對(duì)照抗體？

選擇和使用正確的同種型對(duì)照抗體是所有體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的重要組成部分。這些抗體用作陰性對(duì)照——它們與主要靶向抗體的確切宿主物種、同種型和亞類(lèi)相匹配，但對(duì)目標(biāo)生物體或物種中存在的蛋白質(zhì)沒(méi)有特異性。同型對(duì)照抗體被設(shè)計(jì)為在體內(nèi)動(dòng)物模型中不結(jié)合，但保留實(shí)驗(yàn)中使用的一抗的所有非特異性特征。

二、 為什么在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中納入同型對(duì)照治療組很重要？

需要納入同種型對(duì)照治療組才能生成可靠的數(shù)據(jù)，因?yàn)樗�使研究人員能夠準(zhǔn)確地區(qū)分從一抗以抗原特異性方式結(jié)合觀察到的結(jié)果和從非抗原特異性結(jié)合或抗體注射的其他非特異性效應(yīng)觀察到的結(jié)果。

給予動(dòng)物的一抗可以與細(xì)胞上的 Fc 受體發(fā)生非抗原特異性相互作用，包括 B 細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、NK 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。有時(shí) Fc 受體結(jié)合參與一抗的作用機(jī)制，例如抗體定向細(xì)胞毒性 (ADCC)。然而，非抗原特異性 Fc 受體結(jié)合可能導(dǎo)致可觀察到的與抗原特異性結(jié)合無(wú)關(guān)的生物效應(yīng)或表型。與一抗同種型和亞類(lèi)相匹配的同種型對(duì)照抗體也將與 Fc 受體結(jié)合，從而使研究人員能夠控制這些效應(yīng)。
 

除了匹配同種型和亞類(lèi)外，理想的同種型對(duì)照還必須與一抗的宿主物種匹配。許多用于小鼠模型體內(nèi)研究的一抗單克隆抗體是利用雜交瘤技術(shù)在大鼠或倉(cāng)鼠身上產(chǎn)生的。當(dāng)異種大鼠或倉(cāng)鼠 IgG 注射到小鼠體內(nèi)時(shí)，可能會(huì)針對(duì)注射的抗體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。多次注射增加了這種可能性。與 Fc 受體結(jié)合一樣，這也可能導(dǎo)致與抗原特異性結(jié)合無(wú)關(guān)的可觀察表型。包括一組用與一抗宿主物種相匹配的同種型對(duì)照抗體治療的小鼠，使研究人員能夠控制這些非抗原特異性效應(yīng)。

三、 有關(guān)同型對(duì)照的常見(jiàn)問(wèn)題

1、可以使用未治療組或 PBS 治療組代替同型對(duì)照治療組嗎？

不建議使用未經(jīng)處理的組或 PBS 處理的組作為簡(jiǎn)化的陰性對(duì)照。必須使用同種型對(duì)照抗體來(lái)準(zhǔn)確區(qū)分由于一抗以抗原特異性方式結(jié)合而觀察到的結(jié)果和由于非抗原特異性結(jié)合或其他非特異性相互作用而觀察到的結(jié)果。

2、如果用不同宿主物種、同種型或亞類(lèi)的多種一抗治療小鼠，對(duì)照組中的小鼠是否需要用多種同種型對(duì)照抗體治療，還是單一同種型對(duì)照抗體就足夠了？

由于抗體的宿主物種、同種型和亞類(lèi)決定了其潛在的非特異性效應(yīng)，因此同種型對(duì)照組必須與一抗處理組進(jìn)行相同的處理。例如，如果第一組注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體，則同種型對(duì)照組也必須注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體。

3、為什么選擇 Bio X Cell 同型對(duì)照抗體？

Bio X Cell 提供廣泛的同種型對(duì)照抗體，適用于體內(nèi)和體外應(yīng)用。我們的同型對(duì)照具有：

卓越的純度我們優(yōu)化的專(zhuān)有抗體制造方法可確保獲得超純抗體解決方案，無(wú)需添加蛋白質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)。使用 SDS-PAGE 對(duì)每批產(chǎn)品的純度進(jìn)行 QC 測(cè)試。
 

超低內(nèi)毒素水平每個(gè)批次的內(nèi)毒素水平均經(jīng)過(guò) QC 測(cè)試。我們的InVivo MAb 產(chǎn)品≤ 2EU/mg，InVivo Plus 產(chǎn)品≤ 1EU/mg。如果需要內(nèi)毒素水平低于 1EU/mg，請(qǐng)聯(lián)系我們的技術(shù)支持了解詳細(xì)信息。
 

無(wú)病原體每批InVivo Plus 產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)全面的鼠類(lèi)病原體篩查。結(jié)果詳細(xì)記錄在特定產(chǎn)品的數(shù)據(jù)表中，以幫助您遵守 IACUC 和動(dòng)物設(shè)施的要求。
 

低蛋白質(zhì)聚集我們專(zhuān)有的抗體制造方法可確�？贵w解決方案的蛋白質(zhì)聚集水平非常低。此外，每批InVivo Plus 產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)聚合水平 QC 測(cè)試，并保證低于總蛋白的 5%。

4、如何選擇合適的同型對(duì)照抗體？

同種型對(duì)照抗體必須與一抗的宿主物種、同種型和亞類(lèi)相匹配。為了方便客戶(hù)，我們?cè)诿總�(gè)產(chǎn)品頁(yè)面上都包含了這些重要的產(chǎn)品信息以及所有一抗的推薦同型對(duì)照。下表是適用于體內(nèi)和體外研究的 Bio X Cell 同型對(duì)照抗體的完整列表。