柑橘類黃酮化合物Narirutin作為治療神經(jīng)性疼痛的潛在作用研究

Narirutin：柑橘的祛痛化學(xué)藥劑

由 Alomone 團(tuán)隊(duì)提供 - 2023 年 9 月

神經(jīng)病理性疼痛是一種廣泛存在的慢性疼痛，影響著全球數(shù)百萬人。盡管神經(jīng)性疼痛普遍存在，但治療神經(jīng)性疼痛的方法療效有限，或伴有不良副作用。但是，如果有一種天然化合物可以緩解神經(jīng)性疼痛呢？如果不起眼的柑橘是緩解疼痛的關(guān)鍵呢？
 

你可能會(huì)對(duì)此嗤之以鼻，但最新研究發(fā)現(xiàn)，來自柑橘（薩摩蜜柑或?qū)m川蜜柑）的類黃酮化合物 narirutin 能有效緩解大鼠模型中的神經(jīng)性疼痛。

Narirutin：柑橘的神奇化學(xué)物質(zhì)

黃酮類化合物在疼痛治療方面有著悠久的歷史，而 narirutin 也有記錄。研究表明，narirutin能通過電壓門控鉀（Kv）通道保護(hù)神經(jīng)，通過 PI3K/AKT 和 ERK/MAPK 通路阻止癌癥生長(zhǎng)，其類似物naringenin對(duì)急性和慢性嚙齒類動(dòng)物疼痛模型有益。

有鑒于此，一個(gè)對(duì)神經(jīng)病理性疼痛感興趣的中國(guó)團(tuán)隊(duì)開始研究 narirutin 是否具有鎮(zhèn)痛特性，從而使其成為治療神經(jīng)病理性疼痛的潛在療法。

Narirutin 可減輕疼痛感

為了評(píng)估 narirutin 的總體抗痛覺作用，研究小組使用了大鼠裸神經(jīng)損傷（SNI）模型。在SNI手術(shù)和隨后的鞘內(nèi)納瑞魯汀治療后，他們觀察到大鼠在治療后一小時(shí)的痛覺明顯減弱。大鼠在接受 narirutin 治療后對(duì)寒冷的敏感性也有所降低。

在確認(rèn)了 narirutin 的一般抗痛覺特性后，就到了了解其背后機(jī)制的時(shí)候了。

Narirutin 特別靶標(biāo)于Nav1.7

研究小組利用維拉啶（VTD）測(cè)定法首先確定了 narirutin 會(huì)影響振蕩（OS）神經(jīng)元，而 OS 神經(jīng)元的變化反映了痛覺感受器的變化。之前的工作已經(jīng)表明，OS神經(jīng)元群與電壓門控鈉（Nav）1.7通道高度相關(guān)，因此該通道成為研究小組懷疑 narirutin 的主要目標(biāo)。
 

為了揭示這一點(diǎn)，研究人員使用了全細(xì)胞膜片鉗記錄，以及Alonone的Tetrodotoxin citrate（#T-550）（TTX）和 Nav1.8 選擇性抑制劑（PF-05089771（#P-315）和 A-803467 （#A-105））來分離 Nav 電流。這些數(shù)據(jù)顯示了 narirutin 如何主要影響 TTX 敏感電流，阻斷小直徑背根神經(jīng)節(jié)（DRG）痛覺神經(jīng)元和 HEK 293 細(xì)胞中的 Nav 1.7。有趣的是， narirutin 對(duì) Nav 1.8 和 Nav 1.9 等抗 TTX 通道沒有影響（我們最近強(qiáng)調(diào)了蜘蛛毒液如何揭示了 Nav 通道之間與疼痛有關(guān)的串?dāng)_）。

Narirutin 也能下調(diào) Nav1.7 的表達(dá)

除了抑制 Nav1.7 之外，研究小組還想看看 narirutin 是否會(huì)影響 Nav1.7 的表達(dá)。為了驗(yàn)證這一點(diǎn)，他們觀察了 SNI 大鼠的 DRGs。使用Alomone的Anti-NaV1.7 (SCN9A)Antibody（#ASC-008）進(jìn)行的Western Blot顯示，對(duì)照組大鼠和治療大鼠的Nav1.7表達(dá)沒有顯著差異，但免疫組化顯示，SNI后不同類型的神經(jīng)元Nav1.7表達(dá)存在差異。

當(dāng)分別用 CGRP、IB4（用于無髓鞘肽能或非肽能感覺神經(jīng)元）和 NF200（用于有髓鞘神經(jīng)元）對(duì) Nav1.7 進(jìn)行共免疫染色時(shí)，他們觀察到 CGRP 標(biāo)記的神經(jīng)元中 Nav1.7 陽性細(xì)胞增多（圖 1）。用 narirutin 治療時(shí)，Nav1.7 陽性細(xì)胞的增加是有限的--這在 IB4 或 NF200 標(biāo)記的神經(jīng)元中是看不到的。這表明 narirutin 可以下調(diào) CGRP+ DRG 痛覺神經(jīng)元中 Nav1.7 的表達(dá)。

Nav1.7 在不同類型 DRG 感覺神經(jīng)元中的表達(dá)

圖 1.Nav1.7 在不同類型 DRG 感覺神經(jīng)元中的表達(dá)。(a,b）Western 印跡分析 Nav1.7 在ham、SNI 和用 narirutin 處理的 SNI（SNI + N）中的表達(dá)水平。(c）Sham、SNI 和 SNI + N 的 DRG 神經(jīng)元中的 Nav1.7 相應(yīng)的共定位（白色箭頭）。左圖：使用降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP，綠色）標(biāo)記肽能神經(jīng)元，并與 Alomone 的Anti-NaV1.7 (SCN9A) Antibody（#ASC-008）（紅色）共同標(biāo)記。合并圖像顯示了與 Nav1.7 共同標(biāo)記的含有 CGRP 的肽能神經(jīng)元（黃色）。中圖：使用Isolectin B4（IB4，綠色）標(biāo)記非肽能感覺神經(jīng)元，它與 Nav1.7（紅色）共標(biāo)記，并顯示在合并圖像中（黃色）。右圖：使用 NF200（綠色）標(biāo)記髓鞘神經(jīng)元，NF200 與 Nav1.7（紅色）共定位，合并圖像顯示其共定位（黃色）。圖片來自 Yang H, et al. Int J Mol Sci. 2022;23(23):14842

柑橘用于緩解疼痛

這項(xiàng)有趣的研究?jī)?yōu)雅地展示了柑橘中的一種黃酮類化合物--narirutin如何選擇性地抑制Nav1.7并下調(diào)其在某些感覺神經(jīng)元中的表達(dá)。要完全解釋這種天然化合物的鎮(zhèn)痛特性，還需要做更多的工作，但至少這項(xiàng)研究已經(jīng)確定了 narirutin 作為治療神經(jīng)病理性疼痛的一種潛在療法。