奧盛Nano-300微量分光光度計(jì)與國外某知名品牌dsDNA檢測結(jié)果的比較

1.實(shí)驗(yàn)方法

首先將dsDNA標(biāo)品從最高濃度用TE緩沖液梯度稀釋，每次稀釋2倍，共稀釋9次。在兩款儀器上檢測dsDNA樣品，每個樣品重復(fù)檢測4次，記錄數(shù)據(jù)，并計(jì)算核酸濃度的平均值（mean）和標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 檢測界面

Nano-300和國外品牌均采用圖標(biāo)化設(shè)計(jì)軟件界面，檢測界面直接顯示檢測數(shù)據(jù)及樣品的峰型，直觀讀出樣品的濃度、OD230、OD260、OD280以及OD260與OD230、OD280的比值，非常容易得出樣品是否有雜峰，是否含有雜質(zhì)。

2.2 準(zhǔn)確性結(jié)果比較

我們檢測了9個稀釋后的dsDNA樣品，并計(jì)算dsDNA濃度的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差（圖3）。從圖中可以看出兩款儀器檢測的dsDNA濃度趨勢符合稀釋后的濃度梯度，而且對比這兩款儀器的檢測結(jié)果，在不同濃度樣品中dsDNA濃度相差不大。

圖3.樣品濃度平均值對比

(由于我們不知道樣品的濃度，因此我們以樣品的濃度倍數(shù)作為橫坐標(biāo))

2.3 線性結(jié)果比較

將檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行線性擬合，發(fā)現(xiàn)兩款儀器的R2是一致的（圖4），結(jié)果表明Nano-300與國外品牌檢測結(jié)果一樣具有線性。

圖4. Nano-300（左）和國外品牌（右）線性對比

2.4穩(wěn)定性結(jié)果比較

兩款儀器再穩(wěn)定性方面均表現(xiàn)優(yōu)秀（表1），國外品牌在樣品濃度低于10ng/μl時CV值為3.78%，CV值隨著檢測濃度的上升而降低，當(dāng)濃度高于50ng/μl后，CV值小于1%；Nano-300在各個濃度范圍表現(xiàn)良好，CV值最高也僅為2.02%。上述數(shù)據(jù)顯示，Nano-300檢測穩(wěn)定性在低濃度時要略優(yōu)于國外品牌。

表1. Nano-300和國外品牌檢測結(jié)果對比

2.5 OD260/OD280比值比較

表3是OD260/OD280、OD260/OD230結(jié)果比較，從總體上看，這兩款儀器的兩個比值相差不大。Nano-300檢測結(jié)果OD260/OD280比值基本上在1.8～1.9之間；國外品牌檢測結(jié)果OD260/OD280比值較高，在1.9附近。但在低濃度時，Nano-300穩(wěn)定性優(yōu)于國外品牌。兩者OD260/OD230比值及穩(wěn)定性均差異不大。

表3. OD260/OD280、OD260/OD230結(jié)果比較

3.結(jié)論

 a.兩款儀器操作界面均采用圖形化，但是國外品牌在操作便捷性以及結(jié)果處理上要優(yōu)于Nano-300；

 b.這兩款儀器在檢測dsDNA時準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性接近，且線性良好，在低濃度時，Nano-300的穩(wěn)定性要優(yōu)于國外品牌；