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微波在鱖魚糖化小白蛋白的特性、免疫反應(yīng)和胃消化特性研究的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):774 發(fā)布日期:2023-12-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
“西塞山前白鷺飛,桃花流水鱖魚肥。”自古以來,鱖魚由于口感鮮美、刺少、營養(yǎng)豐富而廣受歡迎[1]。然而,八大致敏食物之一的魚蛋白可引起IgE介導(dǎo)的過敏癥狀,如瘙癢、紅疹等[2],而92.5%的魚類過敏個體對小白蛋白有特異性IgE反應(yīng)[3]。美拉德反應(yīng),也稱為糖化,是蛋白質(zhì)和還原糖之間的非酶褐變反應(yīng)[4]。它在改變食品的顏色、風(fēng)味和營養(yǎng)價值等品質(zhì)方面具有不可思議的優(yōu)勢,在食品加工中發(fā)揮著重要作用[5]。最近,利用美拉德反應(yīng)來減少蛋白質(zhì)引起的食物過敏出現(xiàn)了明顯的趨勢,已被證明是一種很有前景的降低免疫反應(yīng)性的方法[6]。

微波烹飪因加熱快、操作方便,已成為日常烹飪的普遍選擇。因此,來自浙江工商大學(xué)食品科學(xué)與生物工程學(xué)院的張虹教授研究團(tuán)隊在Foods期刊上發(fā)表了題為Structural Property, Immunoreactivity and Gastric Digestion Characteristics of Glycated Parvalbumin from Mandarin Fish (Siniperca chuaisi) during Microwave-Assisted Maillard Reaction的文章,以鱖魚為研究對象,采用微波加熱法進(jìn)行美拉德反應(yīng),探討其小蛋白的脫敏性。通過正交試驗(yàn)確定了微波輔助美拉德反應(yīng)的最佳條件,然后采用Nano-LC-MS/MS分析了小白蛋白的糖化位點(diǎn)和衍生基團(tuán)(數(shù)據(jù)分析使用PEAKS Studio)。用間接競爭ELISA法研究了美拉德反應(yīng)修飾小白蛋白的結(jié)構(gòu)與其免疫反應(yīng)性之間的關(guān)系。最終得出結(jié)論,微波輔助美拉德反應(yīng)修飾了鱖魚小白蛋白的結(jié)構(gòu),降低了小白蛋白的免疫反應(yīng)性

首先,通過葡萄糖、麥芽糖和蔗糖分別在微波加熱與電磁爐加熱后的褐變指數(shù)發(fā)現(xiàn),葡萄糖褐變程度最高,且微波加熱的褐變指數(shù)值明顯高于電磁爐。接下來通過SDS-PAGE分析了不同條件下美拉德反應(yīng)對小白蛋白分子量的影響,發(fā)現(xiàn)葡萄糖在濃度1.5 mol/L并微波反應(yīng)15 min時,小白蛋白分子量增加最多,說明糖化程度最高(圖1b)。
圖1 糖化蛋白的SDS-PAGE(M:maltose,G:glucose,S:sucrose)

接下來,作者通過Nano-LC-MS/MS對小白蛋白的糖化位點(diǎn)進(jìn)行了鑒定,質(zhì)譜數(shù)據(jù)用PEAKS Studio進(jìn)行搜庫,設(shè)置的可變修飾包括:甲;[6]、羧甲基、羧乙基[7]丙酮醛、吡咯啉[8]、葡萄糖、麥芽糖[9]、精氨酸和賴氨酸[10]。結(jié)果得到兩個蛋白亞型:PV-I和PV-II(圖2),兩種異構(gòu)體均可引起過敏反應(yīng),但PV-I與IgG和IgE的結(jié)合能力強(qiáng)于PVII[32]。通過與酶切肽段的理論分子質(zhì)量比較,確定了5個潛在的糖化肽段和11個糖化位點(diǎn),這些區(qū)域包含已報道的過敏原結(jié)合表位(圖3)。因此推測,美拉德反應(yīng)導(dǎo)致的糖化可能破壞小白蛋白的保守結(jié)構(gòu)和預(yù)測的表位,進(jìn)而降低小白蛋白的免疫原性和過敏原性[11]。
圖2 兩個蛋白鑒定結(jié)果

圖3 已報道(紅色)和潛在的(灰色)抗原結(jié)合表位
 
最后,作者又通過ic-ELISA和體外胃液消化模擬實(shí)驗(yàn)評估了糖化反應(yīng)對小白蛋白免疫原性和線性結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果進(jìn)一步表明,微波輔助的美拉德反應(yīng)更能降低蛋白的免疫特性,并且更易消化(圖4)。

圖4 微波爐或電磁爐加熱(Heating組)對糖化小白蛋白的抑制作用對比(左),體外胃蛋白酶消化實(shí)驗(yàn)(右)
 

總之,本研究表明微波輔助的美拉德反應(yīng)可以改變鱖魚小白蛋白的結(jié)構(gòu),從而降低小白蛋白的免疫反應(yīng)性,為食品加工業(yè)或日常烹飪提供了一些參考信息

ps:看文獻(xiàn)還能漲廚藝,牛啊牛啊~下班回家的路上搞條小魚,蔥姜蒜料酒葡萄糖搞里頭,給它來個馬殺雞,然后微波15分鐘,美味的晚餐不就來了~方便快捷沒有油煙,打工人狂喜,沖鴨~

參考文獻(xiàn)

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4. Suri, K.; Singh, B.; Kaur, A. Impact of microwave roasting on physicochemical properties, maillard reaction products, antioxidant activity and oxidative stability of nigella seed (Nigella sativa L.) oil. Food Chem. 2022, 368, R713–R715.
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6. Suri, K.; Singh, B.; Kaur, A. Impact of microwave roasting on physicochemical properties, maillard reaction products, antioxidant activity and oxidative stability of nigella seed (Nigella sativa L.) oil. Food Chem. 2022, 368, R713–R715.
7. Scheijen, J.L.; Clevers, E.; Engelen, L.; Dagnelie, P.C.; Brouns, F.; Stehouwer, C.D.; Schalkwijk, C.G. Analysis of advanced glycation endproducts in selected food items by ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry: Presentation of a dietary AGE database. Food Chem. 2016, 190, 1145–1150. 
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10. Ajandouz, E.H.; Tchiakpe, L.S.; Dalle Ore, F. Effects of pH on Caramelization and Maillard Reaction Kinetics in Fructose-Lysine Model Systems. J. Food Sci. 2001, 66, 926–931.
11. Ajandouz, E.H.; Tchiakpe, L.S.; Dalle Ore, F. Effects of pH on Caramelization and Maillard Reaction Kinetics in Fructose-Lysine Model Systems. J. Food Sci. 2001, 66, 926–931.


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