細(xì)胞培養(yǎng)基瓶頂式除菌過(guò)濾原理、用途和使用方法
培養(yǎng)基除菌過(guò)濾裝置是在生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室中被廣泛使用的一款基礎(chǔ)設(shè)備。其主要作用是對(duì)配置的培養(yǎng)基進(jìn)行除菌和除雜質(zhì)的過(guò)濾，以便后續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)。下面我們以Sciencetool圣斯特品牌一款R300-500型號(hào)為例，來(lái)說(shuō)明該儀器的結(jié)構(gòu)組成、工作原理和具體使用方法。
培養(yǎng)基除菌過(guò)濾裝置R300-500構(gòu)造和組件主要包括以下部分：1臺(tái)產(chǎn)生負(fù)壓吸力的無(wú)油真空抽濾泵；1組帶有真空表的真空調(diào)節(jié)閥，可以用觀察過(guò)濾系統(tǒng)內(nèi)的工作狀態(tài)，并根據(jù)實(shí)際需要調(diào)節(jié)吸力和過(guò)濾速度；內(nèi)置阻塵濾芯的緩沖杯，可以阻擋倒吸的液體和異物直接抽入真空泵內(nèi)，防止進(jìn)水和異物造成的意外損壞；1組瓶頂式的真空過(guò)濾瓶，該過(guò)濾瓶由濾杯、過(guò)濾連接座和藍(lán)蓋試劑瓶組成，濾杯盛放待過(guò)濾的培養(yǎng)基，濾膜鋪放在過(guò)濾連接座上方的濾膜支撐片上，連接座下部的GL45螺紋可以和藍(lán)蓋試劑瓶連接；另有一個(gè)帶有防倒吸進(jìn)液阻水保護(hù)器的泵管用于連接過(guò)濾瓶和抽濾泵。
具體的過(guò)濾原理如下：在過(guò)濾前，用戶將過(guò)濾膜裝入濾瓶組內(nèi)，并進(jìn)行高溫高壓濕熱滅菌（一般建議121度30分鐘）。隨后在生物安全柜或者超凈工作臺(tái)內(nèi)取出瓶組。液體倒入過(guò)濾杯后打開(kāi)抽濾泵。抽濾泵將藍(lán)蓋試劑瓶?jī)?nèi)空氣抽走，使得濾器內(nèi)外形成壓力差，外部大氣壓便可推動(dòng)培養(yǎng)基通過(guò)濾膜。細(xì)菌、微生物、雜質(zhì)等需要被去除的物質(zhì)被截留在濾膜的表面，從而達(dá)到過(guò)濾效果。通過(guò)濾膜的培養(yǎng)基流入試劑瓶?jī)?nèi)被保存。
具體的使用方法主要有以下這些步驟：
1．根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求預(yù)先清洗好過(guò)濾瓶，如有滅菌要求，除抽濾泵外，過(guò)濾瓶組和泵管套件，都可以進(jìn)行121高溫高壓滅菌30分鐘。滅菌時(shí)請(qǐng)將過(guò)濾膜預(yù)先裝好在過(guò)濾漏斗內(nèi)。
2．根據(jù)圖示，將濾膜平整的鋪放在黑色濾膜支撐片上，本型號(hào)需要使用直徑φ47或50mm的濾膜（材質(zhì)不限，孔徑不限）；濾膜鋪好后，將濾杯輕輕放在濾膜表面，并順時(shí)針旋轉(zhuǎn)卡緊濾杯。
3．滅菌后務(wù)必烘干，烘干溫度不要超過(guò)60度，且烘干時(shí)間建議在30分鐘內(nèi)，烘干后后盡快拿出，不要長(zhǎng)時(shí)間保存在烘箱內(nèi)，會(huì)造成塑料件變形。
4．將試劑瓶放置在水平臺(tái)面上。
5．將過(guò)濾連接座擰在試劑瓶螺紋口上，感覺(jué)有阻力即可，不要完全擰死容易造成螺紋的滑絲
6．使用帶阻水保護(hù)器的泵管連接抽濾泵和過(guò)濾瓶組，阻水保護(hù)器一側(cè)印有“此面朝泵”，請(qǐng)按照文字示意將該面朝向抽濾泵。
7．將濾液倒入濾杯內(nèi)，準(zhǔn)備開(kāi)始過(guò)濾。
接通電源，打開(kāi)真空泵上面的電源開(kāi)關(guān)，真空泵啟動(dòng)。
8．過(guò)濾過(guò)程中，可通過(guò)真空調(diào)節(jié)閥來(lái)調(diào)節(jié)吸力和抽濾速度，調(diào)節(jié)閥左右旋轉(zhuǎn)即可。
9．工作結(jié)束后，先使用調(diào)節(jié)閥泄壓，然后再關(guān)機(jī)，這樣可以避免氣壓拍打?yàn)V液表面濺入泵管內(nèi)。
10．當(dāng)感覺(jué)設(shè)備缺乏吸力、抽濾速度過(guò)慢、徹底無(wú)法抽吸，或有時(shí)可以吸有時(shí)又無(wú)法吸時(shí)（這是由于倒吸的液體可能在環(huán)境因素影響下蒸發(fā)掉一部分），一般是濾器被倒吸的液體堵塞，需要及時(shí)更換。此時(shí)可以先判斷是否是過(guò)濾堵塞，如果連接過(guò)濾瓶時(shí)，或者拔掉真空泵的泵管用手堵住泵管接口，真空泵仍有壓力（指針不低于600mmHg），表示主機(jī)正常工作無(wú)故障，為阻水保護(hù)器堵塞，需要及時(shí)更換。
具體的過(guò)濾原理如下：在過(guò)濾前，用戶將過(guò)濾膜裝入濾瓶組內(nèi)，并進(jìn)行高溫高壓濕熱滅菌（一般建議121度30分鐘）。隨后在生物安全柜或者超凈工作臺(tái)內(nèi)取出瓶組。液體倒入過(guò)濾杯后打開(kāi)抽濾泵。抽濾泵將藍(lán)蓋試劑瓶?jī)?nèi)空氣抽走，使得濾器內(nèi)外形成壓力差，外部大氣壓便可推動(dòng)培養(yǎng)基通過(guò)濾膜。細(xì)菌、微生物、雜質(zhì)等需要被去除的物質(zhì)被截留在濾膜的表面，從而達(dá)到過(guò)濾效果。通過(guò)濾膜的培養(yǎng)基流入試劑瓶?jī)?nèi)被保存。
具體的使用方法主要有以下這些步驟：
2．根據(jù)圖示，將濾膜平整的鋪放在黑色濾膜支撐片上，本型號(hào)需要使用直徑φ47或50mm的濾膜（材質(zhì)不限，孔徑不限）；濾膜鋪好后，將濾杯輕輕放在濾膜表面，并順時(shí)針旋轉(zhuǎn)卡緊濾杯。
3．滅菌后務(wù)必烘干，烘干溫度不要超過(guò)60度，且烘干時(shí)間建議在30分鐘內(nèi)，烘干后后盡快拿出，不要長(zhǎng)時(shí)間保存在烘箱內(nèi)，會(huì)造成塑料件變形。
4．將試劑瓶放置在水平臺(tái)面上。
5．將過(guò)濾連接座擰在試劑瓶螺紋口上，感覺(jué)有阻力即可，不要完全擰死容易造成螺紋的滑絲
6．使用帶阻水保護(hù)器的泵管連接抽濾泵和過(guò)濾瓶組，阻水保護(hù)器一側(cè)印有“此面朝泵”，請(qǐng)按照文字示意將該面朝向抽濾泵。
7．將濾液倒入濾杯內(nèi)，準(zhǔn)備開(kāi)始過(guò)濾。
接通電源，打開(kāi)真空泵上面的電源開(kāi)關(guān)，真空泵啟動(dòng)。
8．過(guò)濾過(guò)程中，可通過(guò)真空調(diào)節(jié)閥來(lái)調(diào)節(jié)吸力和抽濾速度，調(diào)節(jié)閥左右旋轉(zhuǎn)即可。
9．工作結(jié)束后，先使用調(diào)節(jié)閥泄壓，然后再關(guān)機(jī)，這樣可以避免氣壓拍打?yàn)V液表面濺入泵管內(nèi)。
10．當(dāng)感覺(jué)設(shè)備缺乏吸力、抽濾速度過(guò)慢、徹底無(wú)法抽吸，或有時(shí)可以吸有時(shí)又無(wú)法吸時(shí)（這是由于倒吸的液體可能在環(huán)境因素影響下蒸發(fā)掉一部分），一般是濾器被倒吸的液體堵塞，需要及時(shí)更換。此時(shí)可以先判斷是否是過(guò)濾堵塞，如果連接過(guò)濾瓶時(shí)，或者拔掉真空泵的泵管用手堵住泵管接口，真空泵仍有壓力（指針不低于600mmHg），表示主機(jī)正常工作無(wú)故障，為阻水保護(hù)器堵塞，需要及時(shí)更換。
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