CPP條件位置偏愛實驗的原理及方法

CPP實驗是評價覓藥行為或心理渴求的經(jīng)典動物模型，是一種相對簡單的實驗手段。CPP實驗最早報道見于1940年的黑猩猩嗎啡依賴行為實驗，該研究說明嗎啡具有依賴性，能強化動物行為。1957年Beach發(fā)現(xiàn)動物的天然偏好會影響CPP實驗結(jié)果。1976年Rossi和Reid將停留時問(Duration Time)作為實驗動物的偏好指標，到目前為比他們的實驗流程被大家認同，并且不斷進行修改和完善，自20世紀80年代以來CPP實驗在藥物濫用研究領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
 
1.1實驗原理
根據(jù)巴甫洛夫的條件反射學(xué)說，如果把獎賞刺激與某個特定的非獎賞性條件刺激(如某特定環(huán)境)反復(fù)練習(xí)之后，后者便可獲得獎賞特性。反復(fù)幾次將動物給藥后放在一個特定的環(huán)境中，如藥物具有獎賞效應(yīng)，則特定環(huán)境就會具有了獎賞效應(yīng)的特性，動物在不給藥的情況下依然表現(xiàn)出對該特定環(huán)境的偏愛。

1.2實驗設(shè)備
典型的CPP實驗設(shè)備一般為兩個或三個互通的實驗箱，也有四箱或開場式的裝置。每個箱體設(shè)置的環(huán)境(如箱體顏色、材質(zhì)案有著極大的差異，使動物把不同的環(huán)境線索與給予的實驗處理即非條件刺激進行匹配。
 
1.3實驗方法
CPP實驗主要用嚙齒類動物，如大鼠、小鼠及基因敲除鼠作為研究對象，給藥途徑有腹腔注射、靜脈注射、皮下注射等，主要取決于藥物的特性，以及人類攝藥方式。CPP實驗一般分為前測、訓(xùn)練和測試。
1.3.1前測階段在正式訓(xùn)練前，去掉箱體之間的隔板，將實驗動物放入實驗箱中使其自由活動，記錄在各箱的停留時間。這一階段可以使動物熟悉實驗裝置，減少新奇感與應(yīng)激作用，同時可以測查非條件性偏愛來篩選動物。前測階段在不同實驗室設(shè)計各不相同，一般為1-5次，每次10-15分鐘。
1.3.2訓(xùn)練階段箱體之間放置隔板，使動物只能停留在放入的箱體。實驗動物注射藥物后放置在伴藥箱中，20-40分鐘后取出。同天間隔4-8小時或者第二天的同一時間進行對照實驗，
給實驗動物注射對照劑(如生理鹽水)，放置在非伴藥箱中，實驗進行時間與前次相同。CPP的形成僅需1一2次訓(xùn)練即可完成，但是多次訓(xùn)練有利于穩(wěn)定實驗動物的狀態(tài)。
1.3.3測試階段訓(xùn)練結(jié)束后，對實驗動物進行測試。實驗時動物不經(jīng)任何藥物處理，將動物放置在過道上，拿走隔板，動物可以在各箱中自由穿梭。測試一般進行一次，測試時間依據(jù)藥物作用時間而定，一般為15分鐘。
 
最常用的觀察指標是停留時間，如果實驗動物在給藥箱內(nèi)停留的時間較長，表示它對該箱有偏愛，說明受試藥物有獎賞作用，動物對其有精神依賴性，反之則認為受試藥物有厭惡性。計算機輔助CPP實驗系統(tǒng)，可以視頻記錄實驗動物的活動距離和穿梭次數(shù)來衡量動物給藥引起的運動活性變化。1984年，Bardo等發(fā)現(xiàn)在大鼠嗎啡誘導(dǎo)的CPP實驗中，與自然消退相比，消退訓(xùn)練后在伴藥箱內(nèi)停留的總時間不變，而每次進入伴藥箱停留的時間縮短，即穿梭次數(shù)增多，說明自然消退與消退尋練可能對動物的運動行為有不同影響。動物在伴藥箱的停留時間與總活動距離、穿梭次數(shù)之間相關(guān)性很弱，1992年Cun-ningham等學(xué)者將阿片劑注射到伏隔核來對運動活性和獎賞相關(guān)反應(yīng)進行比較，結(jié)論說明之間無顯著關(guān)聯(lián)，這種不相關(guān)或弱相關(guān)現(xiàn)象提示，藥物的獎賞效應(yīng)與運動活性可能由不同的腦區(qū)和神經(jīng)機制控制。