NF-κB(p65)/ NF-κB(p50)活性分析試劑盒原理及應(yīng)用介紹

瀏覽次數(shù)：7261　發(fā)布日期：2016-3-16　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

NF-κB/Rel轉(zhuǎn)錄因子家族包含幾種結(jié)構(gòu)相關(guān)的蛋白（p65/p105,p52/p100,RelA(p65),c-Rel/ NF-κB)形成同源和/或異源二聚體。該轉(zhuǎn)錄因子家族成員調(diào)控超過150種目的基因，包括炎癥細(xì)胞因子、趨化因子、免疫受體、細(xì)胞粘附分子等的表達(dá)。正因為如此，NF-κB被認(rèn)為是“免疫應(yīng)答的中心調(diào)節(jié)物”。作為二聚體，這些轉(zhuǎn)錄因子與DNA序列結(jié)合（這些結(jié)合位點被稱為“κB位點”），從而調(diào)節(jié)目的基因的表達(dá)。在大多數(shù)細(xì)胞中，NF-κB/Rel轉(zhuǎn)錄復(fù)合物以未活化的形式存在于胞漿中，與抑制劑IκB結(jié)合。當(dāng)細(xì)胞受到刺激后，一些列的磷酸化、泛素化反應(yīng)導(dǎo)致IκB降解，NF-κB轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)入細(xì)胞核。

由于NF-κB轉(zhuǎn)錄因子在人類炎癥反應(yīng)和其他疾病中的重要作用，吸引了越來越多研究者的目光，而細(xì)胞中NF-κB各亞基活性的檢測是NF-κB研究中必不可少的一步！

怎樣安全、方便、有效的檢測細(xì)胞中NF-κB各亞基活性呢？

艾美捷給出了答案：NF-κB (p65) Transcription Factor Assay Kit（貨號：10007889）及NF-κB (human p50) Transcription Factor Assay Kit（貨號：10006912）。在前期的樣本處理中，還可以使用細(xì)胞核提取試劑盒（Nuclear Extraction Kit，貨號：10009277）。

NF-κB（p65）/ NF-κB（p50）轉(zhuǎn)錄因子分析試劑盒原理：

微孔板預(yù)先包被含有NF-κB結(jié)合位點的dsDNA寡核苷酸，加入細(xì)胞核提取物，使NF-κB蛋白結(jié)合到dsDNA上，洗滌除去未結(jié)合組分，先后加入NF-κB特異性抗體和HRP標(biāo)記的二抗。加入酶底物后，通過酶促反應(yīng)，讀取OD450值來定量樣本中NF-κB的活性。