Molecular Devices 使用CloneSelect Imager系統(tǒng)在半固體培養(yǎng)基中進(jìn)行單克隆驗(yàn)證

簡(jiǎn)介
生物藥品審批的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)一直都在不斷變化。其中用于細(xì)胞系單克隆來(lái)源的監(jiān)管條例驅(qū)使我們要在生物藥物開發(fā)過(guò)程中使用更有效的技術(shù)或方法。許多研究人員通常使用成像系統(tǒng)(如CloneSelect Imager)在液體培養(yǎng)基中驗(yàn)證單克隆和監(jiān)控細(xì)胞的生長(zhǎng)。其實(shí)，CloneSelect Imager系統(tǒng)也可以在半固體培養(yǎng)基中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像。細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中的位置比較固定，使研究人員可以更加準(zhǔn)確地在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)同一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行成像。實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法通常使用有限稀釋進(jìn)行細(xì)胞克隆。但是，這種方法使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，使追蹤細(xì)胞變得比較困難或不夠準(zhǔn)確。因?yàn)樵谔幚砦⒖装宓倪^(guò)程中，懸浮細(xì)胞容易在孔內(nèi)發(fā)生位置移動(dòng)(Figure1)。不能確保不同時(shí)間點(diǎn)成像的 是同一個(gè)細(xì)胞，從而大大降低單克隆驗(yàn)證的準(zhǔn)確性。此外，有限稀釋有可能在一個(gè)孔內(nèi)加入多個(gè)細(xì)胞，需要進(jìn)行額外多次亞克隆來(lái)提高單克隆的概率。使用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞給科研人員提供了一個(gè)更快更簡(jiǎn)單的克隆方法，而且有利于追蹤細(xì)胞的生長(zhǎng)。細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中的位置相對(duì)定，在常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中細(xì)胞位置不會(huì)移動(dòng)，可以生長(zhǎng)成獨(dú)立單個(gè)的細(xì)胞克隆。所以，可以在同一個(gè)孔內(nèi)種植多個(gè)細(xì)胞，而且通過(guò)不同時(shí)間點(diǎn)成像，能夠清晰追蹤單個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，提供單克隆的數(shù)字驗(yàn)證數(shù)據(jù)。CloneSelect Imager為研究人員提供了一個(gè)在半固體培養(yǎng)基中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像的方法。這個(gè)系統(tǒng)使用非侵入性檢測(cè)方法，無(wú)需標(biāo)記細(xì)胞直接進(jìn)行成像，可以對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)情況進(jìn)行準(zhǔn)確定量；進(jìn)行單細(xì)胞來(lái)源克隆驗(yàn)證，確保只選擇穩(wěn)定的單克隆用于下游研究。本文通過(guò)實(shí)際實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證CloneSelect Imager在CloneMedia™CHO Growth A半固體培養(yǎng)基中對(duì)懸浮CHO-s細(xì)胞的成能。這種半固體培養(yǎng)基成份經(jīng)過(guò)專門優(yōu)化，適合各種CHO細(xì)胞系的生長(zhǎng)。