博樂(lè)美凱快速微生物檢測(cè)符合節(jié)省時(shí)間和成本的規(guī)則

 

Tracy Yuan（原銓?zhuān)�上海美凱純生物科技有限公司）

 

BioFirst快速微生物檢測(cè)方法因其具有高度的自動(dòng)化、顯著縮短報(bào)告結(jié)果時(shí)間、操作簡(jiǎn)便、無(wú)需對(duì)員工做過(guò)多培訓(xùn)、更快的產(chǎn)品放行和改善過(guò)程控制等特點(diǎn)而受到越來(lái)越多的關(guān)注。但在采用快速檢測(cè)方法之前必須滿(mǎn)足3個(gè)條件：(1)符合GMP規(guī)則；(2)與標(biāo)準(zhǔn)方法（如國(guó)標(biāo)法）進(jìn)行驗(yàn)證；(3)確保投資能得到回報(bào)。本文闡述可如何實(shí)現(xiàn)上述三個(gè)條件以及快速微生物的優(yōu)勢(shì)。

 

食品藥品生產(chǎn)企業(yè)需采取措施確保產(chǎn)品不受有害微生物污染。要做到這一點(diǎn)就必須檢測(cè)從原材料、中間產(chǎn)品到終端產(chǎn)品中的相關(guān)微生物。

 

傳統(tǒng)的平板方法檢測(cè)微生物需要較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間、訓(xùn)練有素的微生物實(shí)驗(yàn)員和煩瑣的操作過(guò)程，已經(jīng)成為了產(chǎn)品放行的瓶頸；而更簡(jiǎn)便的替代檢測(cè)方法如快速微生物檢測(cè)方法（RMM’s）可以很好地解決這些問(wèn)題。當(dāng)評(píng)估一種替代檢測(cè)方法時(shí)，有三個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題需要考慮：(I)系統(tǒng)是否進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證？(II)是否符合GMP的規(guī)定？(III)投資回報(bào)率如何？

 

2010年10月實(shí)施的新版中國(guó)藥典也給出了“微生物快速檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)”，明確指出企業(yè)經(jīng)過(guò)相關(guān)驗(yàn)證后可以采用快速微生物檢測(cè)方法。2015年該指導(dǎo)原則成為藥典的附件。

 

 

Bio First博樂(lè)美凱系統(tǒng)已被驗(yàn)證符合cGMP  BioFirst微生物實(shí)時(shí)熒光光電檢測(cè)系統(tǒng)是一種特意為營(yíng)養(yǎng)保健品、食品、化妝品、制藥、水處理等行業(yè)設(shè)計(jì)的快速微生物檢測(cè)方法。下面是關(guān)于BioFirst系統(tǒng)驗(yàn)證工作的簡(jiǎn)要說(shuō)明。

1、BioFirst系統(tǒng)與USP方法的平行對(duì)比試驗(yàn)：每種對(duì)比試驗(yàn)均采用200個(gè)以上干凈和自然污染的營(yíng)養(yǎng)保健品和膳食添加劑樣本進(jìn)行試驗(yàn)，

2、特異性（也稱(chēng)為兼容性和排斥性）：包括測(cè)試每種檢測(cè)管以確保每種菌株能被檢出。結(jié)果表明每種檢測(cè)管均表現(xiàn)出優(yōu)異的兼容性和排斥性。

3、檢測(cè)限被定義為通過(guò)該方法能檢測(cè)出的微生物的最低水平。第一次試驗(yàn)中所有樣本按1.2 cfu/g進(jìn)行接種，第二次試驗(yàn)按1.5 cfu/g進(jìn)行接種。結(jié)果顯示BioFirst系統(tǒng)的檢測(cè)限等同或高于平板計(jì)數(shù)方法，接近于能檢測(cè)出培養(yǎng)基里一個(gè)細(xì)菌生長(zhǎng)的能力。在許多情況下一個(gè)菌能在BioFirst檢測(cè)管里被檢出而平板法則不能檢出；20份細(xì)菌數(shù)在1-2個(gè)CFU水平的樣本中BioFirst系統(tǒng)檢測(cè)出其中的16份，而平板計(jì)數(shù)方法只檢測(cè)出12份，數(shù)據(jù)如下表所示。

 

 

 

4、重現(xiàn)性：指采用自然污染樣本和接種各種菌株的樣本來(lái)檢查每種培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)差（SD）。以下4個(gè)曲線(xiàn)圖顯示該方法具有良好的重現(xiàn)性。

 

 

5、耐用性：包括檢查當(dāng)測(cè)試參數(shù)發(fā)生微小變化時(shí)系統(tǒng)的表現(xiàn)情況，對(duì)于BioFirst系統(tǒng)，參數(shù)包括儀器孵育溫度變化的影響、樣本大小的影響和檢測(cè)管里培養(yǎng)基體積的影響，耐用性在不同的培養(yǎng)基里被重復(fù)測(cè)試。結(jié)果證明該系統(tǒng)非常耐用且不受有意在方法參數(shù)上進(jìn)行細(xì)小變化或在多種不同條件下的影響。

6、穩(wěn)定性：測(cè)試面臨多種檢測(cè)條件的挑戰(zhàn)時(shí)系統(tǒng)所表現(xiàn)出的精確性。也就是測(cè)量在不同的正常檢測(cè)條件下，例如不同的分析員、儀器或試劑批號(hào)時(shí)，分析同樣樣本所獲得的檢測(cè)結(jié)果的精確程度。BioFirst系統(tǒng)表現(xiàn)出很好的穩(wěn)定性且得到高精確度的檢測(cè)結(jié)果。

7、假陰性：是指一份被接種或自然污染的樣本在參考方法（平板計(jì)數(shù)）中為陽(yáng)性結(jié)果而在替代方法中為陰性。在進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)和霉菌酵母菌檢測(cè)時(shí)BioFirst系統(tǒng)顯示沒(méi)有假陰性而USP平板計(jì)數(shù)方法有一個(gè)假陰性。

8、假陽(yáng)性：是指一份沒(méi)有被接種目標(biāo)菌的樣本在系統(tǒng)中得到陽(yáng)性結(jié)果而在平板計(jì)數(shù)方法中得到陰性結(jié)果。在4類(lèi)樣本的測(cè)試中，細(xì)菌總菌檢測(cè)BioFirst系統(tǒng)出現(xiàn)了2.5%的假陽(yáng)性率，霉菌和酵母菌檢測(cè)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)假陽(yáng)性。

 

上述驗(yàn)證過(guò)程表明在客戶(hù)選用BioFirst系統(tǒng)后，通過(guò)提供IQ和QQ文件及平行對(duì)比試驗(yàn)，BioFirst將可以為客戶(hù)提供一整套驗(yàn)證程序。

 

越來(lái)越多的公司發(fā)現(xiàn)采用傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法或者是將樣本送到外部實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物檢測(cè)是一項(xiàng)煩瑣、耗時(shí)的工作，而且并不一定省錢(qián)。與之相反，采用快速微生物檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)是可以將報(bào)告檢測(cè)結(jié)果的時(shí)間從7-10天縮短到5-48小時(shí)（霉菌）。這樣可以使企業(yè)更快的對(duì)污染做出反應(yīng)、加快產(chǎn)品放行速度、更快的將產(chǎn)品投放到市場(chǎng)、節(jié)省倉(cāng)儲(chǔ)空間和強(qiáng)化產(chǎn)品質(zhì)量。RMM的優(yōu)勢(shì)還包括更高的精確性、更好的靈敏性、增加樣本檢測(cè)量、自動(dòng)采集數(shù)據(jù)和更方便的數(shù)據(jù)處理、減少產(chǎn)品放行方面的花費(fèi)等。

購(gòu)買(mǎi)BioFirst系統(tǒng)的費(fèi)用主要包括固定資產(chǎn)投資和一次性檢測(cè)管的使用。雖然一瓶一次性檢測(cè)管的價(jià)格高于一塊普通瓊脂平板，但由于BioFirst系統(tǒng)不需要做梯度稀釋?zhuān)�因此檢測(cè)一份樣本只需用1個(gè)檢測(cè)管，而平板計(jì)數(shù)方法通常需要4-6塊平板。此外，快速檢測(cè)系統(tǒng)潛在節(jié)省的花費(fèi)包括：縮短產(chǎn)品放行的時(shí)間、不需要過(guò)多的檢驗(yàn)人員、更低的后處理費(fèi)用、減少工廠待工時(shí)間、減少原材料、中間產(chǎn)品和終產(chǎn)品的庫(kù)存時(shí)間、降低招回機(jī)率、增加產(chǎn)品的靈活性等；從而更好的提升和保護(hù)公司形象。