培養(yǎng)細胞時,何時使用培養(yǎng)瓶,何時使用孔板培養(yǎng),取決于實驗目的和需要。一般情況下,原代細胞培養(yǎng)和常規(guī)傳代培養(yǎng)使用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實驗用細胞。
細胞培養(yǎng)瓶
TIPS:什么是TC處理?
TC處理表示該器皿經(jīng)過表面的改性處理,適合貼壁細胞的培養(yǎng)。而懸浮生長的細胞,就不一定需要這樣經(jīng)過特殊處理過的器皿。但經(jīng)過表面的改性處理后的細胞培養(yǎng)皿等一般也適合懸浮細胞的培養(yǎng)。
大部分動物細胞需要貼附在一個固相界面上才能生長。而只有親水的固相界面,細胞才能貼附。
最早的細胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的,不經(jīng)過特殊的處理,普通的細胞就可以貼附生長。而聚苯乙烯透光性能好,具有較好的強度和易塑性,并且沒有毒性,成為一次性細胞培養(yǎng)皿和細胞培養(yǎng)板等一次性細胞培養(yǎng)耗材的首選材料,然而聚苯乙烯表面是疏水的,所以需要經(jīng)過表面的改性處理,增強細胞吸附與蛋白結(jié)合的能力,變成親水后才能適用于細胞培養(yǎng)。
1 、如何選擇培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞
首先,根據(jù)期望獲得的細胞產(chǎn)量來選擇,培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數(shù)字就是表面積,25就是25平方厘米,如此類推;
細胞培養(yǎng)皿
2 、以細胞為載體或?qū)ο蟮膶嶒炇褂眉毎囵B(yǎng)板較好,如藥敏試驗、MTT(96孔培養(yǎng)板)、免疫組化(6孔培養(yǎng)板)等。
細胞培養(yǎng)板
選擇好合適的孔板后,在培養(yǎng)階段,有2點注意事項:
多孔板會帶板蓋,但其密封性不好,在培養(yǎng)箱內(nèi)會造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高,進而影響細胞生長速率。可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位,并采用添加培養(yǎng)基來代替。
NEST EDGE細胞培養(yǎng)板
EDGE細胞培養(yǎng)板周圍具有溝槽設計,通過改變原有96孔板的結(jié)構(gòu),在最外側(cè)孔的外側(cè)設計了不同寬度及厚度的槽形結(jié)構(gòu),因此達到最大程度消除邊緣效應的目的,同時又保證了細胞培養(yǎng)的最佳狀態(tài)。提高了培養(yǎng)板的溫度穩(wěn)定性和均衡的濕度環(huán)境,從而減 少或消除了邊緣效應,保證了細胞生長的均一性。
當細胞種入孔內(nèi)以后,不應該再進行過多的震動,例如晃動、抖動培養(yǎng)板,而應該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。
如果培養(yǎng)箱由多人共用,還應該考慮頻繁開關(guān)箱門、拿放孔板造成的震動,這些不利因素都應該盡量減少。