TACS® 2 TdT原位凋亡檢測(cè)(TUNEL法)試劑盒說(shuō)明書

DNA斷裂是細(xì)胞凋亡的重要特征，在凋亡初期，DNA可斷裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段；晚期則可進(jìn)一步在核小體間斷裂，形成180-200bp的DNA斷裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling，末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記法)可以檢測(cè)到任何形式的DNA斷裂，業(yè)已成為細(xì)胞凋亡檢測(cè)的常用方法，其結(jié)果可用光學(xué)顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。可用TACS® 2 TdT原位凋亡檢測(cè)(TUNEL法)試劑盒進(jìn)行試驗(yàn)。

TUNEL法原位檢測(cè)即是利用外源性的TdT酶(Terminal deoxynucleotidy transferase，末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶)，將標(biāo)記的底物dUTP或BrdU(無(wú)或有熒光標(biāo)記)加到DNA的斷點(diǎn)上，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA斷點(diǎn)的標(biāo)記， 然后用酶法(如HRP-抗dUTP抗體)或熒光法(如BrdU-FITC)來(lái)檢測(cè)結(jié)果，以顯示凋亡時(shí)DNA斷裂的程度。艾美捷向您推薦享譽(yù)全球的 Trevigen TUNEL全系列解決方案。這些方案包括，基于BrdU滲入并檢測(cè)原理的TACS® XL原位凋亡檢測(cè)方案，基于TdT酶將生物素Biotin標(biāo)記dUTP滲入并標(biāo)記的TACS® 2 TdT TUNEL檢測(cè)方案，專門針對(duì)不同組織(如神經(jīng)/腫瘤/心肌/血管/皮膚等)樣本的TUNEL檢測(cè)方案，另外還有分別適用于微孔板檢測(cè)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)的 TUNEL方案等。

其中Trevigen獨(dú)特的TACS® 2 TdT試劑盒利用Trevigen獨(dú)有的陽(yáng)離子優(yōu)化體系在特定組織內(nèi)增強(qiáng)標(biāo)記信號(hào)，并結(jié)合獨(dú)特的無(wú)毒標(biāo)記液提高操作的安全性。試劑盒內(nèi)選用高度純化的TdT酶配以生物素化核苷酸進(jìn)行原位標(biāo)記，后繼采用鏈親和素-辣根過(guò)氧化物酶體系進(jìn)行檢測(cè)，最終使用DAB或TACS藍(lán)色標(biāo)記進(jìn)行生物素標(biāo)記檢測(cè)。另外還有熒光檢測(cè)方案，即采用熒光素偶聯(lián)的鏈親和素檢測(cè)，并使用表面熒光顯微鏡直接觀察結(jié)果。這些完全試劑盒提供標(biāo)記所需全部試劑，包括兩種透化劑、標(biāo)記和檢測(cè)試劑、終止液、復(fù)染以及制備陽(yáng)性對(duì)照的TACS-核酸酶試劑。其中TACS 2 TdT原位凋亡核心試劑盒僅提供了TUNEL所需的基本試劑，包括TdT標(biāo)記、檢測(cè)、終止溶液以及TdT酶和相關(guān)緩沖液；TACS 2 TdT原位凋亡DAB檢測(cè)試劑盒則在核心試劑盒的基礎(chǔ)上還提供了兩種透化劑、復(fù)染試劑、制備陽(yáng)性參照的TACS-核酸酶，以及DAB底物；TACS 2 TdT藍(lán)色標(biāo)記原位凋亡檢測(cè)試劑盒則只是采用獨(dú)有的顯示藍(lán)色標(biāo)記，最終顯色為藍(lán)色；而TACS 2 TdT熒光標(biāo)記原位凋亡檢測(cè)試劑盒則最終為綠色熒光顯色并觀察。TACS® 2 TdT Replenisher Kit補(bǔ)充試劑盒僅提供了核心試劑盒中的TdT檢測(cè)溶液、TdT酶和相關(guān)緩沖液等。

TACS® 2 TdT系列試劑盒具有如下特點(diǎn)：1、基于TdT的原位標(biāo)記；2、高信噪比，信號(hào)強(qiáng)，背景低；3、提供DAB，TACS藍(lán)色標(biāo)記或熒光檢測(cè)等多種選擇的完全試劑盒；4、包含獨(dú)一無(wú)二的Cytonin通透化試劑；5、包含TACS-核酶陽(yáng)性對(duì)照試劑。

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