使用eBioscience流式抗體的常見(jiàn)問(wèn)題

Q. 是否能渦旋震蕩抗體或重組蛋白？

   我們不推薦震蕩蛋白或抗體溶液，這會(huì)改變產(chǎn)品的特性。通常在運(yùn)輸過(guò)程中，液體有可能已經(jīng)分散在管子中。推薦使用之前，瞬時(shí)離心，這樣抗體會(huì)沉到管底，以達(dá)到標(biāo)示的體積。

Q. 我能渦旋震蕩已經(jīng)標(biāo)記了抗體的細(xì)胞樣品嗎？

  可以，短時(shí)震蕩能保持細(xì)胞的最佳狀態(tài)。

Q. 標(biāo)記了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的細(xì)胞樣品能固定并保存嗎？

  大多數(shù)情況下，可以將樣品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中，暗處4°C 最長(zhǎng)可以保存3天，對(duì)檢測(cè)沒(méi)有影響。某些影響可能與克隆號(hào)有關(guān)。

Q. 不能馬上檢測(cè)的樣品，我該如何保存？

  首先，要獲得最好的效果，一定是推薦立即上機(jī)檢測(cè)。
  要保存染色完成的樣品，可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存，暗處4°C 最長(zhǎng)可以保存3天。對(duì)于tandem染料，如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等，eBioscience的數(shù)據(jù)顯示不會(huì)增加它們與APC或者PE的補(bǔ)償。某些影響可能與克隆號(hào)有關(guān)。

Q. 我可以用自己配制的固定緩沖液來(lái)保存細(xì)胞嗎？

  我們不推薦使用其他緩沖液，我們只能確保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。

Q. 有文獻(xiàn)提到與DEC205+ cells存在不兼容的情況，我能選擇哪些其他的標(biāo)記呢？

  其實(shí)CD205已被證實(shí)可以與PE-Cy5.5標(biāo)記抗體和鏈霉親和素標(biāo)記物結(jié)合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而，不能用于CD205+ 的樹(shù)突狀細(xì)胞。我們推薦使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 標(biāo)記來(lái)替代。

Q. 是否能渦旋震蕩抗體或重組蛋白？

   我們不推薦震蕩蛋白或抗體溶液，這會(huì)改變產(chǎn)品的特性。通常在運(yùn)輸過(guò)程中，液體有可能已經(jīng)分散在管子中。推薦使用之前，瞬時(shí)離心，這樣抗體會(huì)沉到管底，以達(dá)到標(biāo)示的體積。

Q. 我能渦旋震蕩已經(jīng)標(biāo)記了抗體的細(xì)胞樣品嗎？

  可以，短時(shí)震蕩能保持細(xì)胞的最佳狀態(tài)。

Q. 標(biāo)記了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的細(xì)胞樣品能固定并保存嗎？

  大多數(shù)情況下，可以將樣品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中，暗處4°C 最長(zhǎng)可以保存3天，對(duì)檢測(cè)沒(méi)有影響。某些影響可能與克隆號(hào)有關(guān)。

Q. 不能馬上檢測(cè)的樣品，我該如何保存？

  首先，要獲得最好的效果，一定是推薦立即上機(jī)檢測(cè)。
  要保存染色完成的樣品，可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存，暗處4°C 最長(zhǎng)可以保存3天。對(duì)于tandem染料，如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等，eBioscience的數(shù)據(jù)顯示不會(huì)增加它們與APC或者PE的補(bǔ)償。某些影響可能與克隆號(hào)有關(guān)。

Q. 我可以用自己配制的固定緩沖液來(lái)保存細(xì)胞嗎？

  我們不推薦使用其他緩沖液，我們只能確保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。

Q. 有文獻(xiàn)提到與DEC205+ cells存在不兼容的情況，我能選擇哪些其他的標(biāo)記呢？

  其實(shí)CD205已被證實(shí)可以與PE-Cy5.5標(biāo)記抗體和鏈霉親和素標(biāo)記物結(jié)合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而，不能用于CD205+ 的樹(shù)突狀細(xì)胞。我們推薦使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 標(biāo)記來(lái)替代。