PURELAB flex（配生物過濾器）可以清除內毒素、RNase、DNase和細菌

（配ELGA生物過濾器）性能規(guī)格   • 內毒素 <0.001 EU/ml   • RNase <0.002 ng/ml   • DNase <20 pg/ml (<0.02 pg/μl)   • 細菌 <10 CFU/100ml（<0.1 CFU/ml） 以純水或自來水做進水連續(xù)生產超純水。 安裝ELGA LabWater生物過濾器后，即可生產去除了生物活性雜質的超純水。 去除了生物活性雜質的超純水適于細胞培養(yǎng)等生物化學和分子生物學 應用。

內毒素 內毒素是革蘭氏陰性活菌外膜脫落的脂多糖。 細菌細胞死亡時釋放出內毒素。 內毒素與細胞相互作用，造成多種不利影響（參考文獻1Dawson和參考文獻2　Nagano）。 內毒素對試管內受精（參考文獻3　Dumoulin）和細胞培養(yǎng)（參考文獻4　Stacey）等其他應用影響很大。 實驗（細胞分裂、電泳及其他生化工藝等）可靠性的提高得益于內毒素的清除。 在pH >2 時，內毒素帶負電，使用ELGA LabWater生物過濾器等帶正電過濾器可將其有效清除。帶電的過濾器對水流構成的障礙最小，最適合作為純水系統(tǒng)的終端過濾器。

內毒素挑戰(zhàn)實驗
對生物過濾器的挑戰(zhàn)實驗是向帶正電的過濾器進水中不斷注入高含量的內毒素，然后采用鱟變形細胞溶解物試驗（動態(tài)濁度法）測量產水中的內毒素濃度。

大多數(shù)的內毒素挑戰(zhàn)實驗均要使用凈化的LPS。 ELGA LabWater的科研團隊從純水中已有的細菌中生產出自己的LPS。 這是為了模仿逼真的挑戰(zhàn)實驗環(huán)境。

首先從純水中分離出細菌。然后將細菌接種到蛋白胨水中，在27℃的溫度下培養(yǎng)。對樣品反復進行加熱處理，用0.45μm 過濾膜進行過濾，由此得到濃縮的內毒素。

每個挑戰(zhàn)實驗持續(xù)5分鐘，得出以下總挑戰(zhàn)實驗結果：即使挑戰(zhàn)實驗超過了90 EU/ml，總挑戰(zhàn)實驗接近800000 EU，在生物過濾器后的產水中也未能檢測出內毒素（<0.001EU/ml）。

實際上，過濾器的進水中內毒素的含量極低（<0.1EU/ml）。為了更逼真地模仿實際情況，以內毒素含量為1EU/ml（標稱）的純水做進水，對生物過濾器做長時間的測試：在流過800升后仍未能檢出內毒素（<0.001EU/ml）。

DNase與RNase
很多人擔心純水中可能存在RNase與DNase等其他生物活性雜質。

純水中存在此類雜質可能會給實驗帶來嚴重的干擾。但是，離子交換樹脂和紫外燈可將其去除。定期殺菌和維護的設計獨特的純水系統(tǒng)，其產水中不含此類雜質。

本檢測使用增強版Ambion® Alert測試程序，該程序基于檢測可裂解熒光標記RNase或DNase基質。 測試結果表明RNase的檢測含量較低，達到 <0.002 ng/ml，DNase的含量為<20 pg/ml。即使此類雜質很高，PURElAB flex（配生物過濾器）也能有效地去除了RNase和DNase（RNase<0.002 ng/ml，DNase<0.02 ng/ml）。PURELAB flex（配生物過濾器）生產的純水可以替換限制使用二乙基焦碳酸（DePc）做水處理的情況（按照ELGA LabWater的建議，其對殺菌與維護有限制）。

TOC與電阻率沖洗
在從設備的產水中清除任何內毒素的同時，該生物過濾器必須不對水造成污染。 新過濾器首次使用時，快速電阻率與TOC沖洗十分方便；同時，也清楚表明其對產水的污染會始終很低。 這一點很重要，因為通過過濾器的產水純度是無法監(jiān)測的。生物過濾器的TOC與電阻率快速沖洗如下所示：

新的生物過濾器的TOC與電阻率沖洗

細菌挑戰(zhàn)實驗
在內，純水循環(huán)流過紫外燈，接受254和185nm的強紫外線照射，將細菌含量控制在極低水平。采用具有0.2μm細菌過濾能力的生物過濾器將剩余的微量細菌清除掉。在使用內含1 x 107 CFU/ml的料液進行細菌挑戰(zhàn)實驗時，生物過濾器完全清除了細菌：等效于對數(shù)減少系數(shù)>8。

下圖顯示了在6個月中，純水系統(tǒng)（配有生物過濾器）產水總活菌數(shù)（TVC）的典型數(shù)值。

總結
PURELAB flex（配生物過濾器）可極其有效地生產無生物活性雜質的超純水，因此，適用于使用無內毒素超純水、無細菌水及無核酸酶超純水等的應用。

參考文獻
文獻1： Dawson Me (1998) lAl update. Associates of cape cod; Vol. 16: 1-4
文獻2： Ref 2: nagano M, Takahashi y, Katagiri S (1999) J. Reprod. Dev.; 45: 239-242
文獻3： Dumoulin Jc, Menheere PP, evers Jl (1991) human Reproduction; 6: 730-734
文獻4： Stacey g (2007) in Medicines from Animal cell culture. Stacey g, Davis J. John Whiley &Sons, chichester, chapter 31

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