HUGO-GT™全基因組人源化小鼠的介紹與應(yīng)用

人源化小鼠由于在模擬人類生理和病理特征方面表現(xiàn)出更強(qiáng)的相關(guān)性，逐步成為疾病研究工具的首選。但當(dāng)前普遍使用的部分基因人源化小鼠在探討遺傳疾病致病機(jī)理或藥物研發(fā)方面存在明顯不足，如Tg的隨機(jī)插入及建系復(fù)雜性和人源化區(qū)域不足性等。如果要更深入地研究致病機(jī)理，就需要用上長(zhǎng)片段甚至全基因組人源化小鼠。

為此，賽業(yè)生物啟動(dòng)了HUGO-GT^TM（Humanized Genomic Ortholog for Gene Therapy）計(jì)劃，基于自主研發(fā)的TurboKnockout-Pro技術(shù)，對(duì)鼠源基因?qū)崿F(xiàn)原位替換，成功構(gòu)建了涵蓋更豐富干預(yù)靶點(diǎn)的全基因組人源化小鼠。HUGO-GT^TM小鼠搭載了更高效的大片段載體融合技術(shù)，可以作為萬(wàn)能模板進(jìn)行針對(duì)性的突變定制服務(wù)，是更貼近真實(shí)世界生物機(jī)制的藥物臨床前研究模型。
 

人源化模型的發(fā)展演變

HUGO-GT^TM全基因組人源化模型推薦

已完成驗(yàn)證的HUGO-GT^TM全基因組人源化小鼠

即將推出的HUGO-GT^TM全基因組人源化小鼠

HUGO-GT^TM全基因組人源化模型優(yōu)勢(shì)

HUGO-GT^TM全基因組人源化模型研究案例：B6-htau小鼠

額顳葉癡呆（Frontotemporal lobar dementia, FTD）是僅次于阿爾茲海默病的第二大類早發(fā)型癡呆，已明確的FTD致病基因包括MAPT、FUS和TARDBP等。MAPT基因編碼微管相關(guān)蛋白tau，該蛋白主要分布在神經(jīng)元軸突中，對(duì)于微管的穩(wěn)定和組裝起著至關(guān)重要的作用。

B6-htau品系是小鼠Mapt基因人源化模型，通過(guò)基因編輯技術(shù)將小鼠Mapt基因替換為包含3'UTR區(qū)域的人源MAPT基因，可用于額顳葉癡呆（FTD）和阿爾茲海默癥（AD）等多種神經(jīng)退行性疾病的研究。
 

（1）人源MAPT基因表達(dá)的檢測(cè)

野生型小鼠（WT）和B6-htau小鼠（hMAPT）腦部和腎臟中人源MAPT基因表達(dá)檢測(cè)

通過(guò)QPCR檢測(cè)WT小鼠與B6-htau小鼠中人源MAPT基因的表達(dá)，結(jié)果顯示在B6-htau小鼠的腦部和腎臟均存在人源MAPT基因的表達(dá)，而WT小鼠體內(nèi)不存在人源MAPT基因的表達(dá)。（ND：Not detected）

（2）鼠源Mapt基因表達(dá)的檢測(cè)

圖3 野生型小鼠（WT）和B6-htau小鼠（hMAPT）腦部和腎臟中鼠源Mapt基因表達(dá)檢測(cè)

通過(guò)QPCR檢測(cè)WT小鼠與B6-htau小鼠中鼠源Mapt基因的表達(dá)，結(jié)果顯示在WT小鼠的腦部和腎臟均存在鼠源Mapt基因的表達(dá)，而B(niǎo)6-htau小鼠體內(nèi)不存在鼠源Mapt基因的表達(dá)。
 

（3）人源tau蛋白的表達(dá)

野生型小鼠（WT）和B6-htau小鼠（hMAPT）腦部中人源tau表達(dá)的檢測(cè)

通過(guò)Western blot檢測(cè)WT小鼠與B6-htau腦部中人源tau蛋白的表達(dá)，顯示人源tau蛋白在B6-htau小鼠的大腦中顯著表達(dá)，而在WT小鼠中未見(jiàn)明顯的表達(dá)。