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全能核酸酶在病毒純化及生產(chǎn)中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):254 發(fā)布日期:2023-8-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
病毒疫苗的生產(chǎn)、細(xì)胞治療與基因治療等領(lǐng)域均可能會(huì)用到病毒,對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行控制對(duì)于保障上述產(chǎn)品的安全性和有效性具有及其重要意義。其中HCD殘留可能會(huì)傳遞腫瘤或病毒相關(guān)基因,造成潛在的危險(xiǎn)性,因此,去除宿主核酸或在最大程度上降低其殘留刻不容緩。


接下來小編就帶您
一起了解
在病毒純化過程中

如何正確使用全能核酸酶


常見的病毒純化流程

全能核酸酶應(yīng)用條件

全能核酸酶的酶活會(huì)受到多種因素的影響(例如溫度、pH、離子強(qiáng)度等),故用量范圍也會(huì)從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作環(huán)境下酶的最佳濃度不同,需要通過實(shí)驗(yàn)設(shè)置梯度進(jìn)行最佳條件的摸索。

以下是文獻(xiàn)中具體的應(yīng)用實(shí)例:


1. 樣品:狂犬病毒濃縮液

處理?xiàng)l件:核酸酶濃度50~90U/ml ,

37 ℃處理 2 h,轉(zhuǎn)入18 ~ 26 ℃處理 6h

2. 樣品:狂犬病病毒濃縮液

處理?xiàng)l件:25、50和100 U/ml,37℃


3. 樣品:流感病毒濃縮液

處理?xiàng)l件:10 U/mL,37℃


參考文獻(xiàn)

[1] 崔燕平. 非限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)狂犬病疫苗中Vero細(xì)胞DNA的去除作用[J]. 中國生物制品學(xué)雜志, v.27(04):444-447.

[2] 劉杰,劉輝,楊會(huì)強(qiáng),康莊,孫艷,毛川成,何敏,李玉華.多種方法結(jié)合去除凍干人用狂犬病疫苗中Vero細(xì)胞殘留DNA[J].中國生物制品學(xué)雜志,2013,26(12):1827-1830.

[3] 阮朝列,施錦麗,李衛(wèi)東等.Benzonase核酸酶在Vero細(xì)胞流感病毒滅活疫苗中的應(yīng)用研究[J].病毒學(xué)報(bào),2023,39(04):980-990.

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