神經(jīng)科疾病動物模型的制作經(jīng)驗方法
腦缺血模型的制作：
制作腦缺血動物模型的方法很多，但常用方法主要有結扎法和栓塞法兩種，結扎法是運用外科手段結扎腦的供血動脈，中止腦的血氧供應，它可以進一步分為顱內結扎和顱外結扎。顱外結扎主要是用于制作全腦缺血模型，可進一步分為：①4血管結扎，即結扎頸總動脈/頸內動脈和椎動脈； ②2血管結扎，即結扎兩側頸總/頸內動脈，同時抽取動物一定量的血液，使血壓降低到50mmHg以下，達到造成全腦缺血的目的。
這種方法因為需要監(jiān)視和控制血壓，實驗條件要求嚴格，且因椎動脈未予結扎，往往造成的腦缺血是不完全的。另一種兩血管結扎法是用沙土鼠（Gerbil）進行，利用沙土鼠腦底Willis動脈環(huán)發(fā)育不全后交通動脈缺如的特點，結扎兩側的頸總或頸內動脈造成前腦缺血。栓塞法是用自體血凝塊、塑料或玻璃微球來栓塞實驗動物頸動脈、腦內大動脈或微動脈，造成腦組織缺血模型，該法簡便易行，但可控性、可重復性差，且不能再灌流。
1. 實驗動物
實驗動物的選擇對腦缺血模型是非常重要的，理論上兔、貓、狗和靈長類都可被用來制作腦缺血模型，但更多的人傾向于選擇使用鼠作實驗。這主要是基于如下認識：因為鼠是小動物，價格便宜，軀體小，消耗藥品試劑較少；鼠的腦血管解剖和生理與高級動物無明顯差異；一些在體的實驗操作更容易進行，甚至在倫理學更容易接受等等。
2. 儀器和設備
制作腦缺血動物模型的儀器設備分為二類：一類是為動物手術服務，包括一套手術器械，手術顯微鏡，顱鉆，腦立體定位儀，溫度控制裝置（控溫儀、紅外線燈和加熱墊），呼吸機；另一類是用于監(jiān)測和分析的儀器，包括腦電記錄裝置，血壓記錄裝置，多譜勒血流記錄儀，血氣血糖分析儀。
3. 四血管結扎腦缺血模型的制作
這是一個廣泛應用的腦缺血模型。最常用的為Pulsinelli的改良方法。該模型選用Wistar大鼠，可以在清醒和自由運動狀態(tài)下制作嚴重的腦缺血和恒定的病理學改變。該模型分二個階段制作，第一階段：將動物麻醉，按置在腦立體定位儀上，調節(jié)耳桿和門齒高度使鼠頭前傾約30度，同時用橡皮栓住鼠尾給以輕度的牽拉力，使頸椎伸直，翼孔呈水平位，便于觀察。枕骨下第一頸椎水平正中切口，仔細分離兩側第一頸椎橫突，暴露第一頸椎橫突上的翼孔，翼孔下有兩則椎動脈通過，用小的單極或雙極電凝器插入翼孔燒灼閉塞雙側椎動脈。然后動物取背位，頸部正中切口，分離頸動脈鞘，注意不要損傷迷走神經(jīng)和頸動脈鞘后方的頸交感干。用外科縫線套住兩側頸總動脈（不要結扎），將線頭藏于皮下，簡單關閉切口；第二階段：待動物麻醉清醒后自由飲水，但禁食12～24小時后，將動物于清醒狀態(tài)下，取背位，分別用繩子固定四肢和門齒，以控制動物掙扎。小心分離頸前部的切口，辯認套在頸總動脈上的縫線，輕輕牽起，將線套收緊或者用微血管夾夾閉雙側頸總動脈。此時在2～3秒鐘內大鼠將昏迷并喪失對光反射。缺血后2～3分鐘可出現(xiàn)異常腦電圖，并持續(xù)到缺血結束。頸總動脈的關閉時間根據(jù)實驗設計而定，通常取10～20分鐘�；杳院头瓷湎侨毖欠癯晒Φ臉酥尽�(jù)統(tǒng)計約有四分之三的大鼠經(jīng)上述二階段處理可導致缺血成功。缺血期間自主呼吸和角膜反射的存在提示腦干血液供應的存在，這是因為脊髓前動脈供血的原因。缺血結束后松開頸總動脈，動物通常很快清醒。但在24～72小時內將有一部分動物出現(xiàn)缺血性抽搐，如果缺血持續(xù)30分鐘，在24小時內將有20%、72小時有40%的鼠發(fā)生缺血性抽搐，這些發(fā)生抽搐的鼠在結果分析時應被排除。
約有四分之一的鼠缺血不成功，其中2/3是昏迷不完全，另外1/3死于呼吸衰竭。該模型的制作的關鍵是燒灼椎動脈，由于椎動脈不能直接看到，這就需要操作者具有一定的經(jīng)驗，適當?shù)恼莆諢频臅r間和電極與翼孔的角度，同時要避免損傷腦干
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