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利用Xevo TQD定量測(cè)定基因毒性雜質(zhì)

瀏覽次數(shù):2056 發(fā)布日期:2014-8-22  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

利用Xevo TQD定量測(cè)定基因毒性雜質(zhì)

Joanne Mather, Dominic Moore, Robert S. Plumb 和 Paul Rainville
沃特世公司(美國(guó)馬薩諸塞州米爾福德)

簡(jiǎn)介:

烷基磺酸,尤其是甲磺酸、苯磺酸和對(duì)甲苯磺酸,作為一類常用 的烷化劑,在制藥行業(yè)中常被用作烷基化試劑和催化劑,并在API 的化學(xué)合成中用于純化步驟。此外,為了改善化學(xué)性質(zhì)或提高生 物利用度,這些磺酸也常用作藥物的最終成鹽。

合成反應(yīng)或再結(jié)晶步驟中任何殘留醇的存在都可能導(dǎo)致形成磺酸 的烷基酯。許多此類甲磺酸酯、苯磺酸酯或甲苯磺酸酯都被認(rèn)為 具有基因毒性,而其它酯類也可能存在基因毒性,因此需要在藥 物和藥品中進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

過(guò)去用于分析此類烷基磺酸酯的典型方法均建立在GC/MS或HPLC/UV/ MS的基礎(chǔ)之上,其中的衍生化步驟通常需要大約20到30分鐘的運(yùn) 行時(shí)間。之前,我們已經(jīng)展示了如何通過(guò)使用UPLC?/MS在不到5分 鐘的運(yùn)行時(shí)間內(nèi)獲得良好的結(jié)果。

在這篇應(yīng)用紀(jì)要中,我們將會(huì)介紹儀器設(shè)備的最新進(jìn)展如何針對(duì) 這些基因毒性雜質(zhì)提供更強(qiáng)的分析能力和易用性。我們還將展示 如何利用具有正負(fù)離子切換功能的Xevo TQD所擁有的高靈敏度縮短 此類雜質(zhì)的分析時(shí)間。此外,利用RADAR?降低基質(zhì)干擾有助于加 快方法開(kāi)發(fā)過(guò)程。

實(shí)驗(yàn):

液相色譜條件:

LC系統(tǒng): ACQUITY UPLC
色譜柱: ACQUITY UPLC HSS T3色譜柱,
2.1 x 50 mm, 1.8 μm
柱溫: 45 ?C
進(jìn)樣體積: 15 μL(20 μL定量環(huán),部分定量環(huán)模式)
流動(dòng)相A: 98 H20 2% MeOH 0.1%甲酸
流動(dòng)相B: 98 MeOH 2% H2O 0.1%甲酸

梯度表
時(shí)間(min)

流速

%A

%B

曲線

初始

0.600

95.0

5.0

——

2.50

0.600

2.0

98.0

6

3.00

0.600

2.0

98.0

6

4.00

0.600

95.0

5.0

1

4.50

0.600

95.0

5.0

1

負(fù)離子模式:

毛細(xì)管電壓: 0.8 kV
功能類型: 3通道的MRM

通道反應(yīng)

錐孔電壓

碰撞能量

化合物

95.00 > 79.90

40.0

15.0

甲磺酸

157.00 > 79.90 

45.0

24.0

苯磺酸

171.00 > 79.90

48.0

26.0

家苯磺酸

正離子模式:

毛細(xì)管電壓: 0.5 kV

通道反應(yīng)

錐孔電壓

碰撞能量

化合物

173.10 > 77.00

25.0

16.0

甲苯磺酸酯

187.00 > 77.00

25.0

22.0

苯磺酸乙酯

187.00 > 155.00

30.0

10.0

對(duì)甲苯磺酸甲酯

201.00 > 173.00

25.0

10.0

對(duì)甲苯磺酸乙酯

229.10 > 91.00

40.0

20.0

2S縮水甘油基對(duì)甲苯磺酸酯

結(jié)果與討論:

使用乙腈為多種已知基因毒性雜質(zhì)配制1 mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后用5%乙腈將濃度稀釋為0.1 至500 ng/mL。此外,還制備了一種樣品溶液: 將10 mg苯磺酸氨氯地平片磨碎并溶解,然 后標(biāo)準(zhǔn)添加1.5  μg基因毒性雜質(zhì)。

借助于IntelliStart,使用各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液幫助調(diào) 諧MS。即便在最佳的色譜性能下,也可能發(fā) 生共流出。在采集多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)定量 質(zhì)譜數(shù)據(jù)的同時(shí),采集來(lái)自于基質(zhì)的定性質(zhì) 譜掃描數(shù)據(jù)有助于監(jiān)測(cè)可能的干擾化合物, 從而確保檢測(cè)的耐用性和重現(xiàn)性。

在RADAR模式下,采集MRM數(shù)據(jù)的同時(shí)可以采 集正離子和負(fù)離子模式下整個(gè)范圍的MS全掃 描譜圖。該過(guò)程對(duì)MRM數(shù)據(jù)質(zhì)量基本無(wú)影響。 因此,您可以在準(zhǔn)確定量目標(biāo)化合物的同時(shí), 追蹤其它樣品基質(zhì)的組分,從而讓您對(duì)樣品 有更加深入的理解。

RADAR功能之所以可以實(shí)現(xiàn),是建立在Xevo TQD在MS、MS/MS、正離子與負(fù)離子模式超快 的切換速度且不會(huì)影響性能的基礎(chǔ)之上的。 使用RADAR輔助LC/MS/MS方法開(kāi)發(fā),以對(duì)加標(biāo) 藥片溶液中的雜質(zhì)進(jìn)行分析。利用最終所開(kāi) 發(fā)的方法來(lái)驗(yàn)證這套液質(zhì)系統(tǒng)對(duì)基因毒性雜 質(zhì)檢測(cè)的線性和靈敏度

結(jié)論:

與UPLC聯(lián)用,串聯(lián)四極桿檢測(cè)器Xevo TQD是基因毒性雜質(zhì)分析的最佳工具。UPLC/Xevo TQD可以提供很好的靈敏度及快速 的分析方法。利用其多種特點(diǎn),如IntelliStart和RADAR、正負(fù) 離子切換以及“所有時(shí)間內(nèi)所有數(shù)據(jù)”的生成,可快速輕松 地開(kāi)發(fā)出檢測(cè)的分析方法。這將顯著提高了實(shí)驗(yàn)室效率, 以應(yīng)對(duì)不斷增長(zhǎng)的科研和監(jiān)管需求。

來(lái)源:沃特世科技(上海)有限公司
聯(lián)系電話:800(400)8202676 (免費(fèi)電話支持專線)
E-mail:Jackie_qian@waters.com

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