AO-EB雙染試劑盒說明書
AO-EB雙染試劑盒說明書
貨號：CA1140
規(guī)格：100ml/500ml
保存：4℃避光密封保存，有效期一年
產(chǎn)品簡介：
吖啶橙能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現(xiàn)為染色增強，熒光更為明亮，均勻一致的圓狀或固縮狀、團塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細胞形態(tài)：活細胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu)；早期凋亡細胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩(wěn)定劑不影響實驗效果。
使用方法：（僅供參考）
使用前先根據(jù)用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用現(xiàn)配。
對于貼壁細胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細胞，加入新的PBS；如果需要觀察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
注意事項：
含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。
染色液工作濃度和染色時間可根據(jù)具體實驗情況適當(dāng)調(diào)整，以期達到最佳效果。
相關(guān)試劑：
CA1020 ANNEXIN V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒
CA1120 Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
C0020 Hoechst 33258染色液（即用型）
C0060 DAPI溶液（1mg/ml）
31800 RPMI Medium 1640培養(yǎng)基
S9000 特級胎牛血清
貨號：CA1140
規(guī)格：100ml/500ml
保存：4℃避光密封保存，有效期一年
產(chǎn)品簡介：
吖啶橙能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現(xiàn)為染色增強，熒光更為明亮，均勻一致的圓狀或固縮狀、團塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細胞形態(tài)：活細胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu)；早期凋亡細胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩(wěn)定劑不影響實驗效果。
使用方法：（僅供參考）
使用前先根據(jù)用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用現(xiàn)配。
對于貼壁細胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細胞，加入新的PBS；如果需要觀察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
注意事項：
含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。
染色液工作濃度和染色時間可根據(jù)具體實驗情況適當(dāng)調(diào)整，以期達到最佳效果。
相關(guān)試劑：
CA1020 ANNEXIN V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒
CA1120 Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
C0020 Hoechst 33258染色液（即用型）
C0060 DAPI溶液（1mg/ml）
31800 RPMI Medium 1640培養(yǎng)基
S9000 特級胎牛血清
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