利用CORTECS實(shí)心核顆粒色譜柱進(jìn)行HPLC梯度方法轉(zhuǎn)換

利用CORTECS實(shí)心核顆粒色譜柱進(jìn)行HPLC梯度方法轉(zhuǎn)換

Jonathan E. Turner, Bonnie A. Alden, Mia Summers, Kenneth Berthelette 和 Kenneth J. Fountain
沃特世公司(美國(guó)馬薩諸塞州米爾福德)

簡(jiǎn)介

將使用填充了大顆粒的大體積色譜柱的HPLC梯度方法轉(zhuǎn)換至填充高效CORTECS 2.7 μm顆粒的小體積色譜柱，可輕松縮短分析時(shí)間、節(jié)省溶劑與樣品消耗量，最終節(jié)約成本。在轉(zhuǎn)換HPLC梯度方法時(shí)，可通過適當(dāng)調(diào)整方法條件和選擇相當(dāng)?shù)纳�譜柱填料來避免對(duì)色譜分離性能的影響。

下述應(yīng)用紀(jì)要展示了針對(duì)阿巴卡韋相關(guān)化合物的典型HPLC梯度方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆椒ㄞD(zhuǎn)換。阿巴卡韋(Ziagen^®)是一種核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，被用于抗HIV的治療。該樣品由五種化合物組成，其中四種為主要成分阿巴卡韋的相關(guān)物質(zhì)，如圖1所示。此類檢測(cè)常用的色譜柱為全多孔C₁₈, 5 μm, 4.6 x 150 mm色譜柱。通過轉(zhuǎn)換為CORTECS C₁₈, 2.7 μm色譜柱，可大大縮短該梯度方法的分析時(shí)間，同時(shí)還能保持目標(biāo)峰的選擇性和分離度。

可輕松將使用填充大顆粒的大體積色譜柱的HPLC梯度方法轉(zhuǎn)換至填充高效CORTECS顆粒的小體積色譜柱。本應(yīng)用紀(jì)要介紹對(duì)阿巴卡韋相關(guān)物質(zhì)的典型HPLC梯度方法的進(jìn)行成功轉(zhuǎn)換，其通量增加了約四倍，同時(shí)保持了色譜分離性能。除了節(jié)省了時(shí)間外，溶劑消耗量還降低了約兩倍。當(dāng)采用CORTECS C₁₈, 2.7 μm, 4.6 x 75 mm色譜柱時(shí)，
所生成的反壓為4400 psi，完全在HPLC儀器的壓力限值(小于5000 psi)內(nèi)。HPLC梯度方法向CORTECS 2.7 μm色譜柱轉(zhuǎn)換時(shí)增加了通量，降低了溶劑消耗量，從而大大節(jié)約了成本。