使用超高效合相色譜(UPC2)對奈必洛爾對映體進行分離

解決方案

手性分析通常在藥物開發(fā)的早期階段中進行。由于合相色譜具有卓越的分離能力和較高的分析速度，已被證明是一款功能強大的手性分析技術(shù)。使用合相色譜還可減少有毒溶劑（通常與正相LC手性分析相關(guān)）的使用。

沃特世（Waters^®）ACQUITY UPC²系統(tǒng)采用超臨界CO₂作為主要流動相。UPC2技術(shù)將UPLC^®的性能優(yōu)勢充分應(yīng)用到了超臨界流體色譜（SFC）中。UPC²可在極短的時間內(nèi)完成藥物化合物對映體分離方法的篩查和開發(fā)，同時還能減少溶劑消耗量。

本研究展示了一種使用UPC2對奈必洛爾對映異構(gòu)體進行體分離的快速、高效的方法。本文展示的方法中，奈必洛爾標準品溶解在100%甲醇中，濃度為500 ppm。ACQUITY UPC2系統(tǒng)與4.6×150 mm，3 μm手性柱和ACQUITY UPC²PDA檢測器（波長220 nm）聯(lián)用。

采用上述方法，奈必洛爾異構(gòu)體的USP分離度為2.1。

多次連續(xù)進樣的結(jié)果表現(xiàn)出高度的重現(xiàn)性，20次重復(fù)進樣的保留時間和峰面積的%RSD值分別為0.1和1.0。

總結(jié)

本實驗通過配備3 μm色譜柱的ACQUITY UPC²系統(tǒng)展示了一種簡單、高效的奈必洛爾對映體分離方法。實驗中，奈必洛爾異構(gòu)體在6 min內(nèi)實現(xiàn)了基線分離。本文展示的方法相比于傳統(tǒng)LC方法，最高可節(jié)省65%的分析成本，并提
升最高80%的分析通量。與此同時，目前用于奈必洛爾分析的HPLC正相方法建議在開始分析色譜柱需平衡12到15 h，而使用本文描述的方法時，在UPC2中色譜柱只需平衡5到10 min。多次進樣結(jié)果顯示此方法具有高度可重現(xiàn)性。
所使用的流動相與質(zhì)譜儀兼容，因此有效拓寬了UPC2在生物分析研究方面的應(yīng)用范圍。