染色質(zhì)免疫共沉淀研究完整方案

真核生物的基因組DNA以染色質(zhì)的形式存在，研究蛋白質(zhì)與DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑。與傳統(tǒng)的EMSA技術(shù)相比，染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)（ChIP）能真實(shí)完整地反映結(jié)合在DNA序列上的調(diào)控蛋白，是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的最佳方法。

染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)（chromatin immunoprecipitation assay, ChIP）作為最佳的研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的方法，它的基本原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段段，通過(guò)對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

CHIP不僅可以檢測(cè)體內(nèi)反式因子與DNA的動(dòng)態(tài)作用，還可以用來(lái)研究組蛋白的各種共價(jià)修飾與基因表達(dá)的關(guān)系。而且，CHIP與其他方法的結(jié)合，擴(kuò)大了其應(yīng)用范圍：CHIP與基因芯片相結(jié)合建立的CHIP-on-chip方法已廣泛用于特定反式因子靶基因的高通量篩選；CHIP與體內(nèi)足跡法相結(jié)合，用于尋找反式因子的體內(nèi)結(jié)合位點(diǎn)；RNA-CHIP用于研究RNA在基因表達(dá)調(diào)控中的作用。由此可見(jiàn)，隨著CHIP的進(jìn)一步完善，它必將會(huì)在基因表達(dá)調(diào)控研究中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。

作為表觀遺傳學(xué)的專業(yè)解決方案供應(yīng)商，艾美捷向您推薦Epigentek品牌的最熱銷的常規(guī)的染色質(zhì)免疫試劑盒和最有特色的植物ChIP試劑盒。另外，除了成套的試劑盒外，艾美捷同樣能為您提供與ChIP試劑盒相關(guān)的ChIP級(jí)抗體，可廣泛用于包括ChIP、IHC、IF等在內(nèi)的多種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。

性價(jià)比最高的組織染色質(zhì)免疫共沉淀試劑盒(ChIP)(p-2002)提供了對(duì)細(xì)胞樣品進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)所需的所有試劑。并且本試劑盒中含有一種陽(yáng)性對(duì)照抗體(RNA聚合酶II抗體)、一種陰性對(duì)照抗體(正常小鼠的IgG)、GAPDH引物(可以作為陽(yáng)性對(duì)照來(lái)保證試劑盒中試劑和操作步驟沒(méi)出現(xiàn)問(wèn)題)。在大多數(shù)生長(zhǎng)期的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，RNA聚合酶II會(huì)在GAPDH基因啟動(dòng)子上富集，準(zhǔn)備起始轉(zhuǎn)錄，因此該啟動(dòng)子能與RNA聚合酶II發(fā)生免疫沉淀反應(yīng)，而不能與正常小鼠IgG發(fā)生。在本染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)中，細(xì)胞耦合了甲醛，提取出其中的染色質(zhì)。染色質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)?shù)拇驍啵�然后加入到微孔中與其表面上吸附的抗體發(fā)生免疫反應(yīng)。特異性結(jié)合到微孔上的DNA從抗體-捕獲蛋白-DNA復(fù)合物上釋放出來(lái)，翻轉(zhuǎn)后，通過(guò)本公司專門(mén)設(shè)計(jì)的高速離心柱純化。洗脫下來(lái)的DNA可直接用于隨后的各種分析。本試劑盒是基于96孔板的，市場(chǎng)上同類產(chǎn)品中最快捷的試劑盒，對(duì)CHIP過(guò)程進(jìn)行了徹底的簡(jiǎn)化，操作簡(jiǎn)捷，方便易學(xué)整個(gè)處理過(guò)程不到5小時(shí)，同時(shí)可拆卸式的96孔板模式使研究人員能根據(jù)自己需要選擇手工或是高通量分析。

(左圖為ChIP試劑盒(p-2002)簡(jiǎn)單便捷的實(shí)驗(yàn)流程)（右圖為ChIP試劑盒(p-2002)卓越性能）

作為最專業(yè)的表觀遺傳學(xué)產(chǎn)品供應(yīng)商，Epigentek獨(dú)創(chuàng)地推出了一個(gè)獨(dú)一無(wú)二的植物染色質(zhì)免疫沉淀試劑盒：EpiQuik Plant ChIP Kit（p-2014），極大地拓展了染色質(zhì)免疫沉淀的應(yīng)用領(lǐng)域。植物染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)試劑盒提供了對(duì)植物細(xì)胞樣品進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)所需的所有試劑。

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