雞肉中抗生素檢測(cè)解決方案

近日，媒體曝光了肯德基的大供貨商 - 山西粟海集團(tuán)“45天食用雞”事件。一只雞用飼料和藥物喂養(yǎng)，從孵出到端上餐桌，只需要45天！ 報(bào)道稱(chēng)，僅在養(yǎng)殖階段的11天中，就有多達(dá)11種抗生素藥物喂給肉雞。這則消息在網(wǎng)絡(luò)上引起了廣泛的關(guān)注和討論。

 

抗生素（antibiotics）是由微生物（包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬）或高等動(dòng)植物在生活過(guò)程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類(lèi)代謝產(chǎn)物�？股�素能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能。上世紀(jì)40年代，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，飼料中添加抗生素或其發(fā)酵殘?jiān)�，能促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)。1950年，美國(guó)食品與藥物管理局（FDA）首次批準(zhǔn)在飼料中添加抗生素，以后，世界各國(guó)相繼進(jìn)行了抗生素的飼喂試驗(yàn)，并用于生產(chǎn)。中國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布了《允許作飼料藥物添加劑獸藥品種及使用規(guī)定》，允許用作飼料添加劑的抗生素品種有3類(lèi)30種，并分別對(duì)適用動(dòng)物、最低用量、最高用量及停藥期作了嚴(yán)格規(guī)定�？梢哉f(shuō)，正常添加的抗生素完全是合法合理的。而不合乎《允許作飼料藥物添加劑獸藥品種及使用規(guī)定》所添加的抗生素則是非法的。

 

目前常見(jiàn)的非法添加抗生素主要是抗生素的過(guò)量使用，以常見(jiàn)的抑菌類(lèi)抗生素—金霉素為例，《允許作飼料藥物添加劑獸藥品種及使用規(guī)定》中指出，食用動(dòng)物（包括肉雞）的使用年齡上限為10周，最高用量為5000萬(wàn)單位/噸（配合飼料），并且補(bǔ)充要求在高用量時(shí)低鈣飼料連用不得超過(guò)5天。過(guò)量使用會(huì)導(dǎo)致雞肉中殘留金霉素超標(biāo)。農(nóng)業(yè)部《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量(農(nóng)業(yè)部2002年235號(hào)公告)》要求，金霉素在雞肉中殘留量不得超過(guò)100 μg/kg。國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局也發(fā)布標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 20764-2006 可食動(dòng)物肌肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素殘留量的測(cè)定 液相色譜-紫外檢測(cè)法》，明確了檢測(cè)方法及檢測(cè)限度。

 

根據(jù)《GB/T 20764-2006》，RephiLe特別推出雞肉中金霉素檢測(cè)的解決方案。采用HPLC檢測(cè)法，檢出限為0.005 mg/kg。詳細(xì)解決方案如下：

1.  適用范圍

適用于牛肉、羊肉、豬肉、雞肉和兔肉中的金霉素殘留量的測(cè)定。

2.  原理

用0.1 mol/L Na₂EDTA-Mcllvaine（pH=4.0±0.05）緩沖液提取動(dòng)物肌肉中金霉素殘留，提取液經(jīng)離心后，上清液用Oasis HLB固相萃取柱和羧酸型陽(yáng)離子交換柱純化，HPLC檢測(cè)，外標(biāo)法定量。

3.  樣品提取

取樣品1 kg，充分?jǐn)囁椋�混勻，分成兩份，分別裝入潔凈容器中密封為試樣。-18 ℃冷凍保存。稱(chēng)取樣品6.00 g±0.01 g于50 mL具塞離心管中，加入30 mL Na₂EDTA-Mcllvaine緩沖溶液。均質(zhì)1 min后冰水浴超聲10 min。提取液以10000 r/min離心10 min，上清液倒入另一離心管中。殘?jiān)�加�?0 mL緩沖溶液重復(fù)提取一次。合并上清液。

4.  凈化

將樣品提取上清液加入Oasis HLB固相萃取柱，流速≤3mL/min。上清液完全流出后用5 mL甲醇+水（1+19）洗柱，并用真空泵抽干40分鐘。棄去流出液。用15 mL乙酸乙酯洗脫，收集洗脫液于100mL燒瓶中。

將上述洗脫液減壓條件下以≤3mL/min得流速通過(guò)羧酸型陽(yáng)離子交換柱。洗脫液完全流出后用5 mL甲醇洗柱，并用真空泵抽干5分鐘。棄去流出液。用4mL流動(dòng)相：乙腈+甲醇+0.01mol/L草酸溶液（2+1+7）洗脫，收集洗脫液于5mL樣品管中。定容至4mL。用13mm，0.22 μm PTFE針頭式過(guò)濾器過(guò)濾。

5.  色譜

色譜柱：Mightsil RP-18 GP 3μm（150mm×4.6 mm）；

流動(dòng)相：乙腈+甲醇+0.01mol/L草酸溶液（2+1+7）

流速：0.5 mL/min；

柱溫：25℃；

進(jìn)樣量：60 μL。

 

為確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，液相用水必須使用符合中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)GB 6682-2008的一級(jí)水。其他各種標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置最少需要用到二級(jí)水。RephiLe的Direct-Pure EDI與PURIST經(jīng)典組合套裝，可以同時(shí)提供高純水及超純水，滿(mǎn)足全方位的實(shí)驗(yàn)室用水需求。RephiLe Direct-Pure EDI高純水系統(tǒng)選用Siemens公司的EDI模塊，以自來(lái)水為進(jìn)水，提供穩(wěn)定優(yōu)質(zhì)的高純水，產(chǎn)品達(dá)到同類(lèi)產(chǎn)品先進(jìn)水平。PURIST系列超純水系統(tǒng)，精致小巧，使用簡(jiǎn)便，以純水為進(jìn)水，生產(chǎn)超純水，水質(zhì)超過(guò)或達(dá)到GB以及ASTM、CAP、CLSI等的一級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)。RephiLe純水系統(tǒng)已通過(guò)FCC、CE等多種認(rèn)證，同時(shí)有專(zhuān)業(yè)的驗(yàn)證工程師，提供所需的驗(yàn)證服務(wù)支持，以及通過(guò)各種標(biāo)準(zhǔn)所需的3Q認(rèn)證，有助于協(xié)助用戶(hù)通過(guò)GMP、GLP等體系認(rèn)證，可以保證用戶(hù)在使用中用水無(wú)憂。為答謝廣大用戶(hù)的厚愛(ài)，RephiLe在2012年末推出特別促銷(xiāo)活動(dòng)，每套經(jīng)典組合套裝僅售40888元，更有購(gòu)機(jī)好禮。詳情請(qǐng)參見(jiàn)。另外，RephiLe也可提供使用自來(lái)水作為進(jìn)水的一體化純水系統(tǒng)Direct Pure UP, 可同時(shí)生產(chǎn)RO及超純水，供廣大客戶(hù)選擇。

 

為更好地保護(hù)HPLC儀器，上樣前需將溶液預(yù)先過(guò)濾，除掉溶液中顆粒及微生物，防止色譜柱堵塞、損壞泵等情況發(fā)生，從而保證儀器的操作性能及延長(zhǎng)儀器使用壽命。RephiLe提供PES、PTFE、Nylon、MCE等多種針頭式過(guò)濾器，適用于色譜分析樣品過(guò)濾。

 

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