使用CytoFLEX流式細胞儀+熒光染料CFSE檢測細胞增殖

熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價結(jié)合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。

材料與方法
1.試劑

2.樣品制備

數(shù)據(jù)分析
在FSC/SSC上圈出淋巴細胞，使用FSC-W/FSC-A排除黏連體，CFSE/CD19圖中圈出CD19陽性細胞，使用CFSE單參分別看淋巴細胞與CD19陽性（B細胞）的增殖情況。

結(jié)果
對照組：

結(jié)果顯示，經(jīng)過CpG 刺激3 天后的CD19 陽性細胞增殖效率比對照組有明顯的提升（23.44%:18,70%）。
CytoFLEX 能明顯的區(qū)分淋巴細胞增殖的不同代數(shù)，從圖中看至少有明顯的5 代細胞，而且CD19 陰陽性區(qū)分也十分明顯，體現(xiàn)出了出眾的儀器靈敏度與分辨率。