TetraOne KO——基因敲除技術(shù)的重大突破

 

近日，賽業(yè)生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球?qū)＠�技術(shù)TetraOne基因敲除，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脫靶效應(yīng)困擾的革命性技術(shù)。TetraOneTM KO的出現(xiàn)，是ES打靶技術(shù)制備基因敲除鼠的一個重大突破。

 

 

傳統(tǒng)ES打靶、TALEN和CRISPR/Cas9是基因組編輯的三大技術(shù)及主要工具。新一代核酸酶基因編輯技術(shù)TALEN和CRISPR/Cas9作為現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)上的一次革新，它結(jié)合了轉(zhuǎn)基因技術(shù)簡便快速，沒有物種限制及ES細(xì)胞基因打靶技術(shù)精準(zhǔn)的優(yōu)點，在短短的幾年時間里便受到廣大科研人員的青睞。但由于其脫靶效應(yīng)至今無法避免，且難以勝任大片段的基因敲入，所以還遠(yuǎn)遠(yuǎn)談不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脫靶效應(yīng)將是未來的主要研究方向。

 

基于同源重組的ES打靶是基因敲除的業(yè)內(nèi)金標(biāo)準(zhǔn)，它通過同源重組技術(shù)將外源基因定點整合入靶細(xì)胞基因組上某一確定的位點，以達(dá)到定點修飾改造基因組某一基因的目的�；�因打靶技術(shù)目前已被廣泛認(rèn)為是一種理想的特定修飾與改造生物體遺傳物質(zhì)的最佳方法。尤其是條件性和誘導(dǎo)性基因打靶系統(tǒng)的建立，使得對基因在時間和空間上的靶位修飾更加明確、效果更加精確可靠。盡管如此，漫長的構(gòu)建周期（需時8-12個月）卻使很多研究者望而卻步。

 

很明顯，TALEN、CIRSPR/Cas9和傳統(tǒng)ES打靶基因敲除技術(shù)有著互補(bǔ)的作用，而TetraOneTM KO技術(shù)卻是兩者優(yōu)勢的結(jié)合。這在目前基因組編輯的技術(shù)研究中，無疑是最為值得關(guān)注的新一代革命性技術(shù)。它使更加快速精準(zhǔn)構(gòu)建基因打靶小鼠成為可能。

 

 

 

賽業(yè)生物科技采用獨特的建系和基因改造技術(shù)建立了具有遺傳優(yōu)勢的TetraOne ES細(xì)胞系，通過在胚胎發(fā)育前期進(jìn)行顯微注射，使TetraOne ES細(xì)胞100%代替內(nèi)源ES細(xì)胞，實現(xiàn)跨越“嵌合體”階段從而一步直接獲得TetraOne小鼠的基因打靶專利技術(shù)。實驗結(jié)果顯示，TetraOne小鼠的特征均與傳統(tǒng)ES打靶技術(shù)產(chǎn)生的F1代小鼠一致。

 

 

賽業(yè)生物提供利用TetraOne KO技術(shù)構(gòu)建的完全性基因敲除小鼠、條件性基因敲除小鼠及定點敲入小鼠的技術(shù)服務(wù)。其構(gòu)建流程直接跨越了嵌合體階段，實現(xiàn)6個月完成構(gòu)建的極速周期：

 

 

 

賽業(yè)生物科技集團(tuán)是全球領(lǐng)先的多元化跨國生物科技實體，作為全球最大的轉(zhuǎn)基因/基因敲除模式動物商業(yè)技術(shù)平臺，賽業(yè)模式動物中心動物種群規(guī)模超過10萬只，每年可構(gòu)建基因敲除鼠模型500例、轉(zhuǎn)基因鼠模型5000例以上，引用文獻(xiàn)已累計達(dá)600篇。目前已服務(wù)于全球數(shù)百個頂級生命科學(xué)實驗室和跨國制藥公司，是最受國際關(guān)注和認(rèn)可的中國基因工程模式動物商業(yè)服務(wù)平臺。

 

2009年，賽業(yè)通過ISO9001:2008認(rèn)證并于2012年順利通過復(fù)審，確保向廣大專家學(xué)者提供的所有產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)符合國際標(biāo)準(zhǔn)。AAALAC認(rèn)證的順利通過，使賽業(yè)成為華南地區(qū)極少數(shù)個獲得國際實驗動物評估和認(rèn)可委員會國際認(rèn)證的單位之一。這不僅是實驗動物質(zhì)量和生物安全水準(zhǔn)的象征，更是國際前沿醫(yī)學(xué)研究的質(zhì)量標(biāo)志。

 

賽業(yè)公司目前在美國加州Santa Clara 建立起活體實驗鼠檢測、隔離中心，成為國內(nèi)唯一一家具有活體實驗鼠類出口能力的生物企業(yè)；通過國家出入境檢驗檢疫部門的考核，成為華南地區(qū)第一家生物材料出入境綠色通道試點單位，加速了實驗動物出入境審批流程，并進(jìn)一步提升了賽業(yè)模式動物中心國際服務(wù)的能力。