高架十字迷宮實驗原理及實驗操作介紹
瀏覽次數(shù):523 發(fā)布日期:2024-4-18
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一、實驗原理
高架十字迷宮實驗是評價嚙齒類動物焦慮反應的實驗方法 , 相較傷害性刺激所致小鼠焦慮行為檢測(如電刺激 、 噪聲刺激 、 飲食剝奪等), 該實驗具有操作簡單的優(yōu)點 , 能直觀反映小鼠的條件應答 。EPM實驗由開臂和閉臂各兩條組成 , 呈十字形交叉 , 交接部分為中央?yún)^(qū) , 距地面有一定高度 。其原理是由于面對新事物開臂小鼠會產(chǎn)生好奇心去探究 , 而它們有嗜暗的天性(閉臂), 兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為,產(chǎn)生焦慮心理。
二、實驗步驟
①實驗之前,一定要確保高架十字迷宮整個裝置的清潔。實驗動物提前運送到行為學實驗室專用臨時籠架 ,適應環(huán)境至少3H左右, 減少動物緊張。
②將實驗動物從飼養(yǎng)籠中取出,實驗動物盡量背向實驗員,將動物輕輕放在儀器宮體的中央?yún)^(qū)域,動物面向開臂,然后實驗員迅速安靜的離開;
③打開SuperMaze或者VisuTrack動物行為分析軟件,跟蹤動物在高架十字迷宮儀器內(nèi)的軌跡運動,自動計算指標,通常實驗時長為5min;
④實驗結束后,取出實驗動物,放入飼養(yǎng)籠,做好實驗完成動物的標記信息,同時,用酒精和紙巾清潔迷宮。
三、實驗指標
①進入開放臂次數(shù):進入到任一開放臂的次數(shù),以動物的四肢均進入臂內(nèi)為準或者以動物身體80%進入臂內(nèi)為準。
②開臂活動:動物四肢全部進入或者身體80%進入開臂內(nèi)的持續(xù)時間。
③進入閉臂次數(shù):進入到任一閉臂的次數(shù),以動物的四肢均進入臂內(nèi)為準或者以動物身體80%進入臂內(nèi)為準。
④閉臂活動:動物四肢全部進入或者身體80%進入閉臂內(nèi)的持續(xù)時間。
⑤閉臂后腿直立次數(shù):也叫閉臂支撐性站立,動物在閉臂前腿抬起以后腿支持身體直立的次數(shù)。
⑥中央?yún)^(qū)域活動:中央?yún)^(qū)域指的是開臂和閉臂鏈接交叉的區(qū)域,實驗動物在這個區(qū)域內(nèi)的活動路程和滯留時間。
四、注意事項
①實驗開始時, 實驗者需要手持小鼠使其背對實驗者放置在開臂與閉臂的接合處, 且讓小鼠面對開臂若面對閉臂, 實驗結果將受很大影響。
②其他一些可能影響實驗結果的事項包括小鼠的年齡、性別、營養(yǎng)及健康狀態(tài)需基本保持一致。
③迷宮宮體距離地面的高度不宜過高或者過低,根據(jù)實驗動物的大小確定。
④可以選擇一些白色或者黑色的吸水紙鋪在迷宮底部,對于實驗效率以及除味效果上面,更加合適。
⑤務必提前至少3小時,將實驗動物放在實驗室適應,減少動物對新環(huán)境的不安情緒。