定量Western Blotting
熒光檢測的優(yōu)勢
精確的western blot蛋白定量,要求在寬泛的范圍內(nèi)信號(hào)與蛋白濃度呈現(xiàn)線性變化。
對(duì)于化學(xué)發(fā)光檢測方法,雖然靈敏度極高,但由于其原理是酶促反應(yīng),信號(hào)隨時(shí)間變化,重復(fù)性差。
熒光檢測是定量western blot的“金標(biāo)準(zhǔn)”。信號(hào)強(qiáng)度與結(jié)合在靶標(biāo)蛋白上的抗體濃度呈正比例關(guān)系。
Azure Biosystems c400,c500和c600成像系統(tǒng)進(jìn)行熒光檢測時(shí),能夠呈現(xiàn)16bit位深的圖像,位深越大(16bit vs. 12bit),濃度檢測范圍越寬。熒光檢測另一優(yōu)勢是可以進(jìn)行多重檢測(無需剝離和二次孵育,即可檢測2種或更多蛋白)。
現(xiàn)在您可以快速、簡單地檢測磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白了。
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