采用ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)無(wú)需衍生化快速測(cè)定黃曲霉毒素

 

目標(biāo)
    在不進(jìn)行衍生的條件下, 證明ACQUITY UPLC® H-CLASS系統(tǒng)的多元混合能力，配合使用沃特世黃曲霉毒素分析包，可提高黃曲霉毒素M1，G2，G1，B2和B1分離的分辨率且縮短分析時(shí)間。

 

背景
    黃曲霉毒素是由真菌、黃曲霉菌和寄生曲霉代謝生成的一組真菌毒素。它們可出現(xiàn)在各種食品中，如谷物、花生、調(diào)味料和乳制品。天然形成的黃曲霉毒素有四種：B1，B2，G1和G2。二次代謝產(chǎn)物M1，是乳牛食用B1污染的谷物后代謝生成的副產(chǎn)物，可污染乳制品，如牛奶。

 

    這些化合物具有毒性，可對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物產(chǎn)生致癌作用。B1和G1是四種天然產(chǎn)生的毒素中毒性最大的兩種。由于其毒性強(qiáng)，政府法規(guī)部門(mén)對(duì)食品中黃曲霉毒素的含量進(jìn)行了嚴(yán)格的限制。因此，食品行業(yè)需要靈敏、精確且重現(xiàn)性良好的分析方法對(duì)這些物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。這些方法通常基于反相HPLC色譜分離和熒光檢測(cè)。但是，由于反相洗脫會(huì)使黃曲霉毒素B1和G1的熒光效應(yīng)發(fā)生猝滅，通過(guò)使用衍生化以增強(qiáng)這些待測(cè)物的反應(yīng)。常規(guī)檢測(cè)是使用三氟乙酸（TFA）進(jìn)行柱前衍生以及采用碘法、電化學(xué)衍生溴法或光化學(xué)UV衍生法的柱后衍生。

這些方法耗時(shí)較長(zhǎng)，并且需要購(gòu)置昂貴的柱后反應(yīng)器，或?yàn)榱双@得電化學(xué)生成溴而購(gòu)置的電化學(xué)單元。尤其是TFA的使用會(huì)增加技術(shù)人員的安全隱患。

 

    樣品前處理采用基于VICAM AflaTest®P方法學(xué)的沃特世黃曲霉毒素分析包進(jìn)行處理。采用ACQUITY UPLC H-CLASS系統(tǒng)，配合其UPLC®優(yōu)化的熒光（FLR）檢測(cè)器，黃曲霉毒素M1，G2，G1，B2和B1的基線分離分析時(shí)間為4.5分鐘。無(wú)需進(jìn)行衍生化。ACQUITY UPLC H-CLASS系統(tǒng)擁有四元溶劑管理器（QSM）和Auto.Blend TM技術(shù)，可對(duì)溶劑進(jìn)行動(dòng)態(tài)程序化混合。將水、甲醇和乙腈的三路混合連接ACQUITY UPLC BEH C18柱即可完成分離。

圖1. 采用FLR 檢測(cè)器和高通量流通池的ACQUITY UPLC H-CLASS系統(tǒng)進(jìn)行黃曲霉毒素分離

 

總結(jié)

    采用ACQUITY UPLC H-CLASS系統(tǒng)兩個(gè)最直接的優(yōu)勢(shì)是，保留了傳統(tǒng)HPLC儀器的操作方法的同時(shí)，應(yīng)用UPLC的功能，可將分析時(shí)間從12分鐘大大縮短至4.5分鐘。

 

    消除柱后衍生系統(tǒng)和柱后流量降低造成的譜帶展寬，形成尖峰，實(shí)現(xiàn)高信噪比。因此能夠?qū)崿F(xiàn)更精確的積分和定量。無(wú)需衍生化也可以簡(jiǎn)化系統(tǒng)，降低對(duì)培訓(xùn)、故障排除和維護(hù)的需求。另外，采用UPLC替代HPLC也可以降低約85%的溶劑消耗量。

 

    配有FLR檢測(cè)器和黃曲霉毒素分析包的ACQUITY UPLC H-CLASS系統(tǒng)可使實(shí)驗(yàn)室更靈敏地對(duì)黃曲霉毒素進(jìn)行定量分析而無(wú)需進(jìn)行衍生化。分析時(shí)間的減少可使得樣品周轉(zhuǎn)更快，效率更高。

 

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