蛋白指紋圖譜臨床應(yīng)用的指導(dǎo)原則

 

臨床上有腫瘤家族史或癥象可疑者，特別是至少出現(xiàn)下述癥狀之一者都應(yīng)立即進(jìn)行蛋白指紋圖譜檢測，以期盡早發(fā)現(xiàn)癌癥。

☆ 原因不明的疼痛及體重減輕；

☆ 傷口長期不愈；

☆ 疣或黑痣發(fā)生明顯變化；

☆ 持續(xù)性消化不良、便血、血尿；

☆ 持續(xù)性嘶啞、干咳及吞咽困難；

☆ 月經(jīng)期異常大出血、月經(jīng)期外或絕經(jīng)后出血；

☆ 耳、鼻分泌物帶血、視覺障礙、聽力下降、常出現(xiàn)耳鳴現(xiàn)象；

☆ 出現(xiàn)腫塊或可觸及的硬結(jié)、硬變；

☆ 肝硬化患者；

☆ 疑有胚胎細(xì)胞腫瘤；

☆ 男性大于50歲的前列腺腺瘤患者；

☆ 疑有甲狀腺髓質(zhì)癌或家族中出現(xiàn)過這類癌癥的患者。

對于蛋白指紋圖譜初次檢測結(jié)果陽性而未見任何異常的體檢對象，建議每隔三至六周復(fù)檢一次。

若復(fù)檢結(jié)果呈陰性，自然排除腫瘤的可能（可能是良性疾病的一過性升高）。

若連續(xù)三次呈持續(xù)陽性，應(yīng)引起高度重視，詳細(xì)詢問病史和進(jìn)行體格檢查，并結(jié)合定位蛋白指紋圖譜測定及各種影像學(xué)檢查，以便進(jìn)行腫瘤定位。

持續(xù)陽性而一時(shí)查不出陽性體征者，應(yīng)繼續(xù)跟蹤作定期復(fù)檢。還可結(jié)合受檢者腫瘤家族史和當(dāng)?shù)匕┳V特點(diǎn)進(jìn)行相關(guān)檢查，并適當(dāng)進(jìn)行預(yù)防性阻斷干預(yù)。

 

蛋白指紋圖譜對于判斷腫瘤治療（化療，放療和手術(shù)治療）效果具有重要意義。

蛋白指紋圖譜指標(biāo)術(shù)前升高而于術(shù)后下降，是一個(gè)重要的預(yù)后指標(biāo)；指標(biāo)不下降或下降很少預(yù)示著腫瘤切除不完全或存在多發(fā)性腫瘤。如果治療完成后，盡管外科醫(yī)生和病理學(xué)家認(rèn)為治療是R0切除或是影像檢查也未發(fā)現(xiàn)殘余的腫瘤，只要蛋白指紋圖譜的指標(biāo)未下降到健康對照組的參考水平范圍內(nèi)，就預(yù)示治療無效 。

蛋白指紋圖譜在腫瘤治療后經(jīng)過一段時(shí)期一直處于正常水平，表明腫瘤已痊愈。蛋白指紋圖譜在腫瘤治療后恢復(fù)到正常水平后又再度升高，可能預(yù)示腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。蛋白指紋圖譜在腫瘤治療后仍處于高水平或繼續(xù)升高，則表明治療效果不佳 。

治療監(jiān)測期間，對蛋白指紋圖譜的首次檢測與復(fù)查間隔時(shí)間的設(shè)置應(yīng)根據(jù)不同蛋白指紋圖譜的生物半衰期。例如,參照首次治療前水平可估計(jì)何時(shí)復(fù)查，以了解治療是否見效。因此，復(fù)查間隔時(shí)間不宜太短，否則將可能誤解為腫瘤未完全切除；但如果復(fù)查間隔太長，臨床將無法區(qū)分是腫瘤復(fù)發(fā)還是初次治療療效不佳。

 

蛋白指紋圖譜測定是外科手術(shù)切除后重要的非侵入性的監(jiān)測指標(biāo)。若手術(shù)后蛋白指紋圖譜正常，而腫瘤復(fù)發(fā)后有所增高，則增高的速度高度預(yù)示腫瘤的進(jìn)展情況。

蛋白指紋圖譜指標(biāo)的升高速度經(jīng)常被用于評估腫瘤發(fā)展或轉(zhuǎn)移情況。臨床上應(yīng)基于蛋白指紋圖譜指標(biāo)的變化， 制定進(jìn)一步詳細(xì)檢查的時(shí)間。如果蛋白指紋圖譜的指標(biāo)維持在低水平或正常范圍內(nèi)，沒必要進(jìn)行其他非侵入性或昂貴的檢查，但如果蛋白指紋圖譜指標(biāo)升高，則有必要進(jìn)行上述檢查。對50%的病例來說，準(zhǔn)確測定的蛋白指紋圖譜的指標(biāo)將比其他檢查至少早10個(gè)月預(yù)示腫瘤的進(jìn)展。

臨床上對腫瘤的治療監(jiān)測可通過建立一個(gè)監(jiān)測日程表來觀察各種標(biāo)志物的動(dòng)態(tài)變化，從而為一段時(shí)間內(nèi)腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)提供診斷依據(jù)。這不僅有利于治療，也很大程度上改善了預(yù)后。由于對治療方案的從優(yōu)選擇，使胚胎細(xì)胞腫瘤、卵巢癌和多發(fā)性骨髓瘤患者受益匪淺。

在治療前蛋白指紋圖譜為陰性的腫瘤患者中，有可能存在蛋白指紋圖譜的抗原表達(dá)，因此推薦定時(shí)監(jiān)測蛋白指紋圖譜，從而觀察疾病的進(jìn)一步進(jìn)展。

在腫瘤監(jiān)測期間，標(biāo)志物檢測的頻率取決于腫瘤的特性、所推薦的監(jiān)測計(jì)劃以及蛋白指紋圖譜的指標(biāo)或腫瘤活動(dòng)的可能變化。

在惡性腫瘤的治療和病程的監(jiān)測過程中，建議檢測兩種或多種蛋白指紋圖譜，以提高臨床敏感度。

 

對治療后的癌癥患者，應(yīng)用蛋白指紋圖譜檢測，可監(jiān)控癌癥的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，檢測的時(shí)間可參照關(guān)于蛋白指紋圖譜隨訪的推薦方案：

術(shù)后或放、化療結(jié)束后第6周開始第1次復(fù)查；

3年間每3個(gè)月一次；3到5年間每半年1次；

5到7年間每年1次；

7年后可停止復(fù)查；

期間如發(fā)現(xiàn)升高，1月內(nèi)再復(fù)檢1次，二次升高確證癌癥復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，約比臨床早3到13個(gè)月。及時(shí)追加治療，將有效延長病人生命。

 

治療前測定1-2次；

治療后第1次測定應(yīng)在治療后的2~14天內(nèi)；

治療后第1年和第2年，開始時(shí)每月1次，待蛋白指紋圖譜顯著降低后每3月1次；

治療后第3年到第5年，每年測定2次或每年1次；

治療后第6年起，每年測定1次。

 

某些非腫瘤的良性疾病的某些蛋白指紋圖譜指標(biāo)也會(huì)出現(xiàn)升高，如部分急性炎癥：肝炎、結(jié)核；部分自身免疫性疾�。杭t斑狼瘡、類風(fēng)濕等；

蛋白指紋圖譜指標(biāo)在動(dòng)態(tài)觀察中一些良性、一過性升高者則會(huì)隨病情好轉(zhuǎn)而降至正常。相反，是腫瘤者不會(huì)下降或反而升高。這實(shí)際上是個(gè)逐步集中的過程。

鑒于我國國情，建議初次發(fā)現(xiàn)蛋白指紋圖譜檢測陽性者，每六周復(fù)查一次，若連續(xù)二次即十二周（三個(gè)月）保持陽性，應(yīng)進(jìn)行腫瘤的定位檢查。

隨訪辦法：至少在三個(gè)月內(nèi)蛋白指紋圖譜指標(biāo)已下降的病員，可自然排除腫瘤。

 

至今還未發(fā)現(xiàn)理想的、具有100％靈敏度和100％特異性的腫瘤標(biāo)志。因?yàn)槟[瘤標(biāo)志不僅在發(fā)生癌變時(shí)產(chǎn)生，在正常的和良性情況下也有不同程度表達(dá)；腫瘤標(biāo)志的產(chǎn)生還受到機(jī)體一些生物活性因子的影響；血標(biāo)本的采集，儲存不當(dāng)也會(huì)影響腫瘤標(biāo)志測定的結(jié)果。因此，在腫瘤標(biāo)志檢測中要注意假陽性和假陰性的問題。

若從采血到血清分離的間隔時(shí)間﹥60min， 蛋白指紋圖譜指標(biāo)會(huì)從血小板中釋放而增高；

若皮膚接觸血樣本試管內(nèi)壁可使蛋白指紋圖譜指標(biāo)升高；

若樣本被唾液污染，將使蛋白指紋圖譜指標(biāo)升高；

溶血可引起紅細(xì)胞釋放，而使蛋白指紋圖譜指標(biāo)升高；

黃疸血樣本，會(huì)引起蛋白指紋圖譜的指標(biāo)升高；

治療藥物，如高指標(biāo)的二價(jià)或三價(jià)金屬離子、嘌呤類、吲哚和胍類（硝酸異山梨酯，鹽酸維拉帕米）、維生素C、順鉑（抗腫瘤藥）、絲裂霉素（抗腫瘤抗生素）、雌二醇、表柔比星（抗生素類藥），這些藥物可引起蛋白指紋圖譜水平的假性上升；

接受鼠免疫球蛋白作為免疫閃爍顯像診斷或免疫治療的患者體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生人抗鼠免疫球蛋白抗體（HAMA）。這些嗜異性抗免疫球蛋白抗體也可出現(xiàn)于接受所謂的新鮮細(xì)胞治療的患者體內(nèi)，從而使蛋白指紋圖譜的水平假性升高。

年齡對蛋白指紋圖譜的指標(biāo)有顯著影響，一項(xiàng)研究報(bào)道，通過檢測66~99歲健康個(gè)體的蛋白指紋圖譜指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)至少10%的個(gè)體有一種蛋白指紋圖譜指標(biāo)出現(xiàn)升高。

– 有些良性疾病，如炎癥疾病會(huì)使一些腫瘤標(biāo)志表達(dá)增加；

– 有一些生理變化，如妊娠時(shí)和月經(jīng)；

– 在腫瘤手術(shù)治療、化療和放療過程中，由于腫瘤組織受到破壞或腫瘤壞死時(shí)某種腫瘤標(biāo)志物的產(chǎn)生增加，從而影響蛋白指紋圖譜的測定，造成假陽性；

– 某些治療藥物影響；

– 標(biāo)本采集或處理不當(dāng)，如：溶血、黃疸等。

– 產(chǎn)生腫瘤標(biāo)志的腫瘤細(xì)胞數(shù)目少；

– 細(xì)胞或數(shù)目表面被封閉；

– 機(jī)體體液中一些抗體與蛋白指紋圖譜（腫瘤抗原）形成免疫復(fù)合物；

– 腫瘤組織本身血循環(huán)差，其所產(chǎn)生蛋白指紋圖譜不能分泌到外周血 。

 

案例1

國際著名醫(yī)學(xué)雜志《柳葉刀》：蛋白指紋圖譜（SELDI）以前所未有的精確度來診斷卵巢癌

從手指取少量，應(yīng)用目前全球最先進(jìn)的蛋白指紋圖譜SELDI蛋白質(zhì)芯片，在30分鐘之內(nèi)就可以知道是否患有。國際著名醫(yī)學(xué)雜志《柳葉刀》發(fā)表了美國FDA和國立癌癥研究所(NCI)的這一研究結(jié)果。專家指出，通過相關(guān)蛋白質(zhì)芯片系統(tǒng)技術(shù)，可以使早期卵巢癌的診斷準(zhǔn)確率達(dá)到95%，陽性預(yù)測率達(dá)到94%。這表明，卵巢癌等惡性腫瘤細(xì)胞在形成的初期就有可能被識別出來。

據(jù)統(tǒng)計(jì)，約有80%的卵巢癌病人被發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬中晚期，目前普遍使用的診斷方法，即相關(guān)腫瘤抗原檢測加上超聲檢查等對于卵巢癌的陽性預(yù)測值只有20%左右。

目前診斷卵巢癌最知名的生物標(biāo)記--腫瘤抗原125（CAI25）具有局限性。卵巢癌往 往是在晚期和轉(zhuǎn)移后才被發(fā)現(xiàn)。在晚期的卵巢癌中，80％的CA125水平不正常，然而，這一點(diǎn)在臨床上應(yīng)用價(jià)值有限，因?yàn)橥砥诘穆殉舶┲委熍R床療效不好。五年存活率只有35％。醫(yī)生需要的是在卵巢癌的早期當(dāng)癌細(xì)胞局限于卵巢時(shí)能給予他們提示的生物標(biāo)記，這時(shí)候，手術(shù)就能治愈90%的患者。然而，不幸的是，只有60％的早期卵巢癌的CA125的水平是異常的。

    與此形成對比的是，在116份血清樣本的試驗(yàn)組中，蛋白指紋圖譜發(fā)現(xiàn)的五種蛋白模式正確地確認(rèn)了所有的18個(gè)Ⅰ期卵巢癌，預(yù)測出了樣品中所有的卵巢癌病例，惡性組包括了卵染上皮癌的所有亞型。唯一遺憾的是，它所預(yù)測出的66個(gè)病例中有3個(gè)患者是非惡性的，非惡性組包括了可能的假陽性，良性機(jī)能紊亂，例如子宮肌瘤和子宮內(nèi)膜異位癥�？偟膩碚f，蛋白指紋圖預(yù)測成功率是94％（50／53），而CA125只有35%。

 卵巢癌指紋發(fā)現(xiàn)的不僅僅是血清中的五種蛋白，而且顯示了它們之間成比例的數(shù)量關(guān)系。蛋白指紋圖譜根據(jù)分子量和電荷來分離蛋白質(zhì)。蛋白指紋圖譜的結(jié)果分析顯示了血樣本中大約有15200種血清蛋白和多肽。峰的高度顯示了血清中蛋白的相應(yīng)豐度。如果已知需檢測的蛋白SELDI分析一個(gè)血清樣本的指紋圖只需30分鐘。所以，對于通過血清中的蛋白模式來確定是否有卵巢癌，蛋白指紋圖譜的速度和成本效率是非常理想的。

Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer

Lancet, 2002, 359(9306)：572-577．

 

案例2

美國腫瘤權(quán)威雜志《癌癥研究》：蛋白指紋圖譜（SELDI）可以檢測出前列腺癌5年前形成的蛋白指紋

前列腺癌（Prostate cancer,PCa）是常見的男性泌尿系腫瘤之一，早期診斷與治療是降低患者死亡率、延長生存時(shí)間最有效的方法。在PCa的發(fā)生過程中，細(xì)胞惡變前后所表達(dá)的蛋白質(zhì)譜發(fā)生了變化。

利用蛋白指紋圖譜對以病理確診的45例前列腺癌和45例良性前列腺增生患者血清檢測，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測血清PSA，對所得差異蛋白聯(lián)合PSA進(jìn)行分析。結(jié)果在前列腺癌和良性前列腺增生患者血清中檢測到9個(gè)差異蛋白（P〈0．01），前列腺癌患者差異蛋白7個(gè)高表達(dá)，2個(gè)低表達(dá)。聯(lián)合相對分子質(zhì)量3771．14和4481．59兩個(gè)差異蛋白診斷前列腺癌，其敏感性為96.39％，特異性為92.63％。3771．14蛋白與血清PSA診斷前列腺癌具有很強(qiáng)的互補(bǔ)性。通過蛋白指紋圖譜技術(shù)可以篩選出前列腺癌的特異性標(biāo)志蛋白。多個(gè)差異蛋白聯(lián)合檢測可以提高前列腺癌診斷的敏感性和特異性，聯(lián)合3771．14蛋白與血清PSA可以更好地早期診斷前列腺癌。

通過檢測患者5年前的血清，發(fā)現(xiàn)3771.14蛋白在前列腺癌患者細(xì)胞惡變前就已經(jīng)出現(xiàn)了表達(dá)。通過蛋白指紋圖譜技術(shù)可以檢測出前列腺癌5-10年前形成的蛋白指紋，比CT及核磁成像更能準(zhǔn)確而且早期診斷腫瘤，并為早期治愈腫瘤提供了可能。

Serum Protein Fingerprinting Coupled with a Pattern-matching Algorithm Distinguishes Prostate Cancer from Benign Prostate Hyperplasia and Healthy Men

Cancer Resraech,2002,62:3609-3614

 

案例3

英國著名雜志《Nature》:蛋白指紋圖譜（SELDI）繪制“癌癥指紋(cancer signature)”

人類基因組序列草圖完成后，生命科學(xué)進(jìn)入了“后基因組時(shí)代”,研究的重點(diǎn)轉(zhuǎn)向了對復(fù)雜的蛋白質(zhì)功能的研究。蛋白質(zhì)是基因表達(dá)的最終產(chǎn)物，器官組織的生理狀態(tài)變化會(huì)引起血清蛋白質(zhì)組的改變，因此對蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行研究可以直接獲取疾病的特征性標(biāo)志。

由于人血清是一個(gè)蛋白質(zhì)相當(dāng)豐富并不斷變化的系統(tǒng)，單一的血清腫瘤標(biāo)記物難以真正反溯到相關(guān)的細(xì)胞組織，而發(fā)現(xiàn)一組與特定組織癌變相關(guān)的血清蛋白質(zhì)(多參數(shù)標(biāo)記物)則是更有效的途徑，這也就是所謂的“癌癥指紋(cancer signature)”。

而高通量的蛋白指紋圖譜--表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)（surface enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS）質(zhì)譜技術(shù)的出現(xiàn)使得繪制“癌癥指紋”變成了現(xiàn)實(shí)。目前利用SELDI技術(shù)發(fā)現(xiàn)腫瘤的特殊生物學(xué)標(biāo)記，對于腫瘤的早期診斷具有獨(dú)特的優(yōu)勢和重要的意義，在多種腫瘤的臨床應(yīng)用中顯示出非常顯著的效果。

Proteomics delivers on promise of cancer biomarkers

Nature Med, 2003, 9(8)：980．

 

案例4

美國著名雜志的《Science》：蛋白指紋圖譜發(fā)現(xiàn)艾滋病蛋白抑制劑

科學(xué)家16年前就發(fā)現(xiàn)，非洲有2％～3％的人感染HIV后不會(huì)發(fā)展為艾滋病，但是什么物質(zhì)阻止了HIV在體內(nèi)的復(fù)制一直不得而知。著名艾滋病雞尾酒療法創(chuàng)立者何大一教授借助蛋白指紋圖譜SELDI技術(shù)，通過比較來自艾滋病患者、感染HIV但長期存活者和正常人的CD8 T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)上清液，發(fā)現(xiàn)在免疫系統(tǒng)維持于相對正常水平的HIV感染的長期存活者中，存在一組蛋白質(zhì)(分別為防御素1、a-防御素2和防御素3)水平的特異性升高。證明用特異性抗體將防御素從培養(yǎng)液中去除，能有效抑制人類免疫缺陷病毒(HIV)的增殖。Defensin1、2、3三種蛋白對艾滋病有抑制作用，這是常人體內(nèi)沒有的蛋白質(zhì)。并成功研制出艾滋病蛋白抑制劑。此外，蛋白指紋圖譜技術(shù)參加了2003年抗擊非典的斗爭，短短數(shù)月即發(fā)現(xiàn)了SARS 感染病人的血清蛋白指紋圖譜，應(yīng)用SARS病人特異的四個(gè)蛋白指紋譜峰建立了SARS早期診斷模型。該成果于2004年通過了北京市科委科學(xué)成果鑒定，并申請了中國和美國專利。該項(xiàng)研究的文章發(fā)表在2005年1月的《Clinical Chemistry》雜志上。

Contribution of Human _-Defensin 1,2, and 3 to the Anti–HIV-1 Activity

of CD8 Antiviral Factor

Science ，2002 ，298:995–1000

Proteomic Fingerprints for Potential Application to Early Diagnosis of Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS)

Clinical Chemistry,2005,51,1: 56–64

 

案例5

北京協(xié)和醫(yī)院：蛋白指紋圖譜早期診斷腎癌

早期腎癌（RCC）常無明顯癥狀，且無臨床實(shí)用的腫瘤標(biāo)記物，常延誤診斷。中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)北京協(xié)和醫(yī)院泌尿外科李漢忠主任指導(dǎo)下在對66名RCC患者進(jìn)行了蛋白指紋圖譜檢測，共有7個(gè)蛋白存在明顯差異，分子質(zhì)量分別為3190、3931、4040、4100、4131、4295和5473（p<0.01），診斷的敏感性為88%，特異性為91%。當(dāng)患者血清內(nèi)蛋白3190強(qiáng)度高于12.487或蛋白3931強(qiáng)度高于3.872時(shí)，則可明確診斷出I期腎癌患者，做到早期診斷。這兩個(gè)蛋白為平滑肌蛋白和碳酸酐酶-I。

血清蛋白指紋圖譜在腎癌診斷中的應(yīng)用

中華泌尿外科雜志，2006,27（8）：527-529

 

案例6

武漢同濟(jì)醫(yī)院：蛋白指紋圖譜監(jiān)測腎移植排斥反應(yīng)

腎移植排斥反應(yīng)目前主要依靠腎活檢。但這種創(chuàng)傷性檢查有一定的危險(xiǎn)性和應(yīng)用的局限性�，F(xiàn)在，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院移植研究所周平主任用蛋白指紋圖譜技術(shù)對腎移植患者進(jìn)行尿液檢測，可無創(chuàng)性、24 h不問斷地監(jiān)測病情變化，鑒定 急性，腎移植排斥反應(yīng)，其準(zhǔn)確率高達(dá)91％~94％。這對腎移植后免疫抑制劑用量的調(diào)整、并發(fā)癥與療效判斷有重大意義，也將對其他移植(肝、心)技術(shù)的精密組織配型、療效判斷、并發(fā)癥等提供重要臨床參考。

 

案例7

《健康報(bào)》“蛋白指紋圖譜技術(shù)”：更早發(fā)現(xiàn)腫瘤

蛋白指紋圖譜技術(shù)是隨著蛋白質(zhì)組學(xué)興起出現(xiàn)的一種技術(shù)，一經(jīng)推出便成為醫(yī)學(xué)界的熱點(diǎn)，該技術(shù)能直接檢出過去無法測定的大量低豐度蛋白，大大提高蛋白質(zhì)檢出率，是診斷學(xué)歷史上繼酶學(xué)方法、免疫方法后的第三個(gè)新平臺，給目前醫(yī)學(xué)診斷學(xué)帶來了革命性變化。蛋白質(zhì)指紋圖譜適用于各種疾病特異性蛋白指紋的識別與判斷，具有快速、簡便、準(zhǔn)確及特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。據(jù)權(quán)威報(bào)道，利用蛋白指紋圖診斷多種腫瘤敏感性和特異性均超過80%，大大優(yōu)于目前臨床常用的腫瘤標(biāo)志，該技術(shù)比CT、核磁更早發(fā)現(xiàn)腫瘤，從而使腫瘤的早期診斷、治療成為可能。據(jù)悉，蛋白指紋圖譜已在國內(nèi)15至20家著名機(jī)構(gòu)聯(lián)合建立了中國所有腫瘤的蛋白指紋庫。

 

 

案例8

《哈爾濱日報(bào)》準(zhǔn)確檢測癌癥只需一滴血

本報(bào)訊（記者 吳天飛）通過繪制檢查者的蛋白質(zhì)指紋圖譜，即可獲知其患有何種癌癥。 
    據(jù)該哈醫(yī)大腫瘤防治研究所杜杰介紹，CT、MR等影像學(xué)檢測為癌癥檢測首代技術(shù)，需患者腫瘤發(fā)展到一定程度方可確診；血清免疫蛋白質(zhì)檢測為第二代技術(shù)，在癌癥初期可發(fā)現(xiàn)，但確定何種癌癥仍需影像技術(shù)輔助，且準(zhǔn)確率僅為35%。蛋白質(zhì)指紋圖譜檢測為新一代技術(shù)，它通過儀器采集檢查者的一滴血，提取其血清蛋白繪制指紋圖譜，如圖譜在某一區(qū)域出現(xiàn)峰值，則表明檢查者相對應(yīng)的器官癌變。該方法準(zhǔn)確率為95%至98%。 
   

案例9

《北京晚報(bào)》蛋白質(zhì)指紋圖譜“破譯”癌癥-測定準(zhǔn)確率90％以上

本報(bào)訊（通訊員張吉吉 記者賈曉宏）通過對蛋白質(zhì)不同片斷的變異情況檢測，可以達(dá)到90％以上的準(zhǔn)確率并提前3年至5年，對人體不同類型腫瘤或其他疾病進(jìn)行預(yù)警。 
　　專家介紹，癌癥發(fā)生是一個(gè)較長的過程，早在人體某部位發(fā)生癌變前的數(shù)年前，人體內(nèi)的多種蛋白質(zhì)構(gòu)成就已經(jīng)發(fā)生改變。但在目前的國內(nèi)臨床腫瘤檢測中，大都只采取某一種蛋白質(zhì)標(biāo)記物，所以導(dǎo)致檢測的陽性率較低。而蛋白質(zhì)指紋圖譜是近年來國際上興起的一種新技術(shù)，可以針對人體多種蛋白質(zhì)進(jìn)行測定，繪制出專屬蛋白質(zhì)的“指紋”圖譜，大大提高了癌癥診斷的陽性率。比如10個(gè)有可能發(fā)生卵巢癌的人中，一般只有3個(gè)會(huì)被目前臨床采用的方法檢測出來，陽性率為30％。而通過蛋白質(zhì)指紋圖譜，這個(gè)準(zhǔn)確率可達(dá)98％。蛋白質(zhì)指紋圖譜檢測的敏感性可達(dá)90％以上，可以提前3年至5年就發(fā)現(xiàn)一些變異的基因，從而為患者作出及時(shí)的腫瘤預(yù)警。 
　　據(jù)解放軍306醫(yī)院病理科主任張建中博士介紹，當(dāng)前中國人患惡性腫瘤死亡率較高的主要原因是發(fā)現(xiàn)不及時(shí)，而蛋白質(zhì)指紋圖譜可以解決這個(gè)問題。

 

案例10

《健康報(bào)》蛋白質(zhì)指紋圖譜可更早查出疾病

本報(bào)訊（記者張荔子）4月21日，蛋白質(zhì)指紋圖譜技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)在北京召開。該技術(shù)在國際上的最新進(jìn)展是，可以通過一個(gè)蛋白不同片段的變異，測出不同類型腫瘤或其他疾病，具有快速、簡便、準(zhǔn)確及特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。蛋白質(zhì)指紋圖譜技術(shù)標(biāo)志著一種劃時(shí)代的診斷模式誕生。 
　　蛋白質(zhì)指紋圖譜技術(shù)是隨著蛋白質(zhì)組學(xué)興起的一種新技術(shù)，用于各種疾病特異性蛋白指紋的識別和判斷，可以直接檢測不經(jīng)處理的尿液、血液或細(xì)胞裂解液等。例如傳統(tǒng)的卵巢癌腫瘤標(biāo)志物CA－125的診斷準(zhǔn)確率約25％，而蛋白質(zhì)指紋圖譜技術(shù)的準(zhǔn)確率可達(dá)100％，較CT、MRI更早發(fā)現(xiàn)腫瘤，使腫瘤的早診斷、早治療成為可能。該技術(shù)于上世紀(jì)末在美國發(fā)明并應(yīng)用于臨床，目前美國已用開發(fā)出的卵巢癌蛋白質(zhì)指紋圖譜開展對卵巢癌的篩查。 
　　

 

案例11

《健康報(bào)》蛋白指紋圖譜給人類帶來什么

幾年前，我國“973”規(guī)劃《惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展基礎(chǔ)研究》首席科學(xué)家程書鈞教授說過，腫瘤治療的關(guān)鍵在于早期發(fā)現(xiàn)和早期治療。能在CT、MRI下觀察到的占位性病變已算不上最早期，當(dāng)然也不是治療的最佳時(shí)期。他提出應(yīng)該從細(xì)胞生物學(xué)角度看癌變，將腫瘤扼殺在細(xì)胞萌芽期。但又有誰能如此明察秋毫呢？近來，蛋白指紋圖譜技（SELDI）展現(xiàn)一種快速、簡便、準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)的診斷技術(shù)正向人類走來。 
　　一種劃時(shí)代的診斷模式誕生蛋白指紋圖譜技術(shù)有多神奇？隨著人類基因組測序的完成，人類擁有了解碼生命本質(zhì)的鑰匙。但人類基因只有3萬個(gè)左右，大大少于預(yù)期數(shù)量，這與人類千變?nèi)f化的個(gè)體差異及 疾病表現(xiàn)不相匹配。實(shí)際上，生命的萬千景象是通過基因的產(chǎn)物蛋白質(zhì)表現(xiàn)出來的，人類的蛋白質(zhì)數(shù)量約有10萬多個(gè)。因此，充分挖掘和利用蛋白質(zhì)中極其豐富的信息對于理解人體的生理病理活動(dòng)、檢測疾病的發(fā)生發(fā)展具有重大意義。 
    上世紀(jì)末，美國科學(xué)家經(jīng)過10年不懈的努力，發(fā)明了一種十分有效的疾病早期診斷方法，這就是蛋白指紋圖譜技術(shù)。SELDI不同于只能針對單一指標(biāo)進(jìn)行分析的傳統(tǒng)檢驗(yàn)技術(shù)，它是通過對蛋白質(zhì)動(dòng)態(tài)的分析，探索疾病早期最微小的指標(biāo)和征兆，絕不會(huì)使大量疾病相關(guān)信息擦肩而過。以腫瘤為例，一個(gè)腫瘤細(xì)胞長成腫瘤大約需要10～15年時(shí)間。盡管目前有巴氏涂片、隱血試驗(yàn)、食道拉網(wǎng)、計(jì)算機(jī)斷層掃描、超聲診斷等很多早期篩查方法，但敏感性和特異性平均不到60％。據(jù)美國權(quán)威雜志《腫瘤研究》報(bào)道，蛋白指紋圖譜技術(shù)可以測出前列腺癌形成5年前的蛋白指紋。因?yàn)槟[瘤標(biāo)志物較敏感，當(dāng)腫瘤細(xì)胞數(shù)達(dá)到數(shù)千萬個(gè)時(shí)，就可從血清、尿液中檢測到蛋白質(zhì)、酶或癌基因等生化變化。 
　　擁有個(gè)人生命光盤不再是夢想蛋白指紋究竟是什么概念？就像每個(gè)人的指紋不同于他人一樣，每種疾病的特定蛋白質(zhì)表達(dá)物也不一樣，稱之為指紋圖譜是種形象比喻。蛋白指紋圖譜技術(shù)是由蛋白質(zhì)芯片及分析儀器—表面加強(qiáng)激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜兩部分組成，可以將病人血清中蛋白質(zhì)成分的變化記錄下來，繪制成蛋白指紋質(zhì)譜圖，并顯示樣品中各種蛋白的分子量、含量等信息。將這張圖譜與正常人、某種疾病病人的譜圖，或基因庫中的譜圖進(jìn)行對照，就能最終發(fā)現(xiàn)和捕獲新的特異性相關(guān)蛋白及其特征，整個(gè)測定一般幾十分鐘就全部完成。 
　　科學(xué)家已經(jīng)確定了各種疾病的特殊標(biāo)志分子，發(fā)現(xiàn)一個(gè)蛋白不同片段變異是不同類型腫瘤或其他疾病的標(biāo)志。因此，這一技術(shù)有望為疾病的診斷、治療和藥物開發(fā)帶來突破性進(jìn)展。今年，美國已經(jīng)將這項(xiàng)技術(shù)用于卵巢癌的篩查，準(zhǔn)確率達(dá)100％。已有89種疾病可以通過這種技術(shù)檢測出來，如乳腺癌、前列腺癌、肝癌等腫瘤；心肌梗死、高血壓、急性心力衰竭等心血管疾病；SARS、艾滋病、病毒性肝炎等傳染��；抑郁癥、早老性癡呆等神經(jīng)精神病學(xué)；還有糖尿病、地中海貧血等其他疾病。人在一生中的蛋白指紋圖譜處于動(dòng)態(tài)的不斷變化過程，通過這項(xiàng)技術(shù)，將來人們有可能擁有自己的生命光盤，記錄下個(gè)人有生以來不同階段的蛋白指紋圖譜，從分子水平了解并觀察自己的生理變化，或作為治療前后的比對參照。