熒光染料-CFSE活細(xì)胞標(biāo)記的特點

熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細(xì)胞進行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細(xì)胞膜，在活細(xì)胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價結(jié)合，水解后釋放出綠色熒光。在細(xì)胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，因此其熒光強度是親代細(xì)胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。另外，CFSE標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久，它常被用來做活體細(xì)胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動的實驗。熒光探針CFSE進入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，在細(xì)胞核的熒光染色最強，并證實CFSE不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患�？梢愿�快速，更準(zhǔn)確和更安全的得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
CFSE：羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)-3',6'-O,O'-diacetylfluorescein)

優(yōu)點：
1.      活體標(biāo)記：可以追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。
2.      時間長：標(biāo)記的熒光可以維持長達(dá)數(shù)周之久。
3.      安全：不需使用放射性同位素。
4.      相關(guān)性高：與H3摻入法結(jié)果一致，可代替后者。
5.      特定跟蹤：可以與細(xì)胞亞群特定抗體結(jié)合使用。
6.      簡單：操作簡單，可靠。
7.      穩(wěn)定：進入細(xì)胞后熒光不受內(nèi)環(huán)境影響。
8.      結(jié)果客觀：對細(xì)胞生理活動沒有任何影響。
9.      經(jīng)濟實惠：費用經(jīng)濟，效率高。

用途：
1.       細(xì)胞增殖檢測（尤其是淋巴細(xì)胞的增殖檢測）。
2.       體內(nèi)示蹤。
3.       細(xì)胞熒光標(biāo)記。
4.       細(xì)胞毒性檢測。

其他：
1.      檢測儀器：熒光電鏡，流式細(xì)胞儀，CO2培養(yǎng)箱，移液器等
2.      激發(fā)波長：500nm
3.      發(fā)射波長：520nm