致瀉大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株

11月22日實(shí)施的GB 29921-2021《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品中致病菌限量》中，將對(duì)牛肉制品和生食果蔬制品的 “大腸埃希氏菌 O157:H7”限量指標(biāo)修改為“致瀉大腸埃希氏菌”，并擴(kuò)大至即食生肉制品和發(fā)酵肉制品類。
現(xiàn)行致瀉大腸埃希氏菌的檢驗(yàn)方法是GB 4789.6-2016 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)》。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求，在做PCR確認(rèn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，“每次PCR反應(yīng)使用EPEC、EIEC、ETEC、STEC/EHEC、EAEC標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽(yáng)性對(duì)照。同時(shí)，使用大腸埃希氏菌ATCC 25922或等效標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陰性對(duì)照”。

CICC整理了7株標(biāo)準(zhǔn)菌株的典型特征照片和描述，供檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室參考。

形態(tài)學(xué)

左：麥康凱（MAC）瓊脂培養(yǎng)基，36 ℃培養(yǎng)24 h，菌落磚紅色至桃紅色，圓形，表面光滑，菌落周圍培養(yǎng)基呈粉紅色。

右：伊紅美藍(lán)（EMB）瓊脂培養(yǎng)基，36 ℃培養(yǎng)24 h，菌落紫黑色，帶或不帶金屬光澤，圓形，表面光滑，邊緣整齊。

關(guān)鍵生理生化

三糖鐵實(shí)驗(yàn)：

a. 空白對(duì)照

b. 斜面產(chǎn)酸變黃，底層產(chǎn)酸變黃，不產(chǎn)硫化氫，產(chǎn)氣。

氰化鉀、靛基質(zhì)、尿素酶實(shí)驗(yàn)：
a. 氰化鉀對(duì)照：渾濁。
b. 氰化鉀：陰性，不渾濁。
c. 靛基質(zhì)：陽(yáng)性，粉紅色。
d. 尿素酶：陰性，黃色。


特征基因

株大腸埃希氏菌毒力基因電泳檢測(cè)結(jié)果

注：電泳圖中相關(guān)標(biāo)記釋義：M, DL2000 Marker; 1, uidA; 2, aggR; 3, astA; 4, pic; 5, bfpB; 6, escV; 7, stx1; 8, stx2; 9, lt; 10, stp; 11, sth; 12, invE.

 

7株大腸埃希氏菌特征性基因序列分析