如何提升關(guān)鍵應(yīng)用場景下的連續(xù)稀釋可靠性
連續(xù)稀釋法是全球無數(shù)實驗室都在使用的核心技術(shù)之一，但眾所周知，這項工作既耗時又費力，并且容易出錯，結(jié)果經(jīng)常不準(zhǔn)確且容易造成重復(fù)性勞損（RSI）。我們的電動移液器、自動化平臺和蠕動泵是提高連續(xù)稀釋可重復(fù)性和優(yōu)化最終結(jié)果可靠性的完美解決方案。
精準(zhǔn)移液獲得可靠結(jié)果
連續(xù)稀釋通常被用于估計DNA、RNA、PCR產(chǎn)物、蛋白質(zhì)或微生物樣品的濃度。另外，這也是獲得所需的試劑、化學(xué)品或化合物濃度的重要方法，例如藥物學(xué)領(lǐng)域中的新藥發(fā)現(xiàn)。一般而言，連續(xù)稀釋往往看似輕而易舉，但在手動液體處理過程中，移液速度、角度和混合上的細(xì)微差異很容易使誤差在整個工作流程中不斷累積，進(jìn)而對最終結(jié)果的可靠性產(chǎn)生負(fù)面影響。不僅如此，手動移液操作較慢，大大拉長了獲得結(jié)果的時間，而且長期忍受別扭的姿勢、笨重的移液器、僵硬的柱塞按鈕和高度重復(fù)的處理過程都可能會導(dǎo)致手部、肩部、頸部以及腕部的重復(fù)性勞損。
事實證明，我們的移液解決方案可以提高通量和最終結(jié)果的準(zhǔn)確性，廣泛適用于眾多學(xué)科領(lǐng)域。得益于更快捷的多通道液體轉(zhuǎn)移操作，它們縮短了需要操作者握持或保持不舒適坐姿或站姿的時長，進(jìn)而降低了造成RSI的風(fēng)險。除此之外，人體工程學(xué)體驗始終貫穿于INTEGRA手持式電動移液器的開發(fā)，它們重量輕，槍頭彈出力小，采用了直觀的拇指轉(zhuǎn)盤設(shè)計。使用自動化移液器完全不需要執(zhí)行大量的手動液體轉(zhuǎn)移步驟，減輕了手部和腕部的負(fù)擔(dān)。在此，我們列舉了三個關(guān)鍵應(yīng)用，這些多功能的產(chǎn)品在應(yīng)用中為簡單、可重復(fù)的連續(xù)稀釋工作流程提供了支持。
如需了解連續(xù)稀釋的簡單分步指南及實例、良好的移液操作以及針對特定液體的處理參數(shù)指南，請參閱以下文章：
用于精確qPCR驗證和核酸定量的高效標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)曲線（也稱為校準(zhǔn)曲線）是一種定量研究和分析工具，用于確定未知樣品的濃度。標(biāo)準(zhǔn)曲線是由待測分析物或與之密切相關(guān)的化合物在目標(biāo)濃度范圍內(nèi)制備的，并且通過分析多個已知濃度的樣品來驗證。然后重復(fù)該過程，對未知樣品進(jìn)行測定，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出分析物的濃度。例如，核酸定量是分子生物學(xué)實驗室中常見的工作流程，當(dāng)使用熒光法定量核酸時，可以通過比較標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣品的熒光測量值來確定DNA或RNA的含量。
詳細(xì)了解如何使用熒光測定法和其他RNA和DNA定量方法來確定核酸的濃度、產(chǎn)量和純度。
在構(gòu)建新方案或更改工作流程時，標(biāo)準(zhǔn)曲線還被用于驗證qPCR檢測。使用含有已知量模板DNA的樣品進(jìn)行qPCR檢測，并將數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，以評估檢測的反應(yīng)效率。
了解qPCR的工作原理、如何使用標(biāo)準(zhǔn)曲線驗證檢測以及qPCR數(shù)據(jù)分析的不同方法。
連續(xù)稀釋的可重復(fù)性對于確保結(jié)果的可靠性至關(guān)重要，借助搭載單通道VIAFLO輕型電動移液器和D-ONE單通道移液模塊的ASSIST PLUS移液工作站，用戶可以預(yù)先設(shè)置移液速度和混合參數(shù)以保證每個稀釋步驟都將在相同的條件下進(jìn)行，不受操作員和批次的影響。這些移液器還可以在混合過程中進(jìn)行動態(tài)體積調(diào)整，以實現(xiàn)最大限度的靈活性和過程優(yōu)化。如果需要并行制備多條標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以使用多通道VIAFLO移液器和VOYAGER可調(diào)槍頭間距移液器，VOYAGER還可以在源容器和目標(biāo)容器規(guī)格不同時直接進(jìn)行連續(xù)稀釋，減少液體轉(zhuǎn)移步驟的數(shù)量和出現(xiàn)手動錯誤的可能性。更少的液體處理步驟也意味著可以更快地完成連續(xù)稀釋，從而提高通量并縮短獲得結(jié)果的時間。
可重復(fù)的連續(xù)稀釋成就簡單穩(wěn)妥的MIC測試
抗生素耐藥性可以通過病原體的隨機基因突變自然形成，但藥物的濫用和過度使用（尤其是醫(yī)療保健和農(nóng)業(yè)中的抗生素）會顯著加速這一過程。這意味著治療許多常見感染的可選項正在迅速減少，因此為了從一開始就出具最有效的治療方案，進(jìn)行抗菌藥敏試驗是至關(guān)重要的。這種測試也是在藥物開發(fā)過程中確定新型抗菌化合物功效的重要方法。
測量病原體對抗菌藥物敏感性的方法之一是測定可抑制其生長的最低的抗菌藥物濃度，即最低抑菌濃度（MIC）。這可以通過肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法或抗菌梯度法進(jìn)行測定。點此瀏覽最常用MIC測定方法的全面綜述。
VIAFLO 96和VIAFLO 384手持式電動移液器以及MINI 96便攜式電動移液器的局部槍頭裝載允許用戶設(shè)置預(yù)定義的移液高度和角度。這些功能消除了手動操作的影響并提高了MIC測試過程中液體處理步驟的一致性。VIAFLO 96和VIAFLO 384移液器還能讓實驗室具備進(jìn)行更高產(chǎn)量的高通量連續(xù)稀釋的能力。
局部裝載槍頭的MINI 96可提高連續(xù)稀釋的批次間和用戶間可重復(fù)性。
使用ASSIST PLUS移液工作站等自動化液體處理解決方案，可以實現(xiàn)更復(fù)雜工作流程的高可重復(fù)性無人值守移液。該平臺可簡化連續(xù)稀釋步驟以提高通量，并讓工作人員有時間執(zhí)行實驗室的其他重要任務(wù)，從而提高實驗室的效率。最重要的是，該移液工作站能夠避免工作人員在液體轉(zhuǎn)移過程中暴露于有害生物和抗生素，從而確保人員安全，同時能夠消除由重復(fù)手動移液引起的RSI。
我們的應(yīng)用紀(jì)要解釋了ASSIST PLUS移液工作站上經(jīng)過驗證的自動連續(xù)稀釋流程，為尋求成熟液體處理方法來簡化工作流程的實驗室人員提供了寶貴的資源。了解如何通過在ASSIST PLUS上自動執(zhí)行2倍、5倍和10倍連續(xù)稀釋的移液步驟來提高M(jìn)IC測試工作流程的速度和精度。
連續(xù)稀釋的液體處理階段可以在ASSIST PLUS上實現(xiàn)自動化，實現(xiàn)更高的通量和更好的一致性。
輕而易舉的細(xì)菌計數(shù)連續(xù)稀釋
連續(xù)稀釋也是微生物學(xué)領(lǐng)域的常用方法，用于估計樣品中包含的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量。當(dāng)然，當(dāng)它們以高濃度存在時，是不可能對單個細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)的，因此需要對樣品進(jìn)行10倍連續(xù)稀釋，再通過各級稀釋物的鋪板和孵育來估計樣品的細(xì)胞生長模型。
相反，當(dāng)樣品中的細(xì)菌濃度非常低時，也無法通過經(jīng)典的平板計數(shù)法得出可靠的活細(xì)胞數(shù)。在這種情況下，應(yīng)改用最大可能性計數(shù)法（MPN）進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)。將液體肉湯等分至培養(yǎng)管中，并接種不同數(shù)量的樣品，顏色變化則表明細(xì)菌生長，培養(yǎng)過程中管內(nèi)液體變得渾濁或有氣體產(chǎn)生。然后根據(jù)統(tǒng)計概率估計樣本中活細(xì)胞的數(shù)量。
DOSE IT實驗室蠕動泵可以快速準(zhǔn)確地將肉湯和樣品分配到培養(yǎng)管中，大大加快MPN流程的移液步驟。可選配的桌面開關(guān)或腳踏開關(guān)可提供免手動控制，通過PC軟件可進(jìn)行遠(yuǎn)程操作，為用戶提供更高的靈活性，使其能夠根據(jù)特定的MPN工作流程調(diào)整液體處理平臺。DOSE IT的CUSTOMIZE模式可以基于體積、流速和重復(fù)次數(shù)等可配置參數(shù)輕松創(chuàng)建個性化液體處理流程，確保樣品之間的可重復(fù)移液。該泵還可兼容1至8 mm內(nèi)不同尺寸的管路，以滿足不同的通量水平，這使其能夠在MPN分析過程中準(zhǔn)確地分配各種體積的樣品。
詳細(xì)了解DOSE IT如何在處理低濃度樣品時幫助快速完成精確的稀釋以進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)。
DOSE IT在MPN工作流程中執(zhí)行高度準(zhǔn)確的免手動培養(yǎng)基分配。
滿足需求的多功能解決方案
連續(xù)稀釋是一種在許多生命科學(xué)學(xué)科中都被廣泛使用的技術(shù)，而正確地執(zhí)行這種技術(shù)將為后續(xù)研究的成功奠定基礎(chǔ)。我們的液體處理解決方案可實現(xiàn)移液流程的標(biāo)準(zhǔn)化，并盡可能地減少手動移液時經(jīng)常產(chǎn)生的人為錯誤，從而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。此外，這些創(chuàng)新且功能強大的產(chǎn)品可以大大加快連續(xù)稀釋的移液過程，使實驗室能夠處理更多樣品并縮短獲得結(jié)果的時間。不僅如此，工作流程的自動化和免手動操作還可以避免實驗室工作人員暴露于有害的樣品材料，且不必再執(zhí)行可能導(dǎo)致RSI的繁重移液任務(wù)，這是實驗室管理人員的重要考量因素之一。我們高度靈活的儀器可以輕松適應(yīng)眾多不同的應(yīng)用，以簡化各種液體處理工作流程并提高實驗室效率。
參考文獻(xiàn)
精準(zhǔn)移液獲得可靠結(jié)果
連續(xù)稀釋通常被用于估計DNA、RNA、PCR產(chǎn)物、蛋白質(zhì)或微生物樣品的濃度。另外，這也是獲得所需的試劑、化學(xué)品或化合物濃度的重要方法，例如藥物學(xué)領(lǐng)域中的新藥發(fā)現(xiàn)。一般而言，連續(xù)稀釋往往看似輕而易舉，但在手動液體處理過程中，移液速度、角度和混合上的細(xì)微差異很容易使誤差在整個工作流程中不斷累積，進(jìn)而對最終結(jié)果的可靠性產(chǎn)生負(fù)面影響。不僅如此，手動移液操作較慢，大大拉長了獲得結(jié)果的時間，而且長期忍受別扭的姿勢、笨重的移液器、僵硬的柱塞按鈕和高度重復(fù)的處理過程都可能會導(dǎo)致手部、肩部、頸部以及腕部的重復(fù)性勞損。
事實證明，我們的移液解決方案可以提高通量和最終結(jié)果的準(zhǔn)確性，廣泛適用于眾多學(xué)科領(lǐng)域。得益于更快捷的多通道液體轉(zhuǎn)移操作，它們縮短了需要操作者握持或保持不舒適坐姿或站姿的時長，進(jìn)而降低了造成RSI的風(fēng)險。除此之外，人體工程學(xué)體驗始終貫穿于INTEGRA手持式電動移液器的開發(fā)，它們重量輕，槍頭彈出力小，采用了直觀的拇指轉(zhuǎn)盤設(shè)計。使用自動化移液器完全不需要執(zhí)行大量的手動液體轉(zhuǎn)移步驟，減輕了手部和腕部的負(fù)擔(dān)。在此，我們列舉了三個關(guān)鍵應(yīng)用，這些多功能的產(chǎn)品在應(yīng)用中為簡單、可重復(fù)的連續(xù)稀釋工作流程提供了支持。
如需了解連續(xù)稀釋的簡單分步指南及實例、良好的移液操作以及針對特定液體的處理參數(shù)指南，請參閱以下文章：
用于精確qPCR驗證和核酸定量的高效標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)曲線（也稱為校準(zhǔn)曲線）是一種定量研究和分析工具，用于確定未知樣品的濃度。標(biāo)準(zhǔn)曲線是由待測分析物或與之密切相關(guān)的化合物在目標(biāo)濃度范圍內(nèi)制備的，并且通過分析多個已知濃度的樣品來驗證。然后重復(fù)該過程，對未知樣品進(jìn)行測定，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出分析物的濃度。例如，核酸定量是分子生物學(xué)實驗室中常見的工作流程，當(dāng)使用熒光法定量核酸時，可以通過比較標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣品的熒光測量值來確定DNA或RNA的含量。
詳細(xì)了解如何使用熒光測定法和其他RNA和DNA定量方法來確定核酸的濃度、產(chǎn)量和純度。
在構(gòu)建新方案或更改工作流程時，標(biāo)準(zhǔn)曲線還被用于驗證qPCR檢測。使用含有已知量模板DNA的樣品進(jìn)行qPCR檢測，并將數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，以評估檢測的反應(yīng)效率。
了解qPCR的工作原理、如何使用標(biāo)準(zhǔn)曲線驗證檢測以及qPCR數(shù)據(jù)分析的不同方法。
連續(xù)稀釋的可重復(fù)性對于確保結(jié)果的可靠性至關(guān)重要，借助搭載單通道VIAFLO輕型電動移液器和D-ONE單通道移液模塊的ASSIST PLUS移液工作站，用戶可以預(yù)先設(shè)置移液速度和混合參數(shù)以保證每個稀釋步驟都將在相同的條件下進(jìn)行，不受操作員和批次的影響。這些移液器還可以在混合過程中進(jìn)行動態(tài)體積調(diào)整，以實現(xiàn)最大限度的靈活性和過程優(yōu)化。如果需要并行制備多條標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以使用多通道VIAFLO移液器和VOYAGER可調(diào)槍頭間距移液器，VOYAGER還可以在源容器和目標(biāo)容器規(guī)格不同時直接進(jìn)行連續(xù)稀釋，減少液體轉(zhuǎn)移步驟的數(shù)量和出現(xiàn)手動錯誤的可能性。更少的液體處理步驟也意味著可以更快地完成連續(xù)稀釋，從而提高通量并縮短獲得結(jié)果的時間。
可重復(fù)的連續(xù)稀釋成就簡單穩(wěn)妥的MIC測試
抗生素耐藥性可以通過病原體的隨機基因突變自然形成，但藥物的濫用和過度使用（尤其是醫(yī)療保健和農(nóng)業(yè)中的抗生素）會顯著加速這一過程。這意味著治療許多常見感染的可選項正在迅速減少，因此為了從一開始就出具最有效的治療方案，進(jìn)行抗菌藥敏試驗是至關(guān)重要的。這種測試也是在藥物開發(fā)過程中確定新型抗菌化合物功效的重要方法。
測量病原體對抗菌藥物敏感性的方法之一是測定可抑制其生長的最低的抗菌藥物濃度，即最低抑菌濃度（MIC）。這可以通過肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法或抗菌梯度法進(jìn)行測定。點此瀏覽最常用MIC測定方法的全面綜述。
VIAFLO 96和VIAFLO 384手持式電動移液器以及MINI 96便攜式電動移液器的局部槍頭裝載允許用戶設(shè)置預(yù)定義的移液高度和角度。這些功能消除了手動操作的影響并提高了MIC測試過程中液體處理步驟的一致性。VIAFLO 96和VIAFLO 384移液器還能讓實驗室具備進(jìn)行更高產(chǎn)量的高通量連續(xù)稀釋的能力。
使用ASSIST PLUS移液工作站等自動化液體處理解決方案，可以實現(xiàn)更復(fù)雜工作流程的高可重復(fù)性無人值守移液。該平臺可簡化連續(xù)稀釋步驟以提高通量，并讓工作人員有時間執(zhí)行實驗室的其他重要任務(wù)，從而提高實驗室的效率。最重要的是，該移液工作站能夠避免工作人員在液體轉(zhuǎn)移過程中暴露于有害生物和抗生素，從而確保人員安全，同時能夠消除由重復(fù)手動移液引起的RSI。
我們的應(yīng)用紀(jì)要解釋了ASSIST PLUS移液工作站上經(jīng)過驗證的自動連續(xù)稀釋流程，為尋求成熟液體處理方法來簡化工作流程的實驗室人員提供了寶貴的資源。了解如何通過在ASSIST PLUS上自動執(zhí)行2倍、5倍和10倍連續(xù)稀釋的移液步驟來提高M(jìn)IC測試工作流程的速度和精度。
輕而易舉的細(xì)菌計數(shù)連續(xù)稀釋
連續(xù)稀釋也是微生物學(xué)領(lǐng)域的常用方法，用于估計樣品中包含的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量。當(dāng)然，當(dāng)它們以高濃度存在時，是不可能對單個細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)的，因此需要對樣品進(jìn)行10倍連續(xù)稀釋，再通過各級稀釋物的鋪板和孵育來估計樣品的細(xì)胞生長模型。
相反，當(dāng)樣品中的細(xì)菌濃度非常低時，也無法通過經(jīng)典的平板計數(shù)法得出可靠的活細(xì)胞數(shù)。在這種情況下，應(yīng)改用最大可能性計數(shù)法（MPN）進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)。將液體肉湯等分至培養(yǎng)管中，并接種不同數(shù)量的樣品，顏色變化則表明細(xì)菌生長，培養(yǎng)過程中管內(nèi)液體變得渾濁或有氣體產(chǎn)生。然后根據(jù)統(tǒng)計概率估計樣本中活細(xì)胞的數(shù)量。
DOSE IT實驗室蠕動泵可以快速準(zhǔn)確地將肉湯和樣品分配到培養(yǎng)管中，大大加快MPN流程的移液步驟。可選配的桌面開關(guān)或腳踏開關(guān)可提供免手動控制，通過PC軟件可進(jìn)行遠(yuǎn)程操作，為用戶提供更高的靈活性，使其能夠根據(jù)特定的MPN工作流程調(diào)整液體處理平臺。DOSE IT的CUSTOMIZE模式可以基于體積、流速和重復(fù)次數(shù)等可配置參數(shù)輕松創(chuàng)建個性化液體處理流程，確保樣品之間的可重復(fù)移液。該泵還可兼容1至8 mm內(nèi)不同尺寸的管路，以滿足不同的通量水平，這使其能夠在MPN分析過程中準(zhǔn)確地分配各種體積的樣品。
詳細(xì)了解DOSE IT如何在處理低濃度樣品時幫助快速完成精確的稀釋以進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)。
滿足需求的多功能解決方案
連續(xù)稀釋是一種在許多生命科學(xué)學(xué)科中都被廣泛使用的技術(shù)，而正確地執(zhí)行這種技術(shù)將為后續(xù)研究的成功奠定基礎(chǔ)。我們的液體處理解決方案可實現(xiàn)移液流程的標(biāo)準(zhǔn)化，并盡可能地減少手動移液時經(jīng)常產(chǎn)生的人為錯誤，從而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。此外，這些創(chuàng)新且功能強大的產(chǎn)品可以大大加快連續(xù)稀釋的移液過程，使實驗室能夠處理更多樣品并縮短獲得結(jié)果的時間。不僅如此，工作流程的自動化和免手動操作還可以避免實驗室工作人員暴露于有害的樣品材料，且不必再執(zhí)行可能導(dǎo)致RSI的繁重移液任務(wù)，這是實驗室管理人員的重要考量因素之一。我們高度靈活的儀器可以輕松適應(yīng)眾多不同的應(yīng)用，以簡化各種液體處理工作流程并提高實驗室效率。
參考文獻(xiàn)
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2214753515000169
- https://bitesizebio.com/31470/obligate-qpcr-standard-curve/
- https://www.thermofisher.com/ch/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/nucleic-acid-quantitation.html
- https://www.jove.com/v/10507/serial-dilutions-and-plating-microbial-enumeration
- https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1046/j.1469-0691.2003.00790.x
- https://microbiologynote.com/serial-dilution-method/
- https://conductscience.com/bacteria-enumeration/
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