全血中阿片類(lèi)藥物及代謝物進(jìn)行法醫(yī)毒理學(xué)直接分析

Jonathan P. Danaceau，Erin E. Chambers and Kenneth J. Fountain

沃特世公司（美國(guó)馬薩諸塞州米爾福德）

應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
■ 無(wú)需酶水解即可分析葡糖苷酸代謝物
■ 適用于由22種阿片類(lèi)藥物和阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛化合物構(gòu)成的綜合性藥物組
■ 與傳統(tǒng)的LLE、SPE或蛋白質(zhì)沉淀法相比，樣品制備快速簡(jiǎn)單
■ 去除了內(nèi)源性磷脂質(zhì)
■ 對(duì)所有分析物和代謝物具有線性響應(yīng)

沃特世解決方案
OstroTM96孔板
ACQUITY UPLC®BEH色譜柱
ACQUITY UPLC系統(tǒng)
Xevo® TQD質(zhì)譜儀

關(guān)鍵詞
阿片類(lèi)藥物，阿片類(lèi)，UPLC，法醫(yī)毒理學(xué)，全血

簡(jiǎn)介
天然和合成阿片類(lèi)藥物一直是法醫(yī)毒理學(xué)研究的一個(gè)重要方面。有比例相當(dāng)高的犯罪和/或死亡事件都是由誤用或?yàn)E用麻醉鎮(zhèn)痛藥（如羥考酮和氫可酮），以及非法阿片類(lèi)藥物海洛因所引起。法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室通常需要分析全血樣本中的不同藥物以確定確切的死亡原因，或是判斷是否在藥物作用下駕駛，或者出于其它犯罪或研究目的。過(guò)去，通常用酸或酶使樣品水解并釋放出葡糖苷酸代謝物之后再進(jìn)行GC/MS分析¹。通過(guò)酶水解將葡糖苷酸代謝物轉(zhuǎn)化為其游離形式的處理步驟增加了分析時(shí)間和成本，而且無(wú)法確保水解程度始終如一²。隨著現(xiàn)代UPLC®/MS/MS技術(shù)的出現(xiàn)，如今可直接對(duì)葡糖苷酸代謝物進(jìn)行分析^3-6。

全血分析可采用多種樣品制備方法，包括液液萃�。↙LE）和固相萃取（SPE）。最簡(jiǎn)單的一種方法就是細(xì)胞溶解之后進(jìn)行蛋白質(zhì)沉淀。本研究中介紹了一種快速直接的樣品制備方法，采用Ostro樣品制備板對(duì)全血樣品進(jìn)行預(yù)處理以裂解細(xì)胞，然后用乙腈沉淀，再用96孔板洗脫。所有樣品預(yù)處理均在Ostro板孔中進(jìn)行，無(wú)需離心或從各個(gè)離心管中轉(zhuǎn)移樣品。

樣品制備完成之后，對(duì)22種阿片類(lèi)藥物及其代謝物進(jìn)行UPLC/MS/MS分析。葡糖苷酸代謝物可直接進(jìn)行分析，無(wú)需酶水解或化學(xué)水解。校準(zhǔn)曲線呈線性，并可輕松達(dá)到相應(yīng)的檢測(cè)限。

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